神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)鑒定及誘導(dǎo)分化的表型特征.pdf

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1、中國(guó)組織工程研究第79卷笫19期2015—05—07出版ChineseJournalofTissueEng~eenngResearchMay2015VoL19,No.19WWW.CRTER.org神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)鑒定及誘導(dǎo)分化的表型特征劉吉星,侯博儒,楊文楨,馬浚寧,嚴(yán)貴忠,陳四化,尹立山,王剛,任海軍(蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科,甘肅省蘭州市730030)文章亮點(diǎn):1以神經(jīng)球?yàn)榛居^察單位,進(jìn)行了神經(jīng)干細(xì)胞的鑒定,重點(diǎn)觀察了誘導(dǎo)分化不同時(shí)間段神經(jīng)球的形態(tài)學(xué)變劉吉星,男,1990年生,化。湖北省荊門市人,漢族,2在神經(jīng)干細(xì)胞鑒定及分化表型確認(rèn)的過(guò)程中采取多重免疫熒光復(fù)合染色增加了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

2、的準(zhǔn)確性。蘭州大學(xué)在讀碩士,主要從事神經(jīng)干細(xì)胞治療顱腦3實(shí)驗(yàn)成功地從新生鼠海馬、嗅球中提取出神經(jīng)干細(xì)胞,連續(xù)培養(yǎng)得到了穩(wěn)定懸浮的神經(jīng)球,通過(guò)破壞其懸外傷基礎(chǔ)方面的研究。浮特性、不換液誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞。關(guān)鍵詞:通訊作者:任海軍,教授,于細(xì)胞:神經(jīng)于細(xì)胞;神經(jīng)元:星形狡質(zhì)細(xì)跑:神經(jīng)球}巢蛋a:8一微管蛋白lI:鉸質(zhì)紓維酸性蛋a:分化碩士生導(dǎo)師,主任醫(yī)師,表墊蘭州大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科,甘肅省蘭州市主題詞:730030神經(jīng)干細(xì)胞:幸孛經(jīng)元:微管蛋白基金資助:中圖分類號(hào):R3942甘肅電信萃英科研基金資助項(xiàng)g(Izudxcy-2014-81文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):2095-

3、4344(2015)19.03054-07摘要稿件接受:2015-04-18背景:神經(jīng)干細(xì)胞促進(jìn)受損中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能再修復(fù)具有廣闊的應(yīng)用前景,而進(jìn)行神經(jīng)干細(xì)胞體外培http:/WWW.crter.org養(yǎng)鑒定及誘導(dǎo)分化表型的研究是實(shí)現(xiàn)這一應(yīng)用的基礎(chǔ)。目的:觀察神經(jīng)干細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下的生物學(xué)特性和分化表型特點(diǎn)。方法:從新生小鼠海馬、嗅球提取神經(jīng)干細(xì)胞。選取3代后穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞采用BrdU進(jìn)行標(biāo)記,并進(jìn)行BrdU+巢蛋白+Hochest33258免疫熒光復(fù)合染色對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行鑒定。體外誘導(dǎo)促使神經(jīng)干細(xì)胞貼壁分化,對(duì)分化產(chǎn)生的子代細(xì)胞進(jìn)行BrdU、B一微管蛋白IⅡ、膠質(zhì)纖維酸性蛋

4、白、Hochest33258復(fù)合免疫熒光染色確定分化表型。結(jié)果與結(jié)論:來(lái)源于新生鼠海馬及嗅球的細(xì)胞連續(xù)傳代培養(yǎng)后可形成穩(wěn)定懸浮的類球狀細(xì)胞團(tuán),且BrdU+巢蛋白免疫熒光雙染陽(yáng)性。神經(jīng)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)貼壁分化后可產(chǎn)生B微管蛋白Ⅲ、膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽(yáng)性的子代細(xì)胞。以上結(jié)果表明體外培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞具有很強(qiáng)的自我增殖更新的能力,在培養(yǎng)過(guò)程中趨向于形成穩(wěn)定的神經(jīng)球,經(jīng)體外誘導(dǎo)通過(guò)不對(duì)稱細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞等細(xì)胞表型。文lj吉星.侯蹲儒.楊文楨.馬浚寧.嚴(yán)貴愨.陳西純。尹立山.王.任海軍辛孛經(jīng)于緬泡體釙培養(yǎng)鑒定及誘導(dǎo)分化的表銎特匝【J】.中國(guó)組織I程研究.2015。19(19):30

5、54-3060.doi:l0.3969~.issn.2095-4344.2015.19.018Neuralstemcells:/nv/troculture,identificationanddiferentiatedphenotypeLiuJi-xing,HouBo—ru,YangWen-zhen,MaJun—ning,YanGui-zhong,ChenSi—hua,YinLi—shan,WangGang,RenHai-jun(DepartmentofNeurosurgery,theSecondHospitalofLanzhouUniversityLanzhou730030,GansuP

6、rovince,China)AbstractBACKGROUND:NeuralstemcellscanrepairthedamagedcentraInervoussystemstructureandfunction.whichLiuJi-xing,Studyingforhavebroadapplicationprospects.Itcanberealizedbystudiesoninvitroculture.identificationanddifferentiationmaster’sdegree,Departmentofphenotypeofneuralstemcalls.Neuro

7、surgery,theSecondOBJECTI、,E:TOobservethebiologicalcharacteristicsanddiferentiatedphenotypesofneuralstemcellsunderHospitalofLanzhouUniversity,induction/nv/tro.Lanzhou730030,GansuProvince.ChinaMETHODS:NeuraIstemcallswere

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