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《高效液相色譜-四極桿飛行時間質(zhì)譜分析紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中花色苷.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第39卷分析化學(xué)(FENXIHUAXUE)研究簡報第3期2011年3月ChineseJournalofAnalyticalChemistry419～424DOI：10．3724／SP．J．1096．2011．00419高效液相色譜一四極桿飛行時間質(zhì)譜分析紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中花色苷劉玉芹1'2江婷趙先恩楊國棟杜金華王曉(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，泰安271018)(山東省分析測試中心，山東省大型精密儀器應(yīng)用技術(shù)重點實驗室，濟南250014)(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)作物生物學(xué)國家重點實驗室，泰安271018)摘要應(yīng)用高效液相色譜一電噴霧／四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析了紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)
2、中的花色苷成分。選用AgilentTCC。色譜柱(250mm×4．6mm×5rtm)，二元線性梯度洗脫，柱后流出液采用電噴霧四極桿飛行時間質(zhì)譜的正、負(fù)離子模式進(jìn)行檢測。根據(jù)一級質(zhì)譜的分子離子和二級質(zhì)譜碎片離子，獲得化合物的準(zhǔn)確分子量信息，與相關(guān)文獻(xiàn)報道進(jìn)行比較，分別從紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中分離并檢測到了l6種和17種花色苷，且從紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中發(fā)現(xiàn)了錦葵一3一(P香豆?；?一蕓香苷。本方法快速、準(zhǔn)確，無需標(biāo)準(zhǔn)品。關(guān)鍵詞高效液相色譜一電噴霧／四極桿飛行時間質(zhì)譜；紫甘藍(lán)；羽衣甘藍(lán)；花色苷1引言紫甘藍(lán)(BrassicaOleraceaL．var．capitataL．)又稱紅甘藍(lán)，是十字花
3、科蕓苔屬甘藍(lán)種中的一個變種，營養(yǎng)成分高于普通甘藍(lán)，作為一種食用性蔬菜在我國已大面積種植l】。羽衣甘藍(lán)(BrassicaOleraceavaracephalaD．C．)，也是十字花科蕓苔屬甘藍(lán)類的一個變種，葉色鮮艷，作為一種高營養(yǎng)、易栽培的新興蔬菜，很有開發(fā)價值。紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)均富含花色苷類化合物?；ㄉ諏俜宇惢衔镏械念慄S酮，是果蔬及產(chǎn)品呈現(xiàn)從紅色到藍(lán)色的物質(zhì)基礎(chǔ)，具有抑制血小板凝固，預(yù)防血栓、心臟病，抗癌，抗氧化等多種生理功能，且富含花色苷的果蔬還可作為天然色素的良好來源【61。目前，國內(nèi)對紫甘藍(lán)花色苷的報道主要集中在提取方法和穩(wěn)定性研究”，分離鑒定研究較少；國外對紫甘藍(lán)花色
4、苷的分離研究僅見矢車菊類花色苷。1，尚未見羽衣甘藍(lán)中花色苷類化合物的分離鑒定報道。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)適用于天然產(chǎn)物有效成分定性與定量分析，可以在缺少標(biāo)準(zhǔn)品的情況下對粗提物中微量成分進(jìn)行有關(guān)的結(jié)構(gòu)分析，具有高效快速、靈敏度高等優(yōu)點[111。本研究利用高效液相色譜一電噴霧／四極桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC—ESI／QTOF—MS／MS)對紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中花色甘類化合物進(jìn)行分析，得到花色苷類物質(zhì)的分子量和分子結(jié)構(gòu)的碎片信息，以期分析測定紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中的花色苷成分，為今后紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)中花色苷的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。2實驗部分2．1儀器與試劑AUW220D電子分析天平(
5、日本島津公司)；KQ3200型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI公司)；TC—C高效液相色譜柱(250mm×4．6mm×5gm，美國Agilent公司)；6520四極桿飛行時間串聯(lián)液質(zhì)聯(lián)用儀(Q—TOF,美國Agilent公司)。紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)購于山東濟南某農(nóng)貿(mào)市場。HC1、甲酸、甲醇和乙酸乙酯(分析純，天津市廣成化學(xué)試劑有限公司)；乙腈(色譜純，山東禹王實業(yè)有限公司)；水由超純水設(shè)備(美國Mili—Q公司)制備。2．2實驗方法2．2．1樣品提取新鮮紫甘藍(lán)和羽衣甘藍(lán)在4℃打漿，分別準(zhǔn)確稱取20．og，各加入60mL甲醇溶液2010-04-12收稿
6、；2010-0801接受本文系國家自然科學(xué)基金項目(No20872083)和作物生物學(xué)國家重點實驗窒開放課題項目(No．20082KF05)資助Email：wangx@keylab．net420分析化學(xué)第39卷(含0．1％(v／v)HC1)，室溫下超聲3次，每次15min。布氏漏斗真空抽濾，濾渣分別再用40mL甲醇溶液(含0．1％HC1)重復(fù)提取兩次，3次濾液合并，45℃下真空濃縮去除甲醇，分別用水(含0．01％HCI)定容至10mL，備用。2．2．2樣品純化將10mL花色苷提取液吸附在XAD-7大孔吸附樹脂上，以水(含0．01％HC1)淋洗柱子，去除吸附的糖、蛋白等水溶性物質(zhì)，
7、直至水溶液澄清為止。再用甲醇溶液(含0．01％HCI)洗脫花色苷，收集，45℃真空濃縮，用0．01％HC1定容至10mL，過0．45um微孔濾膜，待測。2．2．3色譜質(zhì)譜條件AgilentTC—C色譜柱，二元梯度洗脫，流動相A為水(含0．4％甲酸)，B為乙腈。0min，90％A；O～35min，10％～18％B；35～60min，18％B；60～70min，18％～100％B。進(jìn)樣10“L，流速1mL／min，柱溫25℃，檢測波長520nm。離子源API—ESI，正、負(fù)離子檢測模
