spa膠體金免疫層析方法檢測pcv2抗體的初步建立及應用

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1、SPA膠體金免疫層析方法檢測PCV2抗體的初步建立及應用時建立~,戰(zhàn)翔。,李俊,叢曉燕,孫文博,杜以軍,彭酤,徐紹建,吳家強,陳蕾,郭立輝,王金寶,劉代成(1.山東師范大學生命科學院,山東濟南250014;2.山東省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室,山東濟南250100;3.濟南市畜牧獸醫(yī)局疫控中心,山東濟南250000)摘要:采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒,并將其標記SPA,將金標SPA包被至玻璃纖維膜上制備金標墊,將純化的Cap蛋白、兔抗SPA抗體分別包被至硝酸纖維素膜的檢測線與質(zhì)控線上,建立了一種檢測豬圓環(huán)病毒2型抗體的膠體金

2、免疫層析方法。檢測結(jié)果顯示,組裝的檢測卡只與圓環(huán)病毒陽性血清發(fā)生特異性反應,檢測的靈敏度可以稀釋到100倍。用此檢測卡與商品化ELISA試劑盒對86份I陸床血清進行平行檢測,兩者的檢測陽性率分別為65.12%和70.93%。該方法檢測速度快,15min內(nèi)可出結(jié)果,特異性強,操作簡便,可廣泛應用于基層。關(guān)鍵詞:SPA;膠體金免疫層析;快速診斷中圖分類號:$852.659.2文獻標識碼:B文章編號:1005.944X(2013)09—0059.05EstablishmentandApplicationofSPAColloidalGoldImmuno-chromato

3、graphyforDetectionofAntibodiesagainstPCV-2ShiJianli,2ZhanXiang,LiJun,CongXiaoyan。,SunWenbo,DuYijun,PengJie,XuShaojian,WuJiaqiang,ChenLei,GuoLihui,WangJinbao,LiuDaicheng(1.CollegeofLifeScience,ShandongNormalUniversity,Jinan,Shandong250014;2.ResearchInstituteofAnimalScienceandVeterinar

4、yMedicine,ShandongAcademyofAgriculturalSciences,Jinan,Shandong250100;3.JinanAnimalDiseasePreventionandControlCenter,Jinan,Shandong250000)Abstract:StaphylococcalproteinA(SPA)labeledwithcolloidalgoldparticlespreparedbytrisodiumcitratereductionandthelabeledSPAwascoatedontoglassfibrousme

5、mbranetopreparegoldlabeledpad.ThepurifiedCapproteinofporcinecircovirus2andrabbitanti-SPAantibodywerecoatedrespectivelytothetestlineandqualitycontrollineonnitratecellulosemembrane,SOastoestablishacolloidalgoldimmuno·chromatographyfordetectionofantibodiesagainstporcinecircovirus一2.Ther

6、esultsindicatedthattheassembledtestcardreactedexclusivelywithPCV-2positiveseraandthetestsensitivitywasup—to100folddilutions.86clinicalsamplesweretestedbothwiththetestcardandthecommercialELISAkid,resultinginpositiveratesof65.12%and70.93%respectively.Themethodwasrapid,specificandsimple

7、inoperation,andcouldbeextendedatgrass.roots.Keywords:SPA.Colloidalgoldil'nnluno—chromatography;Rapiddiagnosis豬圓環(huán)病毒(porcinecircovirus,PCV)屬分別為無致病性的PCV1和有致病性的PCV2。于圓環(huán)病毒科,是一種小的、無囊膜的單鏈負股PCV2主要與豬群中發(fā)生的斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜環(huán)狀DNA病毒[11。圓環(huán)病毒共有2個基因型,合征(postweaningmtdtisystemicwastingsyndrome,基金項目:國家自然基金(3

8、1201889)山東省自

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