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1、SPA膠體金免疫層析方法檢測(cè)PCV2抗體的初步建立及應(yīng)用時(shí)建立~,戰(zhàn)翔。,李俊,叢曉燕,孫文博,杜以軍,彭酤,徐紹建,吳家強(qiáng),陳蕾,郭立輝,王金寶,劉代成(1.山東師范大學(xué)生命科學(xué)院,山東濟(jì)南250014;2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所山東省畜禽疫病防治與繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東濟(jì)南250100;3.濟(jì)南市畜牧獸醫(yī)局疫控中心,山東濟(jì)南250000)摘要:采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒,并將其標(biāo)記SPA,將金標(biāo)SPA包被至玻璃纖維膜上制備金標(biāo)墊,將純化的Cap蛋白、兔抗SPA抗體分別包被至硝酸纖維素膜的檢測(cè)線與質(zhì)控線上,建立了一種檢測(cè)豬圓環(huán)病毒2型抗體的膠體金
2、免疫層析方法。檢測(cè)結(jié)果顯示,組裝的檢測(cè)卡只與圓環(huán)病毒陽(yáng)性血清發(fā)生特異性反應(yīng),檢測(cè)的靈敏度可以稀釋到100倍。用此檢測(cè)卡與商品化ELISA試劑盒對(duì)86份I陸床血清進(jìn)行平行檢測(cè),兩者的檢測(cè)陽(yáng)性率分別為65.12%和70.93%。該方法檢測(cè)速度快,15min內(nèi)可出結(jié)果,特異性強(qiáng),操作簡(jiǎn)便,可廣泛應(yīng)用于基層。關(guān)鍵詞:SPA;膠體金免疫層析;快速診斷中圖分類(lèi)號(hào):$852.659.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1005.944X(2013)09—0059.05EstablishmentandApplicationofSPAColloidalGoldImmuno-chromato
3、graphyforDetectionofAntibodiesagainstPCV-2ShiJianli,2ZhanXiang,LiJun,CongXiaoyan。,SunWenbo,DuYijun,PengJie,XuShaojian,WuJiaqiang,ChenLei,GuoLihui,WangJinbao,LiuDaicheng(1.CollegeofLifeScience,ShandongNormalUniversity,Jinan,Shandong250014;2.ResearchInstituteofAnimalScienceandVeterinar
4、yMedicine,ShandongAcademyofAgriculturalSciences,Jinan,Shandong250100;3.JinanAnimalDiseasePreventionandControlCenter,Jinan,Shandong250000)Abstract:StaphylococcalproteinA(SPA)labeledwithcolloidalgoldparticlespreparedbytrisodiumcitratereductionandthelabeledSPAwascoatedontoglassfibrousme
5、mbranetopreparegoldlabeledpad.ThepurifiedCapproteinofporcinecircovirus2andrabbitanti-SPAantibodywerecoatedrespectivelytothetestlineandqualitycontrollineonnitratecellulosemembrane,SOastoestablishacolloidalgoldimmuno·chromatographyfordetectionofantibodiesagainstporcinecircovirus一2.Ther
6、esultsindicatedthattheassembledtestcardreactedexclusivelywithPCV-2positiveseraandthetestsensitivitywasup—to100folddilutions.86clinicalsamplesweretestedbothwiththetestcardandthecommercialELISAkid,resultinginpositiveratesof65.12%and70.93%respectively.Themethodwasrapid,specificandsimple
7、inoperation,andcouldbeextendedatgrass.roots.Keywords:SPA.Colloidalgoldil'nnluno—chromatography;Rapiddiagnosis豬圓環(huán)病毒(porcinecircovirus,PCV)屬分別為無(wú)致病性的PCV1和有致病性的PCV2。于圓環(huán)病毒科,是一種小的、無(wú)囊膜的單鏈負(fù)股PCV2主要與豬群中發(fā)生的斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜環(huán)狀DNA病毒[11。圓環(huán)病毒共有2個(gè)基因型,合征(postweaningmtdtisystemicwastingsyndrome,基金項(xiàng)目:國(guó)家自然基金(3
8、1201889)山東省自