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《肺癌細(xì)胞促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞MAPK相關(guān)通路活化誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)的研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·3282·檢驗醫(yī)學(xué)與臨床2014年12月第11卷第23期LabMedClin，December2014，Vo1．12，No．23·論著·肺癌細(xì)胞促進(jìn)單核吞噬細(xì)胞MAPK相關(guān)通路活化誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)的研究婁鑒芳，史新惠，張淑平，柯星，曹艷，王鵬，黃蕾，黃珉琚，潘世揚，王芳(南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗學(xué)部，南京210029)【摘要】目的通過建立人單核吞噬細(xì)胞系(THP一1)和人肺腺癌細(xì)胞系(SPCA1)共培養(yǎng)體系，檢測共培養(yǎng)體系中THP—l的炎性細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平和絲裂原活化蛋白激酶通路(MAPK)的表達(dá)情況，初步闡明肺癌微環(huán)境對THP一1中炎性細(xì)胞因子表達(dá)的影響。方法體外
2、培養(yǎng)SPC—A1細(xì)胞系、THP一1細(xì)胞系，并建立二者共培養(yǎng)體系，設(shè)置THP一1單獨培養(yǎng)組為對照組。24h后，收集各組THP一1細(xì)胞，實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real—TimePCR)檢測白細(xì)胞介素(II)一10、一6、一8及腫瘤壞死因子一a(TNF—d)的mRNA表達(dá)水平；Westernblot檢測MAPK通路蛋白c—Jun氨基末端激酶及其磷酸化形式(JNK／p-JNK)、絲裂原活化蛋白激酶p38亞單位及其磷酸化形式(p38MAPK／p—p38MAPK)、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶及其磷酸化形式(ERK／p—ERK)的表達(dá)。結(jié)果共培養(yǎng)24h后，共培養(yǎng)組THP一1的IL一1B、IL-8mRNA
3、表達(dá)水平均明顯高于對照組(P<0．05)，分別為對照組的5．81、4．21倍；Westernblot結(jié)果顯示共培養(yǎng)組p38MAPK、p-p38MAPK的表達(dá)水平均明顯高于對照組(P<0．05)。結(jié)論肺癌細(xì)胞可引起肺癌環(huán)境中單核吞噬細(xì)胞中p38MAPK通路的活化，進(jìn)而誘導(dǎo)II一10、II一8mRNA表達(dá)上調(diào)，有利于腫瘤炎癥微環(huán)境的維持和促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展?！娟P(guān)鍵詞】人單核吞噬細(xì)胞系；共培養(yǎng)；人肺腺癌細(xì)胞系；細(xì)胞因子；MAPK通路DOI：10．3969／J．issn．1672-9455．2014．23．020文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：16729455(2014)23-3282—03Studyonu
4、pregulationofexpressionofinflammatorycytokinesinducedbyMAPKsignalingrelatedpathwayofmononu。clearphagocytespromotedbylungcancercellsLOUJian—fang，SHIXin—hui，ZHANGShu—ping，KEXing，CAOYan，WANGPeng，HUANGLei，HUANGPei—jun，PANShi—yang，WANGFang(DepartmentofLaboratoryMedicine，theFirstAffiliatedHospitalofNan
5、jingMedicalUniversity，Nanjing210029，China)[Abstract]ObjectiveToestablishtheco—culturesystemofmononuclearphagocytesystem(THP一1)andhu—manlungadenocarcinomacellline(SPC—A1)。detecttheexpressionofmRNAofinflammatorycytokinesintheTHP1cell1ineandMAPKpathwaysintheco—culturesystem．a(chǎn)ndpreliminaryindicatethe
6、effectoflungcancermicroenvi—ronmentontheexpressionofinflammatorycytokinesinTHP一1cellline．MethodsTheSPC—A1andTHP一1celllineswereculturedinvitro，andtheco—culturesystemwasestablished．ThesingleculturedTHP一1celllinewassettedascontrolgroup．24hafterculturing。THP一1cellswerecollectedandreal—timePCRwasusedt
7、odetectinterleukin(II)1G，IL6andII8，andtheexpressionoftumornecrosisfactor(TNF)mRNA．ThewesternblotanalysiswasusedtodetecttheexpressionofJNK／p，JNK，p38MAPK／p，p38MAPK，ERK／pandERK．Results24hafterco—cultu—ring，theexpressionle
