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《食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)文本.doc》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、GB5009.210—2011食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定(征求意見稿)201x-xx-xx實(shí)施201x-xx-xx發(fā)布中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布2010-06-01實(shí)施2010-××-××發(fā)布GB5009.89—xxxx前言本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T5009.89-2003《食品中煙酸的測(cè)定》、GB5413.15-2010《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)—嬰幼兒食品和乳品種煙酸和煙酰胺的測(cè)定》、GB/T9695.25-2008《肉與肉制品維生素PP含量測(cè)定》。與GB/T5009.89-2003、GB5413.15-2010、GB/T9695.
2、25-2008相比,本標(biāo)準(zhǔn)修改如下:——修改了標(biāo)準(zhǔn)的名稱;——調(diào)整了試劑順序和格式;——修改并細(xì)化了適用于不同食品種類的前處理方法;——增加了96孔微孔板法(第一法);——增加了適用的食品種類,增加了混合陽離子交換固相萃取柱富集果蔬天然食品樣品(第二法);——重新評(píng)估了檢出限,增加了定量限。IGB5009.89—xxxx食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一法為微生物法,適用于各類食品包括以天然食品為基質(zhì)的強(qiáng)化食品中煙酸和煙酰胺總量的測(cè)定;第二法為高效液相色譜法,適用于含量
3、較高或強(qiáng)化食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定。第一法微生物法2原理煙酸是植物乳桿菌Lactobacillμsplantarμm(ATCC8014)生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)素,在一定控制條件下,將植物乳桿菌液接種至添加試樣液的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定透光率,根據(jù)煙酸含量與透光率的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出試樣中煙酸的含量。3試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水。培養(yǎng)基可購(gòu)買符合測(cè)試要求的商品化培養(yǎng)基。3.1試劑3.1.1鹽酸(HCl)。3.1.2氫氧化鈉(NaOH)。3.1.3氯化鈉(NaCl)。3.1.4濃硫酸(
4、H2SO4)。3.1.5溴麝香草酚藍(lán)(C27H28Br2O5S):pH指示劑。3.1.6乙醇(C2H5OH)。3.2試劑配制3.2.1鹽酸溶液(1mol/L):用量筒量取吸取83mL鹽酸,于1000mL燒杯中,加917mL水,混勻。3.2.2鹽酸溶液(0.1mol/L):吸取3.2.1鹽酸溶液10mL,加水溶解至100mL。3.2.3氫氧化鈉溶液(1mol/L):稱取40g氫氧化鈉于1000mL燒杯中,加水溶解并稀釋至1000mL,混勻。3.2.4氫氧化鈉溶液(0.1mol/L):吸取3.2.3氫氧化鈉溶液10mL,加水溶解至100
5、mL。3.2.5生理鹽水(0.9%):稱取9g氯化鈉(NaCl),溶解于1000ml水中,分裝10mL于試管中,121℃滅菌15min,備用。3.2.6乙醇溶液(25%):量取200mL無水乙醇與800mL水混勻。12GB5009.89—xxxx1.1.1硫酸溶液(1mol/L):于2000mL燒杯中先注入700mL水,用量筒量取56mL硫酸沿?zé)诰徛谷胨校盟♂尩?000mL。1.2培養(yǎng)基1.2.1乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基:稱取光解胨15g,葡萄糖10g,磷酸氫二鉀2g,聚山梨糖單油酸酯1g,瓊脂10g于1000mL燒杯中,加入
6、番茄汁100mL,加900mL蒸餾水溶解,混勻,調(diào)pH6.8±0.2(25℃),分裝10mL于試管中,121℃高壓滅菌15min,備用。1.2.2乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基:稱取光解胨15g,葡萄糖10g,磷酸氫二鉀2g,聚山梨糖單油酸酯1g,于1000mL燒杯中,加入番茄汁100mL,加900mL蒸餾水溶解,混勻,調(diào)pH6.8±0.2(25℃),分裝10mL于試管中,121℃高壓滅菌15min,備用。1.2.3煙酸測(cè)定用培養(yǎng)基:維生素測(cè)定用酪蛋白氨基酸12g,葡萄糖40g,乙酸鈉20g,L-胱氨酸0.4g,DL-色氨酸0.2g,鹽酸腺嘌呤
7、20mg,鹽酸鳥嘌呤20mg,尿嘧啶20mg,鹽酸硫胺素200mg,泛酸鈣200mg,鹽酸吡哆醇400mg,核黃素400mg,p-氨基苯甲酸100mg,生物素0.8mg,磷酸氫二鉀1g,磷酸二氫鉀1g,硫酸鎂0.4g,氯化鈉20mg,硫酸亞鐵20mg,硫酸錳20mg。加蒸餾水至1000mL,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液(3.2.4)調(diào)pH至6.7±0.2(20℃~25℃)。注:自行配制煙酸測(cè)定培養(yǎng)基時(shí),所有試劑不得含有煙酸。1.3標(biāo)準(zhǔn)品1.3.1(C19H19N7O6):純度≥99.5%。1.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制1.4.1煙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備
8、液(0.1mg/mL):精確稱取50.0mg煙酸標(biāo)準(zhǔn)品,用乙醇溶液(3.2.5)溶解并移至500mL容量瓶中,定容,混勻于2℃~4℃冷藏。此溶液每mL相當(dāng)于100mg煙酸。1.4.2煙酸標(biāo)準(zhǔn)中間液(10mg/mL):準(zhǔn)確吸取10.0m