人參皂苷Rg3逆轉(zhuǎn)人食管癌耐順鉑細(xì)胞Eca109/DDP的作用機(jī)制-論文.pdf

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1、解剖學(xué)研究2013年第35卷第5期AnatRes。2013,Vo1.35.No.5·論著·人參皂苷Rg3逆轉(zhuǎn)人食管癌耐順鉑細(xì)胞Ecal09/DDP的作用機(jī)制李雪甫,王永實(shí),劉艷文,徐秉忠(淮陰衛(wèi)生高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校消化道腫瘤實(shí)驗(yàn)室,江蘇淮安223300)【摘要】目的研究人參皂苷Rg3(ginsenosideRg3,Rg3)對人食管癌耐順鉑細(xì)胞Ecal09/DDP的耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用及可能機(jī)制,為提高食管癌化療療效提供新方法。方法應(yīng)用MqT法及流式細(xì)胞檢測Rg3和(或)順鉑(cisplatin,DDP)對細(xì)胞Ecal09/DDP增殖的影響;免疫組織化學(xué)法

2、及Westernblot印跡法檢測細(xì)胞P糖蛋白(p-glyeoprotein,P—gP)的變化。結(jié)果Rg3顯著降低了DDP對Ecal09/DDP細(xì)胞的Ic,逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為2.0倍,細(xì)胞周期分析顯示,Ecal09/DDP細(xì)胞被阻滯在G期的數(shù)量顯著增加;而Rg3和DDP聯(lián)合作用腫瘤48h后P—gP表達(dá)水平顯著下降。結(jié)論低細(xì)胞毒劑量Rg3可部分逆轉(zhuǎn)Ecal09/DDP對食管癌的耐藥性,下調(diào)的P.gP表達(dá)可能是逆轉(zhuǎn)作用的機(jī)制之一。【關(guān)鍵詞】人參皂苷Rg3;食管癌;順鉑;P.糖蛋白Reversingcisplatin-resistantofEcal09/DDPc

3、elllinebyginsenosideRg3LIXue-fu,WANGYong-shi,LIUYah—wen,XUBing—zhong.LaboratoryofDigestiveTractTumorofHuaiyinAdvancedVocational&TechnicalSchoolofHealth.Huaian223300China【Abstract】ObjectiveToresearchtheroleandmechanismofginsenosideRg3onReversingcisplatin—resistantofEcal09/DDPce

4、lllinetoprovideanewmethodofesophagealcancer.MethodsByMTYandflowcytometrydetectcellproliferationafterGinsenosideRg3and/orcisplatin;ImmunohistochemistryandWesternblottingdetectthechangesofp-glycoprotein.ResultsGinsenosideRg3cansignificantlyreducetheIC50ofEcal09/DDPcells,andsigni

5、ficantincreaseinthenumberofthecellswerearrestedintheGIphase.ButginsenosideRg3combinedwithcisplatincansignificantlydecreasethep-glycoproteinexpressionoftumorafter48hours.ConclusionTheresistanceofEcal09/DDPcanbepartiallyreversedbythelowamountofcytotoxicagentsginsenosideRg3.Reduc

6、tionofp-glycoproteinexpressionmaybeoneofthemechanismsofthereversaleffect.【Keywords】GinsenosideRg3;Esophagealcancer;Cisplatin;p-glycoprotein以DDP為基礎(chǔ)的含鉑類化療方案仍是目前囊Rg3由注射用水溶解后過濾配制成10mg/mL晚期食管癌等癌癥患者主要治療方案[1-2],長期以的儲存液,4℃保存?zhèn)溆谩1Tr(美國Amresco來,腫瘤的耐藥性限制了化療效果。我們探討Rg30793),DMSO(溶解Formazan

7、結(jié)晶)為上海久億化對人食管癌耐DDP細(xì)胞Ecal09/DDP的耐藥性的學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品,細(xì)胞周期檢測試劑盒由中逆轉(zhuǎn)作用及對P.gP表達(dá)的影響,為提高食管癌化國南京凱基生物科技發(fā)展有限公司提供。療療效提供新方法。1.2方法1.2.1藥物敏感實(shí)驗(yàn)MTI"法.以1xl0個/mL1材料與方法細(xì)胞密度接種于96孔板(200ILL),細(xì)胞培養(yǎng)24h1.1材料后,加人適量藥物(先單獨(dú)Rg3敏感實(shí)驗(yàn),然后選人食管癌耐DDP細(xì)胞Ecal09/DDP細(xì)胞由南擇低毒劑量Rg3聯(lián)合DDP進(jìn)行逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)),作用京凱基生物公司提供(采用中等劑量間歇作用法72h后加15IxLM

8、TF(5g/L),37℃再孵育4h,結(jié)合低劑量持續(xù)作用法誘導(dǎo)獲得)。為保持其耐藥棄上清,每孔加入150IxLDMSO溶解.

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