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《小分子干擾RNA對肝癌細胞株MHCC-97H增殖和凋亡及Survivin表達的影響.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中華實用兒科臨床雜志2015年5月第3O卷第9期ChinJApplClinPediatr，May2015，Vo1．30，No．9·707··實驗研究·小分子干擾RNA對肝癌細胞株MHCC一97H增殖和凋亡及Survivin表達的影響張朝霞劉子勤陳燕飛玄立田王天有【摘要】目的探討小分子干擾RNA(siRNA)對人肝癌細胞株MHCC·97HSurvivin基因表達及其增殖和凋亡的影響。方法設計、合成針對Survivin基因序列特異性siRNA，用脂質體包裹轉染人肝癌細胞株MHCC一97H，實驗分為3組：SurvivinsiRNA轉染組(Si—survivin組)，無關siRNA轉染組(NC組)和
2、無轉染組(正常對照組)。采用反轉錄一聚合酶鏈反應、Westernblot技術檢測SurvivinmRNA及蛋白表達；四甲基偶氮唑藍比色法檢測細胞增殖情況；分別以終濃度為12．5、25．0、50．0nmol／L的siRNA作用于細胞后24h，采用流式細胞儀AnnexinV／PI雙染法檢測細胞凋亡。結果轉染后48h，Si—survivin組、NC組、正常對照組SurvivinmRNA表達水平分別為0．554-0．16、0．854-0．28、0．934-0．40，組間比較差異有統(tǒng)計學意義(F=414，P<0．01)；Si—survivin組最低，與NC組、正常對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(t=一2
3、0．56、一28．37，P均<0．001)。siRNA轉染48h后，Si—survivin組、NC組、正常對照組Survivin蛋白相對表達量分別為0．6024-0．005、0．8354-0．007、0．993±0．003，組間比較差異有統(tǒng)計學意義(F=238，P<0．01)；Si—survivin組最低，與NC組、正常對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(t=一40．17、一66．03，P均<0．001)。轉染后72h和96h，Si—survivin組細胞抑制率[(19．5±3．6)％、(12．04-0．9)％]顯著高于NC組[(3．64-0．9)％、(一1．34-6．1)％]，差異均有統(tǒng)計學意義
4、(t=36．18、42．53，P均<0．05)。不同濃度siRNA作用于細胞后24h，12．5、25．0、50．0nmol／LsiRNA組、NC組和正常對照組細胞凋亡率[分別為(22．644-2．54)％、(35．374-3．28)％、(53．284-4．35)％、(8．774-1．25)％、(9．724-1．37)％]比較，組間差異有統(tǒng)計學意義(F=35．93，P<0．01)，不同濃度siRNA間細胞凋亡率兩兩比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=一29．73、一38．57，P均<0．001)。結論Survivin特異性siRNA能抑制人肝癌細胞株MHCC．97HSurvivin基因表達，抑制細胞增
5、殖，促進細胞凋亡。【關鍵詞】肝癌；Survivin；小分子干擾RNAEfectsofsmallinterferingRNAonSurvivinexpression．proljferationandapoptosisofhepatoceHularcarcino-maceBlineMHCC一97HZhangZhaoxia，LiuZiqin，ChenYanfei，XuanLhian，WangTianyou．GraduateSchoolofPekingUnionMedicalCollege，Ben100020，GinaCorrespondingauthor：WangTianyou，Email：wan
6、gtianyou@bch．COllZ．cnfAbstract]0bjectiveToobservetheeffectofsmallinterferingRNA(siRNA)targetingSurvivingeneonsur-vivinexpression．proliferationandapoptosisofhepatocellularcarcinomacellllneMHCC一97H．MethodsSurvivinse—quencespecificsiRNAwasdesignedandsynthesized．siRNA／liposomecomplexwastransfectedintoh
7、epatocellularear—cinomacelllineMHCC一97H．TheMHCC一97HcellsweredividedintoSurvlvinsiRNAgroup(Si—survivin)．nega—tivecontrolsiRNAgroup(NCgroup)andblankgroup(normalcontrolgroup)．SurvivinmRNAandproteinexpressionsw
