elisa法檢測丙型肝炎抗體的假陽性原因分析

《elisa法檢測丙型肝炎抗體的假陽性原因分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、司眶

2、園啊

3、日2013年12月第11卷第36期·臨床研究·383ELISA法檢測丙型肝炎抗體的假陽性原因分析伊新奎(漯河市第三人民醫(yī)院檢驗科，河南漯河462000)【摘要】目的分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)在檢測丙型肝炎抗體(HCV-Ab)的過程中出現(xiàn)假陽性的原因，并找出一些解決辦法。方法對ELISA法檢出的HCV-Ab弱陽性血清標(biāo)本做確證試驗，用核酸擴(kuò)增熒光基因分析法測定其HVC—RNA，確定其假陽性率，分析引起假陽性的因素和尋找解決方法。結(jié)果80例ELISA法檢出的HcV-Ab弱陽性血清標(biāo)本，經(jīng)核酸擴(kuò)增熒光基因分析法測定后有陽性64例，以核

4、酸擴(kuò)增熒光基因分析法為準(zhǔn)，ELISA法丙型肝炎抗體檢測假陽性率為2O％。存在】6例假陽性，假陽性率為2O％(16／8O)。兩種方法比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。結(jié)論ELISA檢測HCV抗體出現(xiàn)假陽性有許多影響因素，除了要盡量消除這些因素外，對于懷疑其為假陽性的血清標(biāo)本要檢測丙型肝炎病毒RNA確診?！娟P(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗；核酸擴(kuò)增熒光基因分析法；丙型肝炎抗體；假陽性中圖分類號：R446；R512．6+3文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B文章編號：1671—8194(2013)36-0383-01丙型肝炎是由HCV引起的傳染性疾病，目前診斷丙型肝炎的主要問

5、題，在檢驗過程中有很多因素可能導(dǎo)致檢測結(jié)果為假陽性。依據(jù)是檢測患者血清丙型肝炎抗體(HCV-Ab)。酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA法的原理是抗體與抗原的特異反應(yīng)結(jié)合底物與酶的顏色反由于操作簡單且具有高特異性，被廣泛地應(yīng)用在臨床檢~HCV-Ab。應(yīng)來判斷結(jié)果的J。類風(fēng)濕因子干擾、SOD的干擾、抗原不純、標(biāo)本溶但是在應(yīng)用ELISA法檢測丙型肝炎抗體時存在很多可能導(dǎo)致檢測結(jié)果血、被污染、貯存時間太長、凝固不全以及試劑盒抗原不純、洗板不徹是假陽性的影響因素。本次研究對ELISA法檢測出的HCV-Ab弱陽性底等諸多因素都有可能導(dǎo)致檢測結(jié)果呈假陽性。如果血清中有類

6、風(fēng)濕因血清標(biāo)本，用核酸擴(kuò)增熒光基因分析法檢測其HCV-RNA，確證ELISA子那么它可能與固相IGG、酶標(biāo)IGG結(jié)合，在檢測時出現(xiàn)假陽性。如果血法試驗復(fù)檢的結(jié)果，并分析了出現(xiàn)假陽性檢驗結(jié)果的影響因素并提供清標(biāo)本中的SOD升高也可能會導(dǎo)致HCV-Ab檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性。而HCV了一些解決方法?；蚬こ炭乖患円踩菀壮霈F(xiàn)假陽性結(jié)果，尤其易出現(xiàn)弱陽性。1資料與方法在日常檢驗工作中檢驗人員～定要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行檢驗，1．1一般資料對懷疑其存在假陽性的血清標(biāo)本要測定其HCV-RNA，確保檢驗的準(zhǔn)8O例ELISA法檢出的HCV-Ab弱陽性血清標(biāo)本均采1~2

7、010年3月至確度，避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。為避免假陽性的出現(xiàn)，檢驗人員應(yīng)注2012年3月我院肝病科收治的患者。意：如果血清標(biāo)本是凝固血，應(yīng)現(xiàn)將標(biāo)本自然放置1h，再離心分離1．2儀器和試劑15rain，如果血清標(biāo)本是抗凝血，在采血后必須立即顛倒5次以上，存ELISA法試劑盒由上?？迫A提供，酶免儀和洗板機(jī)由北京普朗提放一段時間后，離心分離I5min【4J。及時將加樣后的加貼封片放入恒溫供。核酸擴(kuò)增熒光基因分析法試劑盒由達(dá)安基因提供，采用DA一7600箱里。在加酶試劑的時候不要將水滴到孔外，如果滴到孔外，要及時核酸擴(kuò)增實時熒光基因分析儀川。用吸水紙輕拭吸干

8、。洗板要徹底，保證洗板針通暢，將洗液注滿每一1．3檢測方法個孔，洗完后用吸水紙吸干。不要混用不同批號的試劑，加顯色劑采患者清晨空腹靜脈血3~5mL，將其離心分離血清，先用ELISA的時候注意不要流到孔外，在檢測前將試劑放置在室溫下30min。法檢測HCV-Ab(1～2h內(nèi))3次，對3次結(jié)果均為弱陽性的標(biāo)本，用核綜上所述，影D~ELISA法檢測血清標(biāo)本HCV-Ab~現(xiàn)假陽性的因素酸擴(kuò)增熒光基因分析法檢測其HCV-RNA。除了試劑盒質(zhì)量和儀器性能外，還有血清標(biāo)本的處理和操作不當(dāng)?shù)纫?．4數(shù)據(jù)處理會引起假陽性的出現(xiàn)。檢驗人員應(yīng)該規(guī)范操作，盡量消除假陽性出

9、現(xiàn)采用SPSS11．O統(tǒng)計學(xué)軟件包對數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，當(dāng)?shù)挠绊懸蛩?，對于可疑的假陽性血清?biāo)本最好采用核酸擴(kuò)增熒光基因P

10、驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(7)：577—580．20％(16／80)。兩種方法比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。