酶輔助超聲提取蒙藥瞿麥總皂苷工藝研究.pdf

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1、2014第十六卷第三期-i-Vo1．16No．3酶輔助超聲提取蒙藥瞿麥總皂苷工藝研究六陳建平，朱曉偉，成日青，布仁，于姝燕，杜艷青，王來兵，牧丹，崔穎，趙國丁(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院呼和浩特010110)摘要：目的：優(yōu)化酶輔助超聲法提取蒙藥瞿麥總皂苷的最佳提取工藝。方法：采用紫外可見分光光度法，以總皂苷提取率為評價指標(biāo)，先后通過單因素試驗和正交試驗，對酶輔助超聲提取法進行優(yōu)化。結(jié)果：最佳工藝條件為酶用量4．0mg，超聲功率180W，超聲時間15min，料液比1：30。在此條件下蒙藥瞿麥總皂苷的提取率為2．367％。結(jié)論：該方法節(jié)約

2、成本，節(jié)省時間，提取率高，可作為蒙藥瞿麥總皂苷的提取方法。關(guān)鍵詞：瞿麥總皂苷酶輔助超聲提取紫外可見分光光度法doi：10．11842／wst．2014．03．043中圖分類號：R283文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A瞿麥DianthussuperbusL．，別名十樣景花、竹節(jié)產(chǎn))，BSA124S型電子天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器草花、山瞿麥、剪絨花，蒙藥名高優(yōu)一巴沙嘎。石竹科有限公司)，恒溫水浴鍋(上海亞榮生化儀器廠)，電多年生草本植物Ⅲ，全草入藥。性苦、寒、辛、無毒。具子恒溫不銹鋼水浴鍋(余姚市上通溫控儀表廠)，旋有涼血、止痛、解毒、利尿通淋、破

3、血通經(jīng)的功能，用轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)，循環(huán)水式多于治療熱淋、血淋、石淋、小便不通、淋瀝澀痛、月經(jīng)用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)，電熱鼓風(fēng)干閉止、肝熱、“寶Et”、痧癥及產(chǎn)褥熱，為蒙醫(yī)常用藥燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)，KH5200DE型高之一【。臨床療效廣泛，可復(fù)方或者單獨使用。皂苷功率數(shù)控超聲清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)。是其主要化學(xué)成分之一，具有抗腫瘤作用}31、心血管瞿麥購自內(nèi)蒙古天立藥業(yè)，經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥理活性_41、抗微生物作用、抗真菌作用、免疫調(diào)節(jié)藥學(xué)院藥用植物學(xué)教研室喬俊纏教授鑒定為石

4、竹作用、去痰作用及促子宮收縮作用等。目前，國內(nèi)外科植物瞿麥D．superbusL．的帶花地上部分。薯蕷皂對瞿麥皂苷提取工藝的報道較少。本實驗通過結(jié)合苷元對照品(批號：111539—200001，中國藥品生物制酶解法和超聲法的優(yōu)勢I6】，首次采用酶輔助超聲法品鑒定所提供)，淀粉酶(江蘇無錫生產(chǎn))。所用試劑提取蒙藥瞿麥中總皂苷。均為分析純。1儀器與試藥2實驗方法TU1901型雙光束紫外分光光度計(北京普析通2．1對照品溶液的制備用有限責(zé)任公司)，LX07A多功能粉碎機(上海江信精密稱取干燥至恒重的薯蕷皂苷元對照品5．0科技有限公司)

5、，AB135分析天平(Switzerland生mg，用無水乙醇溶解，定容至25mL容量瓶中，搖勻，即得2．0txg·mL薯蕷皂苷元對照品溶液。收稿日期：2013-06—19修回日期：2014—03—05★內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)青年創(chuàng)新基金項目(YKD2013QNcx013)：蒙藥瞿麥化學(xué)成分分離及主要化學(xué)成分提取工藝研究，負(fù)責(zé)人：陳建平；內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)本科教學(xué)項目(NYYXZJ201304)：校級優(yōu)秀主講教師，負(fù)責(zé)人：陳建平；內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)大學(xué)生“英才培育”項目(2014YCPY015)：蒙藥瞿麥有效成分的提取工藝研究及含量測定，負(fù)責(zé)人

6、：陳建平?！铩镖w國丁，副教授，主要研究方向：中蒙藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究。665[WorldScienceandTechnology~ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica]世界科學(xué)技術(shù)一中醫(yī)藥現(xiàn)代化★技術(shù)應(yīng)用研究2．2供試品溶液的制備顯色，在410nm處測定吸光度，以吸光度為橫坐精密稱取蒙藥瞿麥粉末1．0g，加10mL石油標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y=醚于50~C水浴加熱回流2h，過濾，干燥至無石油醚0．025X+0．004，r

7、=O．9999，結(jié)果表明濃度在4．176～味，將其置于錐形瓶中，加入pH6．0的HAc—NaAc2O．88g·mL內(nèi)與吸光度值呈良好線性關(guān)系。緩沖液，浸泡30min，加入一定量的淀粉酶，6O℃水3實驗方法浴加熱30min，于95℃水浴滅酶10min后放至室溫超聲，過濾，濾液用水飽和正丁醇萃取3次，合并濾3．1單因素試驗液，揮干，用無水乙醇洗出，定容至25mL容量瓶中。3．1．1酶用量考察2．3測定波長的選擇精密稱取蒙藥瞿麥粉末1．0g，以料液比為1：15，精密量取對照品和供試品溶液0．5mL，置l0超聲功率200W，超聲時間30

8、min，淀粉酶用量分mL具塞試管中，于60~C水浴揮干，加人0．2mL5％別取1、2、4、6、8、10mgE，按“2．2”項下方法操作，香草醛一冰醋酸溶液，0．8mL高氯酸于60?！?水浴加再按“2．3”項下方法顯色，在410nm處測其吸光度熱20min，取出放