豆豉纖溶酶載納米脂質(zhì)體的制備與表征-論文.pdf

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1、第14卷第7期中國食品學報Vo1．14No．72014年7月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJu1．20l4豆豉纖溶酶載納米脂質(zhì)體的制備與表征張嬋李小東王成濤(北京工商大學北京市食品添加劑工程技術研究中心食品質(zhì)量安全北京實驗室北京100048)摘要為提高豆豉纖溶酶口服生物利用度。建立了豆豉纖溶酶栽納米脂質(zhì)體系統(tǒng)，并對其表征進行評價。采用硫酸銨梯度法制備的豆豉纖溶酶納米脂質(zhì)體的包封率為(52．74~4．24)％，粒徑(72．04±31．2)nm，平均Zeta電位一44．2mV，Pd

2、10．237。試驗結果表明：豆豉纖溶酶納米脂質(zhì)體在體外穩(wěn)定性好，在人工腸液中的釋放符合一級動力學釋放規(guī)律，豆豉纖溶酶在12h后釋放接近完全．無突釋現(xiàn)象。豆豉纖溶酶及栽酶納米脂質(zhì)體腸吸收液酶活性測定結果表明：豆豉纖溶酶及其栽酶納米脂質(zhì)體在小腸均有吸收，吸收后仍具有纖溶活性。納米脂質(zhì)體可有效促進豆豉纖溶酶的吸收關鍵詞豆豉纖溶酶；納米脂質(zhì)體；包封率；粒徑大小文章編號1009—7848(2014)07—0032—07脂質(zhì)體作為磷脂雙分子層組成，主要由磷脂的脂質(zhì)體粒徑、層次及包封率不盡相同。硫酸銨梯和膽固醇組成，為細胞膜固有組分，免疫原性低，度法是1種主動載

3、藥法【3J，比直接pH梯度法條件體內(nèi)易代謝，是理想的藥物載體。納米脂質(zhì)體在提溫和．避免了酶類與有機溶劑接觸和大功率超聲高腸吸收效率，靶向給藥，緩釋，降低藥物毒副作對酶活影響．較適合載酶脂質(zhì)體制備工藝，其原理用等方面表現(xiàn)出良好應用前景，尤其是在多肽、蛋是通過硫酸銨形成脂質(zhì)體內(nèi)外pH梯度來實現(xiàn)的白類口服吸收方面．可增加大腸黏附性，提高胃腸蛋白酶包封。Zhang等[41研究了胰島素的脂質(zhì)體包環(huán)境耐受性，促進腸吸收。為了減少進入血液后單被．胰島素包封率達到50％左右，較同等條件下的細胞吞噬系統(tǒng)對脂質(zhì)體的破壞，更好地越過血腦傳統(tǒng)方法提高20％。Gharib等

4、【5]研究了胰島素納米屏障，通常選擇使用單室脂質(zhì)體，粒徑8Onm左脂質(zhì)體口服吸收效果，結果發(fā)現(xiàn)體內(nèi)具有有效降右。Rodriguezt喇用時滯效應設計開發(fā)了口服結腸血糖能力，其認為納米脂質(zhì)體可作為促蛋白質(zhì)、多定位給藥系統(tǒng)，其認為結腸的環(huán)境條件特別適合肽類口服制劑的良好載體。Xia等同用Caoco一2細于多肽、蛋白類吸收。Rosia等嘲研究了適用于不溶胞模型研究納米脂質(zhì)體輔酶Q10腸吸收和積累促性物質(zhì)、肽類的智能水凝膠控釋系統(tǒng)．提高了載藥進作用，發(fā)現(xiàn)納米脂質(zhì)體可以明顯提高輔酶Q10納米粒的定位吸收，緩釋控制和組織靶向性等問題?？诜盏纳锢枚?。目前

5、應用硫酸銨梯度主納米脂質(zhì)體載酶系統(tǒng)的制備方法很多．常用動包被較大分子酶的報道尚不多見。方法主要有機械分散法、兩相分散法、表面活性劑豆豉纖溶酶分子質(zhì)量約30ku，試驗研究發(fā)現(xiàn)法和主動載藥法。較適用于蛋白、肽類等水溶性物該酶具有較好溶栓開發(fā)效果[7-“]。本文擬制備豆豉質(zhì)的包封方法主要有硫酸銨梯度法、逆相蒸發(fā)法、纖溶酶載納米脂質(zhì)體，并研究表征在制備過程中薄膜分散法、超聲波法、加壓法等。不同方法制備硫酸銨對于梯度形成的作用，旨在提高豆豉纖溶酶的穩(wěn)定性．減少胃腸內(nèi)源酶降解，有效解決豆豉收稿日期：2013—12—15纖溶酶口服生物利用度低等問題【131。基金

6、項目：教育部科學技術研究重點項目(2l1101)；北京市教委面上項目(KM201110011001)；北京市屬高等學校創(chuàng)新團隊建設與教師職業(yè)發(fā)展計劃項1材料與方法目(2013113)。1．1材料、試劑與儀器作者簡介：張嬋，女，1984年出生，博士，講師聚乙二醇20000．北京化學試劑公司；巴比妥通訊作者：王成濤第14卷第7期豆豉纖溶酶載納米脂質(zhì)體的制備與表征33鈉，天津市光復精細化工研究所；苯基瓊脂糖凝中恒溫振蕩孵育(25℃、100r／min)，24h內(nèi)定時取膠、DEAE一瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠G一50，瑞典樣，每次1．0mL。將樣品低溫高速離心(

7、10000r／Pharmacia公司；考馬斯亮藍G一250、膽固醇、瓊脂min，5min)，Bradfordt41法測定上清液酶含量，計糖，國藥集團化學試劑有限公司；纖維蛋白原、凝算、繪制釋放曲線；分別用零級動力學方程、一級血酶，中國食品藥品生物檢定研究所；蛋黃卵磷動力學方程、Higuchi方程、Weibull方程擬合釋放脂，北京奧博星生物技術有限公司。曲線。RV10旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，德國IKA公司；S-3120蛋將收集的豆豉纖溶酶外翻腸囊滲透液裝于透白純化系統(tǒng)。東京理化器械株式會社：TH500一A析袋(截留量為12000～14000D)，經(jīng)聚乙二醇20

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