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《黃牛肝菌凝集素的分離純化及部分性質(zhì)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、2015年3月四川大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)Mar．2015第52卷第2期JournalofSichuanUniversity(NaturalScienceEdition)Vo1．52No．2doi：103969／j．issn．0490—6756．2015．02．034黃牛肝菌凝集素的分離純化及部分性質(zhì)鮑小敏，盧幫敏，鮑錦庫(四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，成都610064)摘要：黃牛肝茵(Boletusfulvus)經(jīng)生理鹽水浸提、CM—Sepharose、DEAE—Sepharose及Sephacry1S一100分子篩層析后得到黃牛肝菌凝集素(BFL)．經(jīng)SDS—PAGE電泳及SephacrylS一1
2、00分子篩層析檢測表明，所得的BFL是由兩個分子量約15．8kDa、非二硫鍵相連的亞基組成的表觀分子量為32kDa的二聚體．BFL可快速凝集兔血紅細胞，其最低凝集濃度為3．9g／mL；糖抑制試驗表明，胃粘蛋白、甲狀腺球蛋白、卵粘蛋白和卵清蛋白均可抑制BFL活性．當溫度在70℃以下和pH值在6．O～9．8之間時，BFL凝血活性基本不變。然而當溫度至9O℃以上和在極端pH值下，BFL凝血活性減弱甚至完全喪失．不同濃度的脲和鹽酸胍對BFL凝血活性的影響表明：隨著變性劑濃度的增加，BFL的結(jié)構(gòu)逐漸被破壞．關(guān)鍵詞：黃牛肝菌凝集素；分離純化；凝血活性中圖分類號：$646．3文獻標識碼：A文章編號：049
3、0—6756(2015)02—0409—07PurificationandcharacterizationoflectinfromBoletusfulvusBAOXiao—Min，LUBang—Min，BAOJin—Ku(CollegeofLifeSciences，SichuanUniversity，Chengdu610064，China)Abstract：Boletusfulvuslectin(BFL)wasisolatedfromBoletusfulvus，byextraction，ion—exchangechromatographyonCM—SepharoseandDEAE—Sepha
4、rosefollowedbygelfiltrationonSephacrylS一100．BFLisahomodimerwithapparentmolecularmassof32kDaandcomposedoftwo15．8kDasubunitsthatareheldtogetherbynoncovalentinteractions．BFLcouldagglutinaterabbiterythrocyte，anditex—hibitedstronghemagglutinationactivitytorabbiterythrocytesattheconcentration3．9~tg／mL．Th
5、ere—suitofcarbohydrateinhibitionassayshowedthatthegastricmucin，thyroglobulin，ovomucoidandovalbumincouldinhibittheagglutinatingactivityofBFL．ThehemagglutinationactivityofBFLwassta—bleunder70~CandinapHrangeof6．0——9．8，whileitwasweakwhentemperaturewashigherthan9O℃andinextremepHrange．Effectsofdifferentc
6、oncentrationsofureaandGuHC1onthehemaggluti—nationactivityofBFLindicatedtheincreaseofdenaturantconcentrationcoulddestroythestructureofBFLgradually．Keywords：Boletusfulvuslectin；Purification；Hemagglutinationactivity結(jié)合專一性的蛋白質(zhì)或糖蛋白，其普遍存在于自引然界動植物和微生物中[．凝集素具有廣泛的生物凝集素(Lectin)是一類非酶、非免疫來源的糖學(xué)功能——“與多種生理過程諸如細胞間的
7、粘著，收稿日期2013—11—25基金項目國家自然科學(xué)基金(81173093，30970643，J1103518)作者簡介鮑小敏(1989一)，男，碩士研究生，研究方向為醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)．E—mail：zhjbxm@163．corn通訊作者鮑錦庫．E—mail：baojinku@SCU．edu．cn41O四11I大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)fit)第52卷受體介導(dǎo)的胞飲、細菌感染宿主、宿主巨噬細胞清mL／min的流速上柱
