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《SD大鼠睪丸支持細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、廣西農(nóng)業(yè)秤學(xué)2010，41(1)：259—262GImngIjAgIicIllturalSciences·259·SD大鼠睪丸支持細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、純化及鑒定姚玲-，李春艷1，李曉劍1，黎宗強(qiáng)”，謝麗萍2，張留光1，靖蓓蓓-(1廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧530005；2廣西瑋美生物科技有限公司。南寧530023)摘要：為進(jìn)一步簡(jiǎn)化、優(yōu)化SD大鼠睪丸支持細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件及鑒定方法，采用三酶兩步消化法和差異貼壁法分離、培養(yǎng)、純化sD大鼠支持細(xì)胞，并用HE染色、油紅染色、Feulgen染色及透射電鏡掃描其超微結(jié)構(gòu)予以鑒定。結(jié)果表明：平均0．109睪丸組織可獲得2．5×10a個(gè)支持細(xì)
2、胞，細(xì)胞存活率90％以上，體外培養(yǎng)5h后開始貼壁，96h后細(xì)胞生長(zhǎng)速率下降，其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為3～7d，整個(gè)體外生長(zhǎng)周期約為lO-15d。對(duì)獲得的純化細(xì)胞進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)及超微結(jié)構(gòu)與支持細(xì)胞的形態(tài)特征一致?？梢?，采用三酶兩步消化法和差異貼壁法．可達(dá)到分離、培養(yǎng)、純化sD大鼠支持細(xì)胞的目的。關(guān)鍵詞：睪丸；支持細(xì)胞；體外培養(yǎng)；鑒定；SD大鼠中圖分類號(hào)：$852．1；Q954．6-33+1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1002—8161(2010)03-0259--04Isolation，culture，purificationandidentificationonsertolicello
3、fSDratYAOLin91，LIChun-yanl，LIXiao-jianl，LIZong-qiang”，XIELi-ping，ZHANGLiu-guan91，JINGBei-beil(1CollegeofAnimalScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，China；2WeimeiBioteehnologyCo．Ltd．，Nanning530023，China)Abstract：Thepresentstudywasconductedtooptimizethe面r／trocultureconditionsandid
4、entiffcationmethodforsertolicellofSDmt．Thesertolicellsfrom21daysoldmaleSDratwereisolated．culturedandpurifiedbytwo-stepdiges-tionusingthreeenzymesanddifferentiatedanchoringmethod．，11他ultrastructureofsertolicellwagidentiffedusingHE．0ilredandFeulgendyesthrough7I’EMscanning．Onanaverage．2．5x106sert
5、olicellscanbeobtainedfromabout0．10goftes-ticletissuewiththesurvivalrateabove90％．n峙cellbegantoanchorafter5hours／nvitroculture．a(chǎn)ndthegrowthmteofcellsdecreasedafter96h．Thelogarithmicgrowthdurationofcellwaftfoundt0be3-7daysand／nv／frogrowthdurationWag10—15days．Themorphologicalcharacteristicsandultr
6、astructureofpurifiedceilsobservedtlⅡoushTEMrevealeditWaginaccordancewiththatofsertolicell．ThepresentedmetlIodWaSfoundtoaccurateforstudyingthesertolicells．Keywords：testicle；sortoficell；／nv／troculture；identification；SDrat睪丸支持細(xì)胞(Sertolicell。SC)是生精細(xì)胞的支架，為生精細(xì)胞提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白(Androgenbinding
7、protein，ABP)，為生精細(xì)胞提供高濃度的雄激素環(huán)境等。近年來，關(guān)于睪丸支持細(xì)胞的研究越來越多，在國內(nèi)已有不少學(xué)者對(duì)嚙齒動(dòng)物大鼠[1】、小鼠[z】以及家畜犢?！?1、仔豬[41、兔子[51．甚至家禽雞[6】的睪丸支持細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)研究，但目前有關(guān)支持細(xì)胞分離、純化等體外培養(yǎng)條件多種多樣．其鑒定方法也各不相同。為此，本研究在現(xiàn)有基礎(chǔ)上，簡(jiǎn)化并優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)步驟，為支持細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定提供更合適的參考。1材料與方法1．1試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物為21El齡斷奶SD雄性大鼠，由廣西
