谷氨酸棒桿菌發(fā)酵生產(chǎn)1,5-戊二胺的代謝流分析.pdf

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1、第30卷第1期天津科技大學學報V_0l_30No.12015年2月JournalofTianjinUniversityofScience&TechnologyFeb.2015DOI:10.13364~.issn.1672—6510.20140012谷氨酸棒桿菌發(fā)酵生產(chǎn)1,5一戊二胺的代謝流分析黎明,唐奇,李東霞,隨樹珍,路福平(工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點實驗室,天津市工業(yè)微生物重點實驗室,天津科技大學生物工程學院,天津300457)摘要:為了提高糖類的利用效率,加強糖類代謝向生成尸胺的方向流動,提高尸胺產(chǎn)量,對

2、谷氨酸棒桿菌合成尸胺的代謝網(wǎng)絡進行分析,找出影響尸胺合成的代謝流量分配規(guī)律和關鍵節(jié)點,并通過改變?nèi)苎跫疤砑虞o酶NADPH對關鍵節(jié)點進行驗證.結(jié)果表明:6酸葡萄糖和丙酮酸是影響碳源流向尸胺合成的關鍵節(jié)點,增強磷酸戊糖途徑(HMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)可以弱化由6酸葡萄糖生成6__磷酸果糖和由丙酮酸生成乳酸,促進碳源向合成尸胺的方向流動,從而有效地提高尸胺產(chǎn)量(產(chǎn)量增幅為77.8%).該研究為高產(chǎn)尸胺的谷氨酸棒桿菌工程菌種改造以及發(fā)酵控制提供了理論基礎.關鍵詞:代謝途徑;尸胺;谷氨酸棒桿菌;NADPH;糖類中圖

3、分類號:Q935文獻標志碼:A文章編號:1672—6510(2015)01.0009.05MetabolicFluxAnalysisoftheFermentationof1,5-diaminopentaneinCorynebacteriumglutamicumLIMing,TANGQi,LIDongxia,SUIShuzhen,LUFuping(KeyLaboratoryofIndustrialFermentationMicrobiology,MinistryofEducation,TianjinKeyLab

4、oratoryofIndustrialMicrobiology,CollegeofBiotechnology,TianjinUniversityofScience&Technology,Tianjin300457,China)Abstract:Toimprovetheyieldofcadaverineandtheeficiencyofcarbohydrateutilization,weanalysedthemetabolicnet-workofthefermentationofcadaverineinCory

5、nebacteriumglutamicumandfoundthekeynodeswhichinfuencedthepro—ductionofcadaverine.KeynodeswereverifiedbyimprovingthedissolvedoxygenandaddingcoenzymeNADPH.There—suitsshowedthatthekeynodesareglucose·6一phosphateandpyruvate.ByenhancingtheHMPpathwayandtricarboxyl

6、icacidcycle,theprocessesofchangingglucose-6-phosphateintofructose一6一phosphateandpyruvicacidintolacticacidwereweakened,resuRinginthecarbonsourcefluidingtothesynthesisofcadaverine,whichcouldeficientlyimprovetheyieldofcadaverine(increased77.8%).Thestudyprovide

7、datheoreticalbasisforthetransformationofhigh—producingcadaverineCorynebacteriumglutamicumandfermentationcontro1.Keywords:metabolicpathway;cadaverine;Corynebacteriumglutamicum;NADPH;carbohydrate1,5一戊二胺,又稱尸胺、1,5一二氨基戊烷、五亞代謝流分析(metabolicfluxanalysis)是在物料質(zhì)甲基二胺或尸

8、毒素,是生物胺類(包括腐胺、精胺、亞量守恒基礎上對實驗數(shù)據(jù)進行化學計量學分析的一精胺和尸胺等)中的一種?.1885年,德國柏林的醫(yī)種代謝網(wǎng)絡分析方法,運用代謝流分析可獲得大量的師LudwigBrieger在腐敗的尸體中首次發(fā)現(xiàn)該胺類,細胞內(nèi)部代謝信息,已成功運用于多種氨基酸生物合該胺類以此得名尸胺【2】.尸胺是一種重要的平臺化合成代謝分析的研究中【9】.物【3】.已有技術可以將尸胺精煉后與己二酸共聚

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