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《【生物工程專業(yè)】【畢業(yè)設(shè)計(jì)+文獻(xiàn)綜述+開題報(bào)告】產(chǎn)淀粉酶菌株鑒定及酶的制備》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、（20屆）畢業(yè)論文淀粉酶菌株鑒定及酶的制備III摘要:從自然界中分離得到一株高產(chǎn)淀粉酶菌株，根據(jù)菌落形態(tài)和常規(guī)生理生化鑒定方法對菌株進(jìn)行鑒定，為了確定該菌株在分類學(xué)上的位置，對這一菌株進(jìn)行16SRNA分子鑒定。主要是通過16SrDNA測序與GenBank中已有的序列比對來鑒定菌種，序列比對鑒定為與Bacillusamyloliquefaciens有99%的相似度。通過分級鹽析進(jìn)行酶制備，純化倍數(shù)為4.99，活力回收率為33%。實(shí)驗(yàn)對菌株進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)的研究，該酶的最適反應(yīng)溫度為60℃，最適反應(yīng)pH值為6.0。關(guān)鍵詞:淀粉酶；菌種鑒定；酶制備IIIAbstract
2、:Astrainofamylaseproducingwasisolatedfromnature.Thestrainwasidentifiedbytheshapeandgeneralphysiologicalandbiochemicalproperties.Inordertoconfirmthelocationintaxonomy,16SrDNAsequenceofthestrainwassequencedandithadthesimilarityof99％withthatoftheBacillusamyloliquefaciens.Amylasewhichise
3、xtracellularinincubationperiodofthestraincanbepurifiedbysaltout.Theoptimumtemperatureofamylaseis60℃andtheoptimumpHis6.0.Keywords:amylase;strainidentification;preparationsofenzymesIII目錄摘要……………………………………………………………………………………………………ⅠAbstract………………………………………………………………………………………………Ⅱ1緒論11.1高產(chǎn)淀粉酶的來
4、源11.2菌種鑒定的方法概況11.3α-淀粉酶的研究21.3.1α-淀粉酶分離純化方法的研究21.3.2α-淀粉酶活力測定方法的研究31.4淀粉酶的應(yīng)用31.4.1在食品工業(yè)中的應(yīng)用31.4.2在造紙業(yè)中的應(yīng)用31.4.3在清潔劑生產(chǎn)中的應(yīng)用31.4.4在醫(yī)藥行業(yè)中的應(yīng)用32實(shí)驗(yàn)方法42.1材料、試劑和儀器42.1.1生物材料42.1.2主要試劑42.1.3培養(yǎng)基配方42.1.4主要儀器和設(shè)備42.2實(shí)驗(yàn)方法52.2.1菌種活化和培養(yǎng)52.2.2菌落及生理生化特性鑒定52.2.3菌種的分子鑒定52.2.4菌種的發(fā)酵62.2.5淀粉酶活力測定62.2.6蛋白質(zhì)含量
5、的測定62.2.7酶的制備62.2.8酶學(xué)性質(zhì)研究73結(jié)果與分析93.1菌落生理生化特性鑒定93.2菌株分子鑒定結(jié)果93.3淀粉酶分離純化結(jié)果103.4淀粉酶酶學(xué)性質(zhì)的研究結(jié)果113.4.1酶反應(yīng)的最適溫度和酶的熱穩(wěn)定性研究113.4.2酶反應(yīng)的最適pH值和酸穩(wěn)定性124結(jié)論14參考文獻(xiàn)15致謝171緒論淀粉酶是一種能催化淀粉水解轉(zhuǎn)化成葡萄糖、麥芽糖及其它低聚糖的一群酶的總稱，它是最早用于工業(yè)化生產(chǎn)并且迄今仍是用途最廣、產(chǎn)量最大的酶制劑產(chǎn)品之一。淀粉酶一般作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖，是水解α-1,4-糖苷鍵的酶。不同種類的淀粉酶水解淀粉
6、會生成不同的糖類產(chǎn)物，根據(jù)淀粉水解生成糖類產(chǎn)物的異頭碳原子構(gòu)型的不同可將淀粉酶分為α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶作用于淀粉時(shí)從淀粉分子的內(nèi)部隨機(jī)切開α-1,4糖苷鍵，生成糊精和還原糖，α-淀粉酶分布廣泛，已是一種十分重要的酶制劑，α-淀粉酶大量應(yīng)用于糧食加工、食品工業(yè)、釀造、發(fā)酵、和醫(yī)藥行業(yè)等，它占了整個(gè)酶制劑市場份額的25%左右[1]。1.1高產(chǎn)淀粉酶的來源除動物自身消化道可分泌一些淀粉酶外，淀粉酶的另外兩大來源是植物和微生物，但是在我國，淀粉酶制劑的品種和生產(chǎn)菌株都很單一，淀粉酶酶活也較國外同行業(yè)低。在近年來的菌種選育中，盡管轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)化和基因克隆等現(xiàn)代分子
7、生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用，但是目前投入商業(yè)化生產(chǎn)的淀粉酶生產(chǎn)菌株幾乎都是通過從自然界中分離得到的野生型菌株，然后加以改良得到。1.2菌種鑒定的方法概況[2]通?？砂盐⑸锏姆诸愯b定方法分成4個(gè)不同水平：①細(xì)胞的形態(tài)和習(xí)性水平，例如用經(jīng)典的研究方法，觀察微生物的形態(tài)特征、運(yùn)動型、酶反應(yīng)、營養(yǎng)要求、生長條件、代謝特性、致病性、抗原性和生態(tài)學(xué)特性等；②細(xì)胞組分水平包括細(xì)胞壁、脂類、醌類和光合色素等成分的分析；③蛋白質(zhì)水平，包括氨基酸序列分析、凝膠電泳和各種免疫標(biāo)記技術(shù)等；④核酸水平，包括G+Cmol%值的測定，核酸分子雜交，16S或18SrRNA寡核苷酸序列分析，重要基
8、因序列分析和全基因組測序
