谷胱甘肽與順鉑聯(lián)用對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖的影響.pdf

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1、第31卷第3期廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)Vl01．3lNO．32602013年6月J0URNALOFGUANGDONGMEDICALC0LLEGEJun．20l3谷胱甘肽與順鉑聯(lián)用對(duì)肺癌A549．~1ti胞增殖的影響朱建紅，吳科鋒，呂應(yīng)年，陸何林，李立(1廣東醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，廣東東莞523808；2廣東醫(yī)學(xué)院廣東天然藥物研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東湛江524023)摘要：目的探討谷胱甘肽與順鉑聯(lián)用對(duì)肺癌A549細(xì)胞增殖的影響。方法應(yīng)用MTT法及細(xì)胞計(jì)數(shù)評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖情況，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及活性氧(ROS)水平，Westernblot~lJP53表達(dá)。結(jié)果0．3、0．9g／L谷胱甘肽與3mg／L順鉑聯(lián)用72

2、h，1、3、9g／L谷胱甘肽與9mg／L／t~鉑聯(lián)用30h，均可顯著降低順鉑對(duì)A549細(xì)胞增殖的抑制作用(P<0．O1)。9g／峪胱甘肽與9mg／L順鉑聯(lián)用，可減少A549細(xì)胞ROS產(chǎn)生和早期凋亡(P

3、ungcancerA549CellsZHUJian—hong，wuKe—feng，LVYing—nian，LUHe—lin，LILi(1．School。fPhamaacy，GuangdongMedica1College，Dongguan523808，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheefectofglutathioneandcisplatinonproliferationoflungcancerA549cells．MethodsCellproliferation，apoptosis，reactiveoxygenspecies(ROS)andP53e

4、xpressionwereevaluatedbyMTT,cellcounting，flowcytometryandWesternblot．respectively．ResultsCisplatin．inducedinhibitionofA549cellproliferationdecreasedremarkablyf0．01)altercocultureof0．3g／Lor0．9g／Lglutathioneand3mg／Lcisplatinfor72h，or1，3，9g／Lglutathioneand9mg／Lcisplatinfor30h．Cotreatmentof9g／Lglutathio

5、neand9mg／LcisplatininhibitedROSproductionandearlyapoptosisofA549cellsfP

6、鉑(cisplatin，CDDP)通過(guò)DNA鏈間、鏈內(nèi)交聯(lián)及活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)生成，展1材料和方法示了一個(gè)對(duì)包括肺癌在內(nèi)的多種癌癥的強(qiáng)大化療作用。但是，CDDP的許多毒副作用卻限制了其應(yīng)1．1細(xì)胞株用，約1／3接受CDDP治療的患者會(huì)發(fā)生中毒性腎損A549，非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系，由本實(shí)驗(yàn)室液氮害，高劑量CDDP還會(huì)導(dǎo)致肝中毒。ROS過(guò)度生冷凍保存。成被認(rèn)為是CDDP發(fā)生毒副作用的主要原因，因1．2藥物與試劑此，CDDP與抗氧化劑聯(lián)用可能是一個(gè)降低其毒副RPMI一1640培養(yǎng)基干粉、MTT(Sigma~_}司)、新作用的有效策略j。谷胱甘肽(glutath

7、ione，GSH)是生牛血清(Hyclone公司)、胰蛋白酶(Amresco公司)、非酶性抗氧化劑，通過(guò)巰基氧化．還原態(tài)轉(zhuǎn)換，作為注射用順鉑(齊魯制藥)、GSH、活性氧檢測(cè)試劑可逆的供氫體，主要在細(xì)胞內(nèi)的水相發(fā)揮抗氧化保盒、AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(碧云天)、護(hù)作用。目前，有關(guān)GSH與CDDP聯(lián)用對(duì)肺癌A549蛋白提取試劑盒、BCA蛋白定量試劑盒、GAPDH細(xì)胞增殖作用的報(bào)道較