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1、川貝枇杷糖漿的限量檢測配制培養(yǎng)基清洗、烘干、制無菌水包扎、滅菌稀釋樣液倒平板、培養(yǎng)觀察、計數(shù)配制培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基注：1.在加入藥品后微溫溶解，濾過后加入玫瑰紅鈉、葡萄糖2.玫瑰紅鈉固體在加入1000ml水時加入0.0133g玫瑰紅鈉液體在加入1000ml水時應(yīng)加入10ml蛋白胨瓊脂磷酸氫二鉀硫酸鎂玫瑰紅鈉葡萄糖水5g+1g14g+2.6g1g+o.2g0.5g+o.1g10ml+2ml10g+2g1000ml+200ml注釋蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氫鉀為緩沖劑；硫酸鎂提供必須的微量元素；玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑
2、制細菌的生長，并可減緩某些霉菌因生長過快而導(dǎo)致菌落漫延生長；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑.同時玫瑰紅鈉可供霉菌和酵母菌的計數(shù)，但霉菌的生長可抑制其他菌種的生長，故在玫瑰紅鈉培養(yǎng)基中處于優(yōu)勢生長地位。葡萄糖瓊脂養(yǎng)基培蛋白胨瓊脂酵母菌膏葡萄糖水5g14g5g20g1000ml注：加入藥品后，微熱溫溶解，濾過后再加入葡萄糖清洗、烘干、制無菌水1.清洗培養(yǎng)皿、移液管、試管（清洗移液管要將管內(nèi)的水滴甩干凈，以防烘干時耗時過長）2.將培養(yǎng)皿、移液管放于烘箱中烘干3.在4支試管中分別加入9ml蒸餾水，塞緊，用紙包扎，一會滅菌包扎、滅菌1.烘干的移液管，在管口處塞上
3、棉花，不能松也不能緊，然后與報紙成30度至45度包扎起來2.將烘干的8個培養(yǎng)皿包扎起來3.將培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、移液管、試管一起放入滅菌鍋內(nèi)滅菌30分鐘(121℃、103kPa)稀釋樣液1.將8個培養(yǎng)皿分為4組，編號1、2、3、42.將移液管、試管分別編號1、2、3、43.1組，用1號移液管在1號試管中取無菌水，分別向1組培養(yǎng)基中加入1ml無菌水2組，用1號移液管取1ml的川貝枇杷糖漿注入2號試管，用2號移液管吹打混勻，再分別取1ml樣液于2組培養(yǎng)皿中3組，用2號移液管在2號試管中取1ml樣液注入3號試管中，用3號移液管吹打混勻，再分別取1ml樣
4、液于3組培養(yǎng)皿中4組，用3號移液管在3號試管中取1ml樣液注入4號試管中，用4號移液管吹打混勻，再分別取1ml樣液于4組培養(yǎng)皿中倒平板、培養(yǎng)1.在無菌環(huán)境中將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中注：培養(yǎng)皿要持平，到后蓋上皿蓋，放在試驗臺上正反旋轉(zhuǎn)幾次，以使培養(yǎng)皿中液體混勻2.將培養(yǎng)皿放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時觀察、計數(shù)一、菌落計數(shù)1.選取菌落數(shù)在30CFU-300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)2.低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300的可記錄為多可不記，每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。3.其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采
5、用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)；若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2，代表一個平板菌落數(shù)。4.當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界限的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)二、菌落總數(shù)計算方法1.只有一個稀釋度平板的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再用平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每克（或毫升）中菌落總數(shù)結(jié)果。2.若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，按下式計算N=∑C/(n1+0.1n2)d平板菌落數(shù)之和第一平板菌落數(shù)第二平板菌落數(shù)稀釋因子空白對照稀釋10倍
6、稀釋100倍稀釋1000倍結(jié)果1.稀釋10倍菌落數(shù)大于300，不計2.稀釋100倍菌落數(shù)分別為150、1323.稀釋1000倍菌落72，另一培養(yǎng)皿倒平板時培養(yǎng)基部分凝固導(dǎo)致培養(yǎng)失敗
