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《產(chǎn)沒食子酸脫羧酶的菌種篩選及其酶活研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第44卷第12期2016年12月化學(xué)工程CHEMICALENGINEERING(CHINA)V01．44No．12DeC．2016產(chǎn)沒食子酸脫羧酶的菌種篩選及其酶活研究李文君1’2’3-．，王成章1’2’3?，張昌偉1’2’3?，葉建中1’2’3’4(1．中國林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所；2．生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實驗室；3．國家林業(yè)局林產(chǎn)化學(xué)工程重點開放性實驗室；4．江蘇省生物質(zhì)能源與材料重點實驗室，江蘇南京210042)摘要：為了篩選產(chǎn)沒食子酸脫羧酶的菌種并對其相應(yīng)的酶活性質(zhì)進(jìn)行研究，文中首先利用底物
2、誘導(dǎo)對可以產(chǎn)沒食子酸脫羧酶的不同菌種進(jìn)行了篩選，初步研究了沒食子酸脫羧酶的專一性及影響其酶活的因素，由結(jié)果可知：待篩選的5株菌種均能降解沒食子酸生成焦性沒食子酸，其降解效果由強(qiáng)到弱為弗式檸檬酸桿菌(Citrobacterfreandii)CICC22001、陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)CICC10017、腸桿菌屬(Enterobaeterspp．)CICC23468、陰溝腸桿菌(Enterobactercloacae)CICC20772、陰溝腸桿菌(Enterobactercfo∞船)
3、CICC20804；沒食子酸脫羧酶(GAD)對沒食子酸具有較強(qiáng)的專一性，在粗酶液5．OmL，沒食子酸0．4mg／mL，發(fā)酵溫度35℃，磷酸鹽緩沖溶液pH=6．0對其酶活的促進(jìn)作用最強(qiáng)，而金屬離子的促進(jìn)作用強(qiáng)弱為M92+>Sn2+>Cu2+>Zn2+>K+>Ca2+>Fe2+，添加劑的抑制作用強(qiáng)弱為EDTA>SDS>TritonX-100>Tween20。關(guān)鍵詞：沒食子酸脫羧酶；微生物降解；焦性沒食子酸；酶學(xué)性質(zhì)中圖分類號：Q814．1文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1005-9954(2016)12-0001-06D
4、OI：10．3969／j．issn．1005-9954．2016．12．00lScreenthestra"ofproducinggllicaciddecarboxvlaseandcreentllestrainsorproducinggallicacilldeCarDOXylaSeenzymicacUvities●·-●-‘LIWen．Junl’2’3’4，wANGCheng．Zhan91M4，zHANGChang．weil．2'3，4’ⅦJian-Zhon91M4(1．InstituteofChemicalI
5、ndustryofForestProducts，CAF；2．NationalEngineeringLab．forBiomassChemicalUtilization；3．KeyandOpenLab．ofForestChemicalEngineering，SFA；4．KeyLab．ofBiomassEnerg)randMaterial，Nanjing210042，JiangsuProvince，China)Abstract：Inordertoscreenthestrainstoproducethegallica
6、ciddecarbolxylaseandstudyoftheirenzymicactivities，thedifferentbacterialstrainswiththeabilitiesofdegradinggallicacidwerescreenedbythesubstrateinductiontest．a(chǎn)ndtheenzymaticspecificityandpropertieswerestudiedpreliminarily．’rheresultsshowthatallof5screeningstra
7、inscandegradegallicacidtopyrogallol，andtheireffectfromstrongtoweakisCitrobacterfreandiiCICC22001，EnterobactercloacaeCICC10017，Enterobacterspp．CICC23468，EnterobactercloacaeCICC20772，EnterobactercloacaeCICC20804；GADhasstrongenzymaticspecificityindegradinggall
8、icacid．Phosphatebuffersolutionhasthestrongestpromotingeffectat5．0mLGAD，0．4mg／mLgallicacid，35℃fermentationtemperature．a(chǎn)ndpH6．0．TheeffectofmetalionsonGADfromstrongtoweakisM92+>Sn2+>Cu2+>Zn2+>K+>Ca2+>Fe2+
