大黃牡丹湯組方對急性胰腺炎模型大鼠腺泡細胞分泌功能的影響-論文.pdf

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1、第31卷第3期實驗動物科學VOI_31NO．32014年6月LAB0RAT0RYANIMALSCIENCEJune2O14驢告報究研驢護大黃牡丹湯組方對急性胰腺炎模型大鼠腺泡細胞分泌功能的影響張延英舒暢蔡興吳建軍張艷霞王茸李存祥康萬榮王榮(1．甘肅中醫(yī)學院／甘肅省中藥藥理與毒理學重點實驗室／甘肅省高校中(藏)藥化學與質(zhì)量研究省級重點實驗室，蘭州730000)(2．甘肅省分析測試中5'／甘肅省實驗動物管理委員會，蘭州730000)摘要：目的研究大黃牡丹湯組方(RPDP)對急性胰腺炎(Acutepancreatiti

2、s，AP)模型大鼠胰腺腺泡細胞外分泌功能和腺泡細胞內(nèi)鈣離子濃度(FI)的影響。方法SD大鼠灌胃RPDP以制備大黃牡丹湯組方含藥血清(RPDP—S)；SD大鼠分為假手術(shù)組和AP模型組，分離胰腺腺泡細胞并與RPDP—S共同孵育，測定腺泡細胞淀粉酶分泌水平和FI變化。結(jié)果AP模型大鼠腺泡細胞分泌淀粉酶水平較假手術(shù)組顯著升高(P<0．05)，經(jīng)RPDP—S處理的AP模型大鼠腺泡細胞分泌淀粉酶水平顯著降低(P<0．05)；FI隨AP模型病程延長而升高(P<0．05)，RPDP-S可抑制AP模型大鼠腺泡細胞內(nèi)FI升高(P<0

3、．05)。結(jié)論RPDP通能抑制AP大鼠胰腺腺泡細胞的外分泌功能，抑制腺泡細胞內(nèi)鈣離子的升高，降低腺泡細胞內(nèi)FI超載。關(guān)鍵詞：大黃牡丹湯組方；急性胰腺炎；胰腺腺泡細胞；AP模型大鼠；FI超載中圖分類號：Q95—33文獻標識碼：A文章編號：1006—6179(2014)03—0026-04急性胰腺炎(Acutepancreatitis，AP)是一種胰酶許可證號：SYXK(甘)2011—0001；SPF雄性SD大鼠激活引起的常見急腹癥之一，胰腺腺泡細胞內(nèi)酶原120只，體質(zhì)量2o0—260g。異常激活，胰腺局部炎癥反應，

4、AP早期的主要病因1．2藥物、主要試劑與儀器是胰酶異常激活引起胰腺自身消化，現(xiàn)今研究牡丹湯組方(RPDP)由甘肅省中藥藥理與毒理的熱點之一是“腺泡細胞鈣超載學說”，同行學者認學重點實驗室濃縮成含4kg／L生藥的液體。實驗可度不斷提高。中草藥治療AP的療效得到國內(nèi)用的多聚賴氨酸、伊格爾粉狀固體培養(yǎng)基(DMEM)、外支持，大黃牡丹湯(RheumpalmatumLand膠原酶P、牛血清白蛋白組分V、Fluo一3／AM、大豆paeoniasuffruticosaandrewsdecoctionprescription，酶

5、抑制劑(SBTI)和CCK培由蘭州碩達生物技術(shù)公RPDP)治療AP模型大鼠機理還未系統(tǒng)闡明。本司購入，實驗用的其他試劑是本實驗室用分析純試實驗運用中藥動物血清藥理學方法，通過觀測劑新鮮配置。實驗用的普通光學顯微鏡、日產(chǎn)激光RPDP對胰腺腺泡細胞外分泌功能及腺泡細胞內(nèi)鈣共聚焦顯微鏡(LeicaTCSNT)、VELOCITY18R臺離子濃度(n)的影響，進一步探索RPDP治療AP式高速冷凍離心機、IX51研究級倒置顯微鏡、MCO．的作用機制。18AICCO：培養(yǎng)箱、熒光定量分析軟件由本實驗室提供。1材料和方法1．3大

6、黃牡丹湯組方含藥血清fRheumpalmatumLandpaeoniasufrutieosaandrewsdecoction1．1實驗動物prescriptionserum，RPDP-S)的制備SPF級實驗動物和屏障實驗室均由甘肅中醫(yī)學取120只SD大鼠分為2組，其中RPDP灌胃組院提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK(甘)2011—0001，使用(RPDP組)80只，生理鹽水灌胃組(SLYS組)收稿日期：2014—05—05基金項目：甘肅省技術(shù)研究與開發(fā)專項(No．1305TCYA043)作者簡介：張延英(1964一)

7、，男，碩士，副教授。研究方向：實驗動物學。E-mail：780005161@qq．COB通信作者：蔡興(1959一)，男，研究員，長期從事實驗動物管理及分析測試研究。E-mall：cxir-g407@163．corn第3期張延英等：大黃牡丹湯組方對急性胰腺炎模型大鼠腺泡細胞分泌功能的影響·27·40只。灌胃前禁食禁水4h，其他時間正常供水和組分別用10％RPDP—S—M、10％SLYS—S—M和DMEM飼料。RPDP組灌胃RPDP煎劑，每13劑量為培養(yǎng)基重新懸浮，分別加入到多聚賴氨酸包被過的40g／kg(相當于1

8、0mL／kg)，此劑量相當于成人用孔板各孔內(nèi)，置37~C5％CO培養(yǎng)箱培養(yǎng)6h，37oC藥量的20倍；SLYS組大鼠灌胃等體積生理鹽水。環(huán)境用fluo一3／AM(5p~mol／L)避光加載細胞30rain，每日2次，12h灌胃一次，連續(xù)給藥7d。第7天灌清洗干凈細胞外熒光，在激光共聚焦顯微鏡下于激胃1h后無菌操作采血，100r／min離心2min，取血發(fā)波長488—514