響應(yīng)面法優(yōu)化油莎豆粕蛋白抗氧化肽制備工藝-論文.pdf

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1、●工藝技術(shù)住矗工案響應(yīng)面法優(yōu)化油莎豆粕蛋白抗氧化肽制備工藝胡煒東，蔡永敏，魯富寬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院(包頭014109)摘要選用油莎豆粕蛋白為原料，利用堿性蛋白酶制備油莎粕抗氧化肽，v；~DPPH自由基清除率為評價指標，對底物質(zhì)量濃度、加酶量、pH、酶解溫度、酶解時間進行研究，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，利用Box—Benhnken中心組合設(shè)計原理對試驗進行優(yōu)化，通過響應(yīng)面分析，確定酶解的較佳工藝為底物質(zhì)量濃度0．06g／mL，加酶量為7000U／g蛋白質(zhì)，pH9．5，酶解溫度50℃，酶解時間5h，在此條件下，DPPH自由基清除率84．5

2、4％。關(guān)鍵詞油莎豆粕蛋白；抗氧化肽；酶解；響應(yīng)面法OptimizationofPreparationProcessingforAntioxidantPeptidesfrOmCyperusesculeutusMeaIProteinbyResponseSurfaceMethodologyHuWei-dong，CaiYong-min，LuFu—kuanVocationalandTechnicalCollegeoflMAU(Baotou014109)AbstractCyperusesculeutusmealproteinasrawmaterial

3、,preparationofCyperusesculeutusmealantioxidantpeptidebyalkalineproteasesystem,theDHHPfreeradicalscavengingrateasevaluationindex,selectionofsubstramconcentration,enzymedosage，pH,hydrolysistemperatureandhydrolysistimeastheresearchobject,onthebasisofsinglefactortest,optimiza

4、tionoftheexperimentusiIlgtheBox-Benhnkenprincipleforcentralcompositedesign．Byresponsesurfaceanalysis，theoptimumhydrolysisconditionsweredeterminedasubstrateconcentration0．06舭，enzymedosage7000U／gprotein,pH9．5，hydrolysistemperature50℃andhydrolysistime51LtheDPPHfreeradicalsca

5、vengingratefortheseoptimumconditionwas84．54％．KeywordsCyperusesculeutusmealprotein；antioxidantpeptides；hydrolysis；responsesurfacemethodology抗氧化劑被廣泛用于食品添加劑，由于合成添加基苯肼(DPPH)：美國Sigma公司；所用試劑均為分劑的毒性受到質(zhì)疑，天然抗氧化肽具有低毒、高效、析純：內(nèi)蒙鴻日公司。易吸收等特點，越來越受到人們的青睞，抗氧化肽的1．2儀器與設(shè)備攝入可以降低體內(nèi)自由基水平，防止脂質(zhì)氧化，

6、幫助TU一1901雙光束紫外可見分光光度計：北京普析機體抵御疾病?。通用儀器有限責(zé)任公司；PHS一3EpH計：上海儀電科油莎豆又稱油莎草、洋地栗，原產(chǎn)于非洲地中海學(xué)儀器股份有限公司；冷凍干燥機：北京博醫(yī)康實驗沿岸，是莎草科莎草屬多年生草本植物，具有必需脂儀器有限公司；SC一3610離心機：安徽中科中佳科學(xué)肪酸、淀粉、蛋白質(zhì)和多種維生素等】，廣泛分布于儀器有限公司。北京、內(nèi)蒙古等多個省市自治區(qū)。對于油莎豆的研究1．3油莎豆粕抗氧化肽制備工藝大多集中在種植技術(shù)p】，油脂【4】，淀粉I卅等方面，但1．3．1工藝流程【7鮮見油莎豆脫脂后的副產(chǎn)品—

7、—油莎豆粕的研究，油脫脂油莎豆粕一干燥一粉碎一1：20(g／mL)莎豆粕中含有豐富的蛋白，選擇適合的蛋白酶酶解油調(diào)漿一調(diào)pH9．O一50℃攪拌浸提1h一離心(6000r／莎豆粕蛋白制備具有抗氧化肽段，對油莎豆粕的開發(fā)min，15min)_÷上清液調(diào)pH至4．5一酸沉一離心和利用具有重要意義。研究利用堿性蛋白酶制備抗氧(6000r／min，15min)一冷凍干燥一油莎豆粕蛋白化肽，采用響應(yīng)面分析法對油莎豆粕抗氧化肽制備工質(zhì)一配制油莎豆蛋白懸浮液一熱變性處理(90oC，10藝進行優(yōu)化，為油莎豆粕蛋白進一步開發(fā)提供理論min)一調(diào)pH一蛋白酶酶

8、解一滅酶(100oC，10min)依據(jù)。一冷卻一離心(6000r／min，15min)一上清液(油莎豆粕蛋白抗氧化肽)1材料與方法1．3．2DPPH自由基清除率的測定1．1材料與試劑采用比色法