食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)文本.doc

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1、GB5009.210—2011食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定（征求意見稿）201x-xx-xx實(shí)施201x-xx-xx發(fā)布中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布2010-06-01實(shí)施2010-××-××發(fā)布GB5009.89—xxxx前言本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T5009.89-2003《食品中煙酸的測(cè)定》、GB5413.15-2010《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)—嬰幼兒食品和乳品種煙酸和煙酰胺的測(cè)定》、GB/T9695.25-2008《肉與肉制品維生素PP含量測(cè)定》。與GB/T5009.89-2003、GB5413.15-2010、GB/T9695.

2、25-2008相比，本標(biāo)準(zhǔn)修改如下：——修改了標(biāo)準(zhǔn)的名稱；——調(diào)整了試劑順序和格式；——修改并細(xì)化了適用于不同食品種類的前處理方法；——增加了96孔微孔板法（第一法）；——增加了適用的食品種類，增加了混合陽離子交換固相萃取柱富集果蔬天然食品樣品（第二法）；——重新評(píng)估了檢出限，增加了定量限。IGB5009.89—xxxx食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一法為微生物法，適用于各類食品包括以天然食品為基質(zhì)的強(qiáng)化食品中煙酸和煙酰胺總量的測(cè)定；第二法為高效液相色譜法，適用于含量

3、較高或強(qiáng)化食品中煙酸和煙酰胺的測(cè)定。第一法微生物法2原理煙酸是植物乳桿菌Lactobacillμsplantarμm（ATCC8014）生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)素，在一定控制條件下，將植物乳桿菌液接種至添加試樣液的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后測(cè)定透光率，根據(jù)煙酸含量與透光率的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出試樣中煙酸的含量。3試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水。培養(yǎng)基可購(gòu)買符合測(cè)試要求的商品化培養(yǎng)基。3.1試劑3.1.1鹽酸（HCl）。3.1.2氫氧化鈉（NaOH）。3.1.3氯化鈉（NaCl）。3.1.4濃硫酸（

4、H2SO4）。3.1.5溴麝香草酚藍(lán)（C27H28Br2O5S）：pH指示劑。3.1.6乙醇（C2H5OH）。3.2試劑配制3.2.1鹽酸溶液（1mol/L）：用量筒量取吸取83mL鹽酸，于1000mL燒杯中，加917mL水，混勻。3.2.2鹽酸溶液（0.1mol/L）：吸取3.2.1鹽酸溶液10mL，加水溶解至100mL。3.2.3氫氧化鈉溶液（1mol/L）：稱取40g氫氧化鈉于1000mL燒杯中，加水溶解并稀釋至1000mL，混勻。3.2.4氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）：吸取3.2.3氫氧化鈉溶液10mL，加水溶解至100

5、mL。3.2.5生理鹽水（0.9%）：稱取9g氯化鈉（NaCl），溶解于1000ml水中，分裝10mL于試管中，121℃滅菌15min，備用。3.2.6乙醇溶液（25%）：量取200mL無水乙醇與800mL水混勻。12GB5009.89—xxxx1.1.1硫酸溶液（1mol/L）：于2000mL燒杯中先注入700mL水，用量筒量取56mL硫酸沿?zé)诰徛谷胨校盟♂尩?000mL。1.2培養(yǎng)基1.2.1乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基：稱取光解胨15g，葡萄糖10g，磷酸氫二鉀2g，聚山梨糖單油酸酯1g，瓊脂10g于1000mL燒杯中，加入

6、番茄汁100mL，加900mL蒸餾水溶解，混勻，調(diào)pH6.8±0.2（25℃），分裝10mL于試管中，121℃高壓滅菌15min，備用。1.2.2乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基：稱取光解胨15g，葡萄糖10g，磷酸氫二鉀2g，聚山梨糖單油酸酯1g，于1000mL燒杯中，加入番茄汁100mL，加900mL蒸餾水溶解，混勻，調(diào)pH6.8±0.2（25℃），分裝10mL于試管中，121℃高壓滅菌15min，備用。1.2.3煙酸測(cè)定用培養(yǎng)基：維生素測(cè)定用酪蛋白氨基酸12g，葡萄糖40g，乙酸鈉20g，L-胱氨酸0.4g，DL-色氨酸0.2g，鹽酸腺嘌呤

7、20mg，鹽酸鳥嘌呤20mg，尿嘧啶20mg，鹽酸硫胺素200mg，泛酸鈣200mg，鹽酸吡哆醇400mg，核黃素400mg，p-氨基苯甲酸100mg，生物素0.8mg，磷酸氫二鉀1g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.4g，氯化鈉20mg，硫酸亞鐵20mg，硫酸錳20mg。加蒸餾水至1000mL，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液（3.2.4）調(diào)pH至6.7±0.2（20℃~25℃）。注：自行配制煙酸測(cè)定培養(yǎng)基時(shí)，所有試劑不得含有煙酸。1.3標(biāo)準(zhǔn)品1.3.1（C19H19N7O6）：純度≥99.5%。1.4標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制1.4.1煙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備

8、液（0.1mg/mL）：精確稱取50.0mg煙酸標(biāo)準(zhǔn)品，用乙醇溶液（3.2.5）溶解并移至500mL容量瓶中，定容，混勻于2℃～4℃冷藏。此溶液每mL相當(dāng)于100mg煙酸。1.4.2煙酸標(biāo)準(zhǔn)中間液（10mg/mL）：準(zhǔn)確吸取10.0m