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《瘤胃液中氨態(tài)氮的測定.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、T/NAIA0004—2020ICS65.02B40團體標準T/NAIA0004—2020瘤胃液中氨態(tài)氮濃度的測定堿性次氯酸鈉-苯酚分光光度法（征求意見稿）2020-XX-XX發(fā)布2020-XX-XX實施寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會發(fā)布T/NAIA0004—2020前言本標準的編寫格式符合GB/T1.1-2009《標準化工作導(dǎo)則第1部分標準的結(jié)構(gòu)和編寫》規(guī)定編寫。本標準由寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會提出并歸口。本標準由寧夏大學(xué)、寧夏飼料工程技術(shù)研究中心、寧夏獸藥飼料監(jiān)察所、寧夏昊標檢測服務(wù)研究院、寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會起草。本標準主要起草人：辛國省、劉輝、卜姣姣、燕翀
2、、楊儀、丁園、高巧仙、武曉宏、謝榮國、張小飛、王京、佐婷婷。本標準于2020年XX月XX日首次發(fā)布。T/NAIA0004—2020瘤胃液中氨態(tài)氮濃度的測定堿性次氯酸鈉-苯酚分光光度法1范圍本標準規(guī)定了瘤胃液中氨態(tài)氮濃度的堿性次氯酸鈉-苯酚分光光度測定方法。本標準適用于反芻動物瘤胃液中氨態(tài)氮濃度的測定。本方法定量限：0.1mg/100mL。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過在本標準中的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的
3、最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T601化學(xué)試劑標準滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標準溶液的制備3原理在催化劑亞硝酸鐵氰化鈉存在下，氨與堿性次氯酸鈉和酚反應(yīng)生成藍色吲哚酚。4試劑與材料除另有說明外，所用試劑均為優(yōu)級純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水4.1甲醇（分析純）。4.2鹽酸（分析純）。4.3亞硝基鐵氰化鈉。4.4苯酚。4.5苯酚顯色劑：稱取0.05g亞硝基鐵氰化鈉（4.3），用500mL蒸餾水溶解；加入10g苯酚（4.4），混合，溶解；用蒸餾水定容到1
4、L，裝入棕色試劑瓶，在2-10℃保存。在避光條件下可保存6個月。4.6氫氧化鈉。4.7磷酸氫二鈉。4.8次氯酸鈉。T/NAIA0004—20204.9堿性次氯酸鈉試劑：稱取5g氫氧化鈉（4.6），用650mL左右的蒸餾水溶解；加入37.85g磷酸氫二鈉（4.7），加熱溶解；冷卻后，加入50mL次氯酸鈉（4.8），混合，用蒸餾水定容到1L。用濾紙過濾，在2-10℃聚乙烯瓶中避光保存?？煞€(wěn)定6個月。4.10氯化銨（優(yōu)級純）。4.11氨態(tài)氮標準溶液（32mg/100mL）：稱取0.1005g氯化銨（4.10），用80mL蒸餾水溶解。用2N的鹽酸將pH值調(diào)整
5、到2。用蒸餾水定容到100mL。此溶液32mg/100mL。測定前配制成1、2、4、8、16和32mg/100mL的標準溶液。5儀器和設(shè)備5.1分析天平：感量0.0001g。5.2旋渦混合儀。5.3紫外分光光度計。5.4pH計。5.5玻璃試管。5.6容量瓶：50mL、100mL、1000mL。5.7刻度吸管：5mL、10mL、20mL。5.8燒杯：500mL。6瘤胃液的采集、處理與保存瘤胃液的采集在晨飼前進行，方法一般有兩種，一種是通過瘤胃瘺管進行采集，另一種是采用特定的胃管通過食道插入瘤胃進行采集。采集的瘤胃內(nèi)容物，用60目尼龍袋過濾，取濾液5mL
6、，加入預(yù)先加有5mL用冰水預(yù)冷的甲醇，迅速混勻，置于-20℃冰柜中保存。7測定步驟7.1試樣制備：將瘤胃液充分混勻，準確吸取1mL瘤胃液，加入1.5mL的離心管中，4℃下12000r/min離心15min，取上清液備用。7.2平行試驗：對同一試樣進行平行試驗測定。7.3空白試驗：隨同試樣進行空白試驗。除不量取樣品外，均按瘤胃液樣品步驟進行。7.4測定與顯色：吸取備用液（7.1）80ul加入到玻璃試管中，加入2.5mL苯酚顯色劑，混勻；加入2.0mL堿性次氯酸鈉溶液，混勻。在37℃下水浴10min，取出后室溫下放置10min。于紫外分光光度計波長650
7、nm處，以試劑空白為參比，測量其吸光度。7.5標準曲線的繪制T/NAIA0004—2020準確移取氨態(tài)氮標準溶液1、2、4、8、16和32mg/100mL各40ul，加入到預(yù)先標好的玻璃試管中，各管補加40ul甲醇(4.2)，混勻；加入2.5mL苯酚顯色劑，混勻；加入2.0mL堿性次氯酸鈉溶液，混勻。在37℃下水浴10min,取出后室溫下放置10min。于紫外分光光度計波長650nm處，以試劑空白為參比，測量其吸光度。以氨態(tài)氮濃度(mg/100mL)為橫坐標，相應(yīng)吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線，建立線性擬合回歸方程。8分析結(jié)果的計算按式(1)計算試樣
8、中的氨態(tài)氮濃度，其數(shù)值用mg/100mL表示。C(mg/100mL)=（C1-C0）............
