乙型肝炎表面抗體化學(xué)發(fā)光免疫分析法的建立-論文.pdf

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1、熱帶醫(yī)學(xué)雜志2014年5月第14卷第5期JTropMed,May2014,Vo1.14,No.5·615··碩博專欄論著·乙型肝炎表面抗體化學(xué)發(fā)光免疫分析法的建立張瓊。,余娟平,一,朱長(zhǎng)城,徐偉文(1.南方醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院,廣東廣州510515;2.中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司,廣東廣州510670)摘要:目的建立乙型肝炎表面抗體(HBsAb)化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)檢測(cè)試劑盒。方法采用兩株乙型肝炎表面抗原(HBsAg)分別包被磁微球和標(biāo)記吖啶酯(AE),建立雙抗原夾心化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試

2、劑盒,優(yōu)化反應(yīng)體系并對(duì)試劑盒的各項(xiàng)性能指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果HBsAb—CLIA檢測(cè)試劑的靈敏度為0.03mlU/ml,測(cè)量范圍為0.03—960mlU/ml;分析內(nèi)和分析問精密度分別為2.94%一5.14%和3.03%~6.33%;與乙型肝炎E抗體(HBeAb)、乙型肝炎核心抗體(HBcAb)等無交叉反應(yīng);673名正常人血清測(cè)試結(jié)果表明該檢測(cè)試劑的正常參考范圍為0~10mIU/ml:用本試劑與進(jìn)口雅培同類試劑同時(shí)檢測(cè)1411例臨床樣本,其相關(guān)方程為y=0.944x+4.056.相關(guān)系數(shù)為0.947

3、。結(jié)論已成功制備操作簡(jiǎn)單.成本低,各項(xiàng)性能指標(biāo)均能達(dá)到臨床檢測(cè)要求的HBsAb.CLIA試劑盒,可用于臨床血清樣本HBsAb濃度的測(cè)定。關(guān)鍵詞:乙型肝炎病毒:乙型肝炎表面抗體;化學(xué)發(fā)光免疫分析法中圖分類號(hào):R512.62文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1672.3619(2014)05.0615.04DevelopmentofdiagnosticreagentforhepatitisBsurfaceantibodyusingchemilumlnescence]mmunoassayZHANGQiong,Y

4、UJuan-ping。,ZHUChang—chen~,XUWei—weng(J.CollegeofBiotechnology,SouthernMedicalUniversity,Guangdong,Guangzhou510515;2.DaAnGeneCo.,Ltd.ofSunYat—senUniversity,Guangdong,Guangzhou510670,China)Abstract:ObjectiveToestablishHBsAb—CLIAkitfordetectionofHBsAb.

5、MethodsOneHBsantigenwasconjugatedtomagneticbeadsandanotherwaslabeledwithAE.AdoubleantigensandwichCLIAkitwasestablishedandevaluatedfortheperformanceindicators.ResultsTheassaydemonstratedalinearrangeof0.03-960mIU/ml,withananalyticalsensitivityat0.03mIU

6、/m1.Theintra.a(chǎn)ssayandinter-assaycoeficientofvariation(CV)were2.94%-5.14%and3.03%一6.33%,respectively.NocrossreactionofthereagentwithHBeAb,HBcAbetc.Normalserumsfrom673personsshowedthatthenormalrangeoftheassaywas0~10mIU/m1.Thecorrelationcoeficientofsimu

7、ltaneousdeterminationof1411clinicalsamplesusedselfmadeHBsAb-CLIAkitandAbbottHBsAb—CLIAkitwas0.947.ConclusionSimpleoperationandlowcostselfmadeHBsAb-CLIAkithasbeensuccessfullyprepared.Theperformanceindexofthekitcanreachclinicaltestingrequirementsforthe

8、determinationoftheconcentrationofHBsAbclinicalserumsamples.Keywords:hepatitisBvirus;HepatitisBsui~aceantibody;chemiluminescenceimmunoassay乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)廣泛流行據(jù)中華肝病學(xué)會(huì)有關(guān)人類對(duì)HBV免疫力的判定標(biāo)于世界各國(guó).主要侵犯兒童及青壯年,已成為嚴(yán)重威準(zhǔn).HBsAb>IOmIU/ml為陽性。對(duì)人體具有保護(hù)作脅人類健康的世界

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