探索淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用.doc

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1、19仝婷婷探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用1、實驗目的（1）初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。（2）探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應。2、實驗原理淀粉和蔗糖都沒有還原性,也就是都不能使斐林試劑還原,所以都不能與斐林試劑發(fā)生反應。唾液淀粉酶將淀粉水解成的麥芽糖則具有還原性,能夠使斐林試劑還原,生成磚紅色的沉淀。蔗糖水解產(chǎn)生的葡萄糖和果糖都具有還原性,但唾液淀粉酶不能將蔗糖水解。試驗中可以用菊糖代替蔗糖。這是因為菊糖是由多個果糖分子縮合而成的，與淀粉同屬于多糖，用菊糖與淀粉進行對比實驗，更具有說服力。3、實驗材料質量分數(shù)分別為3%的可溶性淀粉溶液和蔗糖溶液；質量分數(shù)

2、為2%的新鮮淀粉酶（化學試劑商店有售）溶液。4、試劑與儀器斐林試劑（也可以用班氏試劑）試管、大燒杯、量筒、滴管、溫度計、試管夾、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、火柴。5、實驗方法與步驟（1）取兩支潔凈的試管，編上號，然后向1號注入2mL可溶性淀粉溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。向2號注入2mL蔗糖溶液和2mL新鮮淀粉酶溶液。（2）輕輕振蕩這兩支試管，使試管內(nèi)的液體混合均勻，然后將試管的下半部浸到60℃左右的熱水中，保溫5min。（3）取出試管，各加入2mL斐林試劑（邊加入斐林試劑，邊輕輕振蕩這兩支試管，以便使試管內(nèi)的物質混合均勻）。（4）將兩支試管的下半部放進盛有熱水的大燒杯中,用

3、酒精燈加熱,煮沸并保持1min。（5）觀察并記錄兩支試管內(nèi)的變化6、注意事項①做好本實驗的關鍵是蔗糖的純度和新鮮程度。這是因為蔗糖是非還原性糖，如果其中混有少量的葡萄糖或果糖，或蔗糖放置久了受細菌作用部分分解成單糖，則與斐林試劑共熱時能生成磚紅色沉淀，使人產(chǎn)生錯覺。為了確保實驗的成功，實驗之前應檢驗一下純度。普通的細粒蔗糖往往是由于部分水解而具有一些還原糖?？捎檬惺鄞髩K冰糖，水洗去其表面葡萄糖得到純凈的蔗糖。②實驗中要將試管的下半部浸到37℃的溫水中，因為淀粉酶在適宜的溫度條件下催化能力最強。③在實驗中，質量分數(shù)為3%的蔗糖溶液要現(xiàn)配現(xiàn)用（以免被細菌污染變質），取唾液時

4、一不定期要用清漱口，以免食物殘渣進入唾液中。④制備的可溶性淀粉溶液，一定要完全冷卻后才能使用，因為溫度過高會使酶活性降低，甚至失去催化能力。⑤實驗中如果2號試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀，可能的原因是：蔗糖溶液放置的時間過長，蔗糖被溶液中的微生物分解成還原性的糖，從而影響實驗效果。這時應臨時配制蔗糖溶液。另一個可能的原因是試管不干凈，所以實驗之前應將試管用清水再清洗一次，試管編號要醒目。219仝婷婷⑥實驗步驟一定要按要求的程序進行，不可隨意改變。⑦如果實驗中，自己的實驗結果與結論上的預期結果不一致，應再設計實驗，進行進一步的驗證或找出問題所在。7、實驗結果與討論1號管中出現(xiàn)磚紅

5、色沉淀，2號管無顏色變化。[實驗思路拓展]酶的專一性驗證1、實驗目的通過對不同酶消化作用的比較來驗證酶作用的專一性。2、實驗原理酶是由生物活細胞所產(chǎn)生的一類蛋白質，在生物體內(nèi)新陳代謝的許多化學反應中起催化劑作用。作為生物催化劑的酶，跟一般的化學催化劑不同，它表現(xiàn)出高度的專一性，這是酶作用的顯著特征。3、材料器具蛋白花、菠蘿汁、稀釋唾液、試管、移液管、燒杯、酒精燈、三角架、石棉網(wǎng)、溫度計、火柴；1%淀粉糊，胃蛋白酶液、革蘭氏碘液。方法一唾液淀粉酶的特性4、實驗步驟驗證酶作用的專一性，準備2支試管，分別編號后，在2支試管內(nèi)各裝入1%淀粉糊2mL。在1號試管加入稀釋唾液2mL

6、，2號試管加入胃蛋白酶液2mL，把這2支試管放在37℃水浴中保溫處理10min。用革蘭氏碘液測試并觀察水樣的顏色變化。5、注意事項在使唾液逐漸稀釋過程中，應該注意把試管中的唾液充分搖勻。6、分析和討論1號試管水樣用革蘭氏碘液測試，不出現(xiàn)藍色反應，說明管內(nèi)淀粉已被唾液中唾液淀粉酶所分解，而沒有淀粉的存在；而2號試管中的水樣用草蘭氏碘液測試則呈現(xiàn)藍色，說明有淀粉存在。結果表明，對淀粉產(chǎn)生消化作用的酶是唾液淀粉酶，而不是胃蛋白酶，由此證明了酶作用的專一性。方法二菠蘿蛋白酶的特性4、實驗步驟驗證酶作用的專一性，準備2支試管，分別編號后，在2支試管內(nèi)各裝入2mL蛋白花。在1號試管

7、內(nèi)加入新鮮菠蘿汁2mL，2號試管中加入稀釋唾液2mL。充分混勻后，放在37℃水浴中保溫處理。20~30min后觀察各管中蛋白花的形狀。5、分析和討論菠蘿汁中含有分解蛋白質的菠蘿蛋白酶，因此，把1號試管跟2號試管彼此對照就不難看出，2號試管內(nèi)蛋白花仍保持原狀，而1號試管內(nèi)的蛋白花卻已被初步（完全消化還需肽酶）消化。這個結果證明，對蛋白質產(chǎn)生消化作用的酶是菠蘿蛋白酶，而不是唾液淀粉酶。2