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《豆豉纖溶酶產(chǎn)酶菌的篩選及菌種保藏-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，JournalofAnhuiAgri．Sci．2012，40(10)：6187—6188責(zé)任編輯金蘋責(zé)任校對(duì)李巖豆豉纖溶酶產(chǎn)酶菌的篩選及菌種保藏張麗梅(宜春職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江西宜春336000)摘要[目的]從豆豉產(chǎn)品中篩選分離活性較高的豆豉纖溶酶產(chǎn)酶菌，并時(shí)菌種進(jìn)行保藏。[方法]用自制的豬血粉為底物配制篩選培養(yǎng)基進(jìn)行豆豉纖溶酶產(chǎn)酶茵的篩選，然后根據(jù)水解圈的大小篩選活性高的產(chǎn)酶菌株，最后將其保藏于LB培養(yǎng)基中。[結(jié)果]成功從湖南、廣東、江西等地產(chǎn)的豆豉中篩選到一株溶栓活性相對(duì)較高的產(chǎn)酶菌。[結(jié)論]該研究
2、為新型溶栓藥物的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞豆豉纖溶酶；產(chǎn)酶菌；篩選；菌種保藏中圖分類號(hào)S503．7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517—6611(2012)10—06187一o2SereeningandPreservationofDouchiFibrinol【yticEnzymeProducingStrainZHANGLi．mei(YichunVocationalTechnicalCollege．Yiehun，Jiangxi336000)Abstract[Objective]Toisolateandpreserveahigh
3、·activityDouchifibrinolyticenzymeproducingstrainfromDouchiproducts．[Method]Theselecti0nofDouchifibrinolyticenzymeproducingstrainwascarriedoutontheselectedmediumpreparedwithselGmadeporkbloodpow—der．thestrainwiththehighestactivitywasscreenedoutaccordingtothesiz
4、eofhydrolysiscycle，andthenpreservedinLBmedium．[Result]ADouchifibrinolyticenzymeproudcingstrainwithhighthrombolyticactivitywasscreenedoutfromtheDouchiproducedinHunan．GuangdongandJiangxiProvinces．『Conclusion]Thestudylaidfoundationforthedevelopmentofnew—typethro
5、mbolytiedrugs．KeywordsDouchiflbrinolyticenzyme：Enzyme—producingstrains；Screening；Strainpreservation心腦血管疾病是當(dāng)今嚴(yán)重危害人類健康，引發(fā)死亡率最1．2方法高的疾病之一，其中血管栓塞類疾病如腦栓塞等給患者帶來1．2．1底物的制備。將從市場上買回的新鮮豬血稍作去水處極大痛苦。治療血管栓塞類疾病目前最為有效的方法是溶理后，于烘烤箱中55℃烘烤過夜，然后用粉碎機(jī)將烘干的豬血栓療法。然而，傳統(tǒng)溶栓藥物如尿激酶、鏈激酶等具有
6、半衰打碎成粉，過120目篩，用干凈的瓶子收集，存放于干燥處。期短、價(jià)格昂貴、易出血、口服效率低等缺點(diǎn)。因此，開發(fā)新1．2．2菌株的篩選。①首先稱取豬血粉2．0g，蛋白胨0．5型溶栓劑尤其是口服有效的溶栓劑是許多學(xué)者研究的目g，酵母粉0．5g，氯化鈉1．0g，瓊脂粉1．5g，量取蒸餾水99標(biāo)?。自從1987年日本科學(xué)家須見洋行等首先從日本納豆rnl，配制篩選培養(yǎng)基。將配制好的篩選培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿高壓食品中分離到一種具有強(qiáng)烈纖溶活性的酶(納豆激酶)以滅菌15min后，均勻倒平板。②分別取各種豆豉樣品1．0g，來，微生物
7、來源的新型溶栓藥物的研究開發(fā)受到世界各國加入到盛有95ml無菌水的錐形瓶中，放人恒溫培養(yǎng)振蕩器學(xué)者的重視。振蕩20min，即成1％樣品稀釋液。將1％樣品分別稀釋成我國研究人員從豆豉中分離得到了一種與納豆激酶相0．100％、0．010％、0．001％的溶液后，分別涂布于篩選培養(yǎng)基似的高活性纖溶蛋白酶，并命名為豆豉纖溶酶。有研究表平板，放入恒溫培養(yǎng)箱中37℃倒置培養(yǎng)18h以上，觀察豆豉明，豆豉纖溶酶是豆豉在發(fā)酵過程中由枯草芽孢桿菌(Bacil—纖溶酶產(chǎn)霉菌的產(chǎn)生情況。然后用滅菌的牙簽挑取各平板lussubtilis)
8、產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶；對(duì)其進(jìn)行N2末端的中水解圈較大的菌落接種到畫好格子的篩選培養(yǎng)基平板中，氨基酸序列和基因序列的分析表明，該酶是一種新型的纖溶于恒溫培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)48h，觀察水解圈的大小，并測量酶，與納豆激酶相比存在顯著差異。豆豉纖溶酶不僅具有各水解圈直徑及菌直徑，試驗(yàn)重復(fù)8次。通過計(jì)算水解圈面較高的纖溶活性，且安全無毒、持續(xù)作用時(shí)間長、分子量小，積與菌種面積的比
