資源描述：
《提取香菇多糖的方案》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、提取香菇多糖的工藝原料處理：原料：香菇。試劑：蒸餾水，葡萄糖，苯酚，鋁片，固體，濃硫酸，95%乙醇稀鹽酸，PH試紙，復合酶（木瓜蛋白酶：纖維素酶=2：1），設備和儀器：100ml容量瓶，6個50ml容量瓶，玻璃棒，蒸餾裝置（溫度計、沸石、三口燒瓶、冷凝管），燒杯若干，錐形瓶若干，棕色瓶一個，抽濾瓶，1、2、5、10ml吸液管，電子天平，真空干燥箱，恒溫水浴鍋，紫外分光光度計，粉碎機，40、60、80、100目的篩子，DL700-0.55×1.5超高壓等靜壓機（上海大隆高壓設備廠），真空泵，THZ-82A臺式恒溫
2、振蕩器，臺式離心機。1、標準葡萄糖溶液的配制精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸餾水溶解并定容于100ml容量瓶中，搖勻，配成濃度為1mg/ml標準葡萄糖溶液備用。2、5%苯酚試劑的配制。苯酚水浴加熱溶解后稱取100g，加鋁片0.1g(先用1：6的鹽酸除去鋁片表面氧化鋁后，再稱量使用)，加入碳酸氫鈉30g，蒸餾，收集178-182℃的餾分，取餾出液7.5g，加入蒸餾水150mL，得5.0％的苯酚溶液，置于棕色瓶中備用。3、標準曲線繪制以葡萄糖作為標準品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度計測
3、定多糖含量。精密吸取已配制的葡萄糖標準品溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于6個50ml容量瓶中，加蒸餾水至刻度線，搖勻。精密吸取2ml，分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，以溶劑蒸餾水為空白作對照，在400～600nm內(nèi)掃描，最大吸收波長為490nm。在490nm處，測吸光值，以濃度為縱坐標，吸光值為橫坐標，繪制標準曲線，得出葡萄糖標準品濃度Y（ug/ml）與吸光值X的回歸方程：Y=15.336X-0.0298
4、，R2=0.9997。在2.5～15.0ug/ml范圍內(nèi)呈線性關系。預處理：將新鮮清洗干凈，除去其根部，將剩下的菌傘擠壓，切小塊放入真空干燥箱干燥，待香菇恒質(zhì)量，放入粉碎機中粉碎，將粉碎后的香菇粉依次通過40，60，80，100目的篩子，得到40目以下、40～60目、60～80目、80～100目、100目粒度以上的樣品，過篩之后把各級香菇粉分別裝到清潔干燥的燒杯中，編號貼上標簽，置于真空干燥箱中待用。一、熱水法提取香菇多糖的方案原料：香菇。試劑：0.5%NaOH，95%乙醇，蒸餾水。設備和儀器：燒杯（若干），玻
5、璃棒，溫度計，錐形瓶（若干），漏斗，水浴鍋，稱量天平，THZ-82A臺式恒溫振蕩器,臺式離心機，紫外線分光光度計。提取的方法與步驟：1、粉碎度對提取率的影響分別稱取40、60、80、100目的香菇粉5g，放入到250mL的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻后置于90℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合后過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對
6、照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多糖提取率，得到粉碎度與提取率的關系。2、料液比對提取率的影響稱取80目的香菇粉5g六份，放入到250mL的錐形瓶中，分別加入蒸餾水75、100、125、150、175、200ml，混合均勻后置于90℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合后過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度
7、計測吸光值，計算多糖提取率，得到粉碎度與提取率的關系。3、提取溫度對提取率的影響稱取80目的香菇粉5g，放入到250mL的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻后置于65、75、80、85、90、95、100℃水浴鍋中，水浴提取2h，提取兩次，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合后過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白作對照，在490nm處用分光光度計測吸光值，計算多糖提取率，得到粉
8、碎度與提取率的關系。4、提取時間對提取率的影響稱取80目的香菇粉5g五份，放入到250mL的錐形瓶中，加入蒸餾水100ml，混合均勻后置于90℃水浴鍋中，水浴提取2、3、4、5、6h，提取結束，冷卻至室溫，將兩次提取液混合后過濾，取2ml濾液分別加入5%苯酚溶液1ml，搖勻，迅速加入5ml濃硫酸，振搖5min，置沸水浴上加熱15min，然后置冷水浴中冷卻30min，即以溶劑蒸餾水為空白
