資源描述：
《DB34T 1368-2011 飼料中已烯雌酚的測定—氣相色譜質譜法.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、ICS65.120B46DB34安徽省地方標準DB34/T1368—2011飼料中己烯雌酚的測定-氣相色譜質譜法Determinationofdiethylstilbestrolinfeed-Gaschromatographymassspectrometrymethod2011-03-16發(fā)布2011-04-16實施安徽省質量技術監(jiān)督局發(fā)布DB34/T1368—2011前言本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由安徽省畜牧獸醫(yī)局提出。本標準由安徽省農(nóng)業(yè)標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：安徽省獸藥飼料監(jiān)察所(安徽省畜產(chǎn)品質量安全檢測中心)。本標準主要起草人：劉紅云、吳蕾
2、、蔡一杰、張莉、明文慶、丁作坤、陶小平、錢志平、吳昊。IDB34/T1368—2011飼料中己烯雌酚的測定-氣相色譜質譜法1范圍本標準規(guī)定了飼料中己烯雌酚檢驗的氣相色譜質譜測定方法。本標準適用于飼料中己烯雌酚的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T14699.1飼料采樣3試樣制備按GB/T14699.1抽取有代表性的飼料樣品，用四分法縮減取約200g，粉碎至過0.45mm孔徑的分析篩，混勻，裝入磨口
3、瓶中備用。4原理飼料中己烯雌酚經(jīng)緩沖液均質后，用乙腈提取，經(jīng)凈化、洗脫、濃縮、用N,O-雙三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+三甲基氯硅烷（TMCS）衍生化后，氣相色譜質譜進行定性、定量分析。5試劑和溶液5.1除非另有說明，本法所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682二級水的規(guī)定。5.2己烯雌酚對照品：純度≥99％。5.3己烯雌酚儲備液：準確稱取己烯雌酚對照品適量，用甲醇溶解成1.0mg/mL標準儲備溶液。4℃冰箱保存，有效期6個月。5.4己烯雌酚標準工作液：將儲備液用甲醇稀釋成10、50、100、200、500、1000μg／L的標準工作液，在4℃冰箱中存放備用，有效期7天。5.5正
4、己烷。5.6乙酸乙酯。5.7碳酸鈉。5.8正丙醇。5.9甲苯：色譜純。5.10甲醇:色譜純。5.11乙腈:色譜純。1DB34/T1368—20115.12正己烷/乙酸乙酯：A溶液為85:15（V/V）和B溶液為70:30(V/V)。5.1310％碳酸鈉溶液。5.140.02mol/L乙酸銨溶液：稱取1.54g乙酸銨，加水溶解并稀釋至800mL左右，調節(jié)pH值至5.2，定容至1000mL。5.15衍生化試劑：N,O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（BSTFA）+三甲基氯硅烷TMCS（99:1）5.16硅膠固相萃取柱:規(guī)格1000mg/6mL。5.17微孔濾膜：孔徑0.25μm，有機相。6儀器設
5、備6.1氣相色譜質譜儀。6.2高速冷凍離心機，不低于4000r/min。6.3飼料粉粹機6.4pH計。6.5氮吹儀。6.6旋轉蒸發(fā)儀。6.7固相萃取裝置。6.8分析天平，感量0.0001g，0.001g。6.9振蕩器。6.10渦旋混合器。6.11超聲波清洗機。6.12離心管，50mL。6.13干燥箱。6.14梨形瓶，50mL。6.15單通道可調移液器：1～10μL、5～50μL、50～200μL、200-1000μL。7測定步驟7.1試樣提取稱取粉碎后的飼料樣品5g左右（精確至0.001g）于50mL離心管中，加入10mL乙酸銨溶液，均質1min，加入10mL乙腈，渦旋振蕩提取30s，以4
6、000r/min離心2min，收集乙腈提取液，殘渣再以10mL乙腈，步驟同前，合并兩次提取液。7.2凈化上述提取液中加入8mL正己烷和2mL乙酸乙酯，渦漩混合1min后以4000r/min離心5min，吸取中間層于50mL梨形瓶中，加入5mL正丙醇，在50℃水浴中旋轉濃縮至干。用10mL乙酸乙酯溶解殘渣，移入離心管中，加入2mL10％碳酸鈉溶液，漩渦混合1min，以4000r/min離心5min，棄去下層水相，再加入2mL10％碳酸鈉溶液，重復上述步驟后將乙酸乙酯移入10mL試管中，在50℃水浴中用氮氣吹干。用2mLA溶液（5.11）溶解殘渣，轉移到用5mL正己烷、5mL乙酸乙酯活化并抽干
7、處理后的硅膠柱上，用5mL正己烷淋洗，棄去正己烷淋洗液，抽干柱子，用5mLB溶液（5.11）洗脫，收集洗脫液，在50℃水浴中用氮氣吹干。2DB34/T1368—20117.3樣品衍生化在7.2吹干后的樣品中加入100μL衍生化試劑，振蕩混合后，封口，在60℃衍生15min，50℃水浴中用氮氣吹干。冷卻后加入100μL甲苯，混合后進行氣相色譜質譜分析。同時分別取標準工作液（5.3）系列1mL用氮氣吹干，加入100μL衍生化
