紅細胞懸液制備.doc

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1、首先全血離心1000rpm10min,（離心后加生理鹽水，混勻，去掉上清液后再離心，可重復這個步驟，直至離心后上清液透亮）制備壓積紅細胞，然后取一滴壓積紅細胞和九滴生理鹽水混勻，這是為10%的紅細胞懸液，取此懸液5滴，加生理鹽水5滴，混勻，應該就是5%的紅細胞懸液。制備紅細胞懸液的程序一般是用生理鹽水洗滌紅細胞，除去其表面的附著物，然后配成所需要的濃度。洗滌紅細胞的具體方法是：先將抗凝血以2000r／min離心5min，吸去血漿層。在管中加2～3倍的生理鹽水用毛細滴管輕輕地反復吹吸混勻，再以2000r

2、／min離心5min，棄上清液，如此反復三次。最后一次可適當延長離心時間至10min。這樣壓積后的紅細胞，上清液透明無色。棄上清液后，用壓積紅細胞配成實驗要求所需的濃度備用。紅細胞洗滌次數(shù)不宜太多，以三次為宜，否則紅細胞脆性增加，影響試驗結(jié)果。若是用于制備溶血素的紅細胞，應無菌操作。取血后離心，棄上層血清，加入生理鹽水洗2－3遍，離心，棄上清，取0.2ml紅細胞稀釋至10ml就可以了，原則上是低溫操作（2－8度），但是離心的時間很短，我們一般常溫離心，好像問題也不大。