不同濃度的胎牛血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純度及周期的影響-論文.pdf

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1、·742·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Jun；49(6)不同濃度的胎牛血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞純度及周期的影響陳小丹，何家才摘要目的比較含有體積分?jǐn)?shù)為0．10、0．15、0．20的胎牛養(yǎng)，每天取1塊培養(yǎng)板用CCK．8檢測其吸光度值(OD)。結(jié)血清(FBS)的完全培養(yǎng)基對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質(zhì)干果CD45陰性表達(dá)，CD29、CD90、CD44陽性表達(dá)，3種完全細(xì)胞(BMSCs)純度及細(xì)胞周期的影響，尋求適宜干細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的BMSCs的表面標(biāo)志物在前2代時(shí)差別較大，的FBS濃度。方法用頸椎脫臼法處死SD大鼠，采用全骨

2、但在P3，P4時(shí)差別已較少，P4時(shí)均可以獲得較純的BMSCs；髓貼壁法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs。實(shí)驗(yàn)分為A、B、C3組，分細(xì)胞周期結(jié)果顯示，在同一時(shí)間點(diǎn)，G。／G．期：A、B、C3組隨別為FBS體積分?jǐn)?shù)是0．10、0．15、0．20的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的著FBS濃度的增加，G。／G。期降低且差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；G：／BMSCs，比較各組細(xì)胞在第2、3、4、5代(P2，P3，P4，P5)的M期：在培養(yǎng)后的24h，A、B、C3組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

3、同濃度的完全培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)4d，用流式細(xì)胞儀測均無差別；S+G／M期隨FBS濃度的增加而增高。細(xì)胞活其在培養(yǎng)后的24、48、72、96h的細(xì)胞周期；收集P3BMSCs力結(jié)果顯示，在24h時(shí)A、B、C3組的OD值依次增大，差異制備細(xì)胞懸液接種到6塊96孔板，每塊板接種的BMSCs分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05，F(xiàn)：5．002)，隨時(shí)間的延長3組之別用FBS體積分?jǐn)?shù)是0．10、0．15、0．20的完全培養(yǎng)基進(jìn)行培間無明顯差異。結(jié)論這3種培養(yǎng)基在P4能獲得較純的BMSCs；細(xì)胞周期及活力結(jié)果顯示，3種完全培養(yǎng)基均能促進(jìn)2013—12—20接收BMSCs的增長，3組之間不存在差異。體積分?jǐn)?shù)

4、為0．10的基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(編號(hào)：81371114)；安徽省自然科學(xué)基FBS已滿足BMSCs的分離和擴(kuò)增，要想在短期內(nèi)獲得較純金(編號(hào)：11040606M173)；安徽醫(yī)科大學(xué)博士科研資助基的BMSCs，原代培養(yǎng)使用體積分?jǐn)?shù)為0．15，傳代用0．10FBS金(編號(hào)：XJ201034)；安徽高校省級(jí)自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)的完全培養(yǎng)基。目(編號(hào)：KJ2013A154)關(guān)鍵詞骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞；胎牛血清；細(xì)胞周期；表面標(biāo)志作者單位：安徽醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，安徽醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院，中圖分類號(hào)R一33安徽省口腔疾病研究中心實(shí)驗(yàn)室，合肥230032文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號(hào)1000—149

5、2(2014)06—0742—06作者簡介：陳小丹，女，碩士研究生；何家才，男，教授，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E—mail：hejiacai@163．con骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemesenchymalstemEffectongp91Ph。humancoronaryarteryendothelialcellsintheprocessofoxidativestressbyvalsartanWangCheng一，HanWeixing，WuJijun，etal(DeptofCardiology，TheAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniver

6、sity，Hefei230022；DeptofDiagnostics，TheFClinicalCollegeofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230032)AbstractObjectiveTostudytheeffectonhumancoronarya~eryendothelialcells(HCAEC)gp91intheprocessofoxidativestressbyvalsartan．MethodsThecontrolgroup：adherentcultureHCAECinvitro，nootherintervention；theexperim

7、entalgroup：underthesameconditionswithvalsartan(10~zmol／L)trainfor24hours．U—singWesternblotandcellimmunofluorescencemeasuregp91levelsintwogroupsofcells．Theresultsweresta—tisticallyanalyzedandcomparedinbothgroups．ResultsTheexperimentalgroupgp91