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《產(chǎn)膽固醇氧化酶菌株的篩選與鑒定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)2011，39(4)：127～129GuizhouAgriculturalSciences[文章編號]1001—3601(2011)04一0244-0127一03產(chǎn)膽固醇氧化酶菌株的篩選與鑒定劉文全1，王字1’¨，趙牧1，李勇1，任一兵1，程君1，馮濤1，鄭曉芳1，杜佳1，王莉莉1，張雪勤1(1．攀枝花學(xué)院，四川攀枝花617000；2．重慶大學(xué)生物工程學(xué)院，重慶400044)[摘要]為獲得產(chǎn)膽固醇氧化酶菌株，采用微生物純化技術(shù)從動物新鮮糞便中進(jìn)行分離，并對分離菌株的活性進(jìn)行了測定，對活性較高的菌株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。結(jié)果表明
2、：共篩選到產(chǎn)膽固醇氧化酶菌株36株；經(jīng)酶活測定，篩選出4株對膽固醇降解活性較高的菌株；經(jīng)16SrDNA基因序列分析，這4株細(xì)菌分別為無色桿菌、Lysinibacillus、假單胞菌和芽孢桿菌。[關(guān)鍵詞]膽固醇氧化酶；篩選；鑒定[中圖分類號]Q291[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]AlsoIationandIdentificatiOnOfBacteriaIStrainsProducingChoIesteroIOxidaseLIUWen—quanl，WANGYul’2’，ZHA0Mul，LIYon91，RENYi．bin91，CHENGJunl，F(xiàn)ENGTa01，Z
3、HENGXiao．fan91，DUJial，WANGLi—lil，ZHANGXue-qinl(1．。P口一：脅矗l^4Lfhf'，Pr酊fy，Pn辟z矗fJlHn，SlcJIH口萬617000；2．Cbflegeo，BioP開gfn口口rlng，chongqfngU辟“詐，sify，l[：勛ngqi萬g400044，C瓤n口)Abstract：Toobtainbacterialstrainsproducingcholesteroloxidase，bacterialstrainswereisolatedfromanimalintestinesby
4、microbialpurificationtechnology．Theenzymeactivityofthesebacterialstrainswastestedandmolecularbiologycharacterofthesebacterialstrainswithhigherenzymeactivitywasidentifiedbymolecularbiology．Resultsshowedthat36bacterialstrainsproducingcholesteroloxidasewereisolated．Byenzymeacti
5、vityassay，fourstrainswithhighdegradingefficienciestocholesterolwerescreenedout，whichwereAf矗，‘D優(yōu)D6口f￡P(guān)r，Lvsi，zi6口fiZZ“s，尸sP“d07”o以口sandB口ffZZ“5．Theresultsmaylaythefoundationforfurtherapp“cationofbacterialstrainsproducingcholesteroloxidaseinfeedindustry．Keywords：cholesteroloxi
6、dase；isolation；identification膽固醇是一種甾體化合物，是所有動物細(xì)胞膜的重要組成成分，對維持動物體內(nèi)正常的生理生化代謝具有重要的意義。但是，隨著人們生活水平的提高，過多地從動物性來源的食物中吸取膽固醇，造成血清膽固醇含量超標(biāo)。過高的血清膽固醇將引發(fā)高脂血癥、動脈硬化、冠心病等一系列心血管疾病，已成為導(dǎo)致人類死亡的主要疾病之一【l咭]。目前，主要有5種方法來調(diào)節(jié)人體血清膽固醇含量，其中，利用生物轉(zhuǎn)化法處理食品被認(rèn)為是一種極為有效的方法。生物轉(zhuǎn)化法是指用微生物或微生物酶分解食品中的膽固醇，該方法不會干擾人體正常代謝、不影
7、響食品風(fēng)味，對低膽固醇食品的開發(fā)具有重要意義[4]。膽固醇氧化酶能夠?qū)⒛懝檀佳趸癁槟戠抟?一烯一3一酮，降低食品中的膽固醇含量，具有潛在的工業(yè)應(yīng)用價值[5_6]。因此，分離產(chǎn)膽固醇氧化酶活性較高的菌株應(yīng)用于飼料和食品工業(yè)方面具有重要意義。對此，筆者采用微生物純化技術(shù)從動物新鮮糞便中進(jìn)行了菌株分離，測定了分離菌株的活性，且對活性較高的菌株進(jìn)行了分子生物學(xué)鑒定，以期為產(chǎn)膽固醇氧化酶活性較高菌株在飼料和食品工業(yè)上的應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)。l材料與方法1．1材料1．1．1新鮮糞便樣品從攀枝花動物園采集動物的新鮮糞便，共7份，并標(biāo)記編號，當(dāng)天進(jìn)行分離。1．1．
8、2試劑生化試劑、引物和T口gDNA聚合酶，均購于上海生工及北京天根公司。1．1．3培養(yǎng)基1)液體富集培養(yǎng)基。膽固醇19／L，NH。NO。19／L，KH
