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《靶向干擾CXCR7基因表達(dá)對(duì)肝癌（HCC）細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、復(fù)里孝報(bào)‘醫(yī)學(xué)版FudanUUnniivvJMedSci2。u14斗～I(xiàn)VIar．·，’4斗1(2二)161靶向干擾CXCR7基因表達(dá)對(duì)肝癌(HCC)細(xì)胞增殖及凋亡的影響林靈韓梅梅王芳申華莉余紅秀。楊芄原1,2(’復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院上海200032；。復(fù)旦大學(xué)化學(xué)系，生命科學(xué)學(xué)院上海200433)【摘要】目的探討CXCR7基因在不同肝癌細(xì)胞系及肝癌組織中的表達(dá)情況，并研究靶向抑制CXCR7基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響方法應(yīng)用Westernblot檢測(cè)不同肝癌細(xì)胞系及1O例肝癌組織中CXCR7蛋白的表達(dá)水平。采用短發(fā)夾狀RNA(shorthai
2、rpinRNA，shRNA)干擾技術(shù)沉默HCCLM3與MHCC97L細(xì)胞中CXCR7基因的表達(dá)，分別采用WesternBlot和qRT—PCR檢測(cè)shRNA的靶向沉默效果。通過(guò)CCK一8增殖實(shí)驗(yàn)與AnnexinV-FITC／PI細(xì)胞雙染色研究CXCR7抑制對(duì)HCCLM3與MHCC97L增殖及凋亡的影響。結(jié)果CXCR7表達(dá)水平與肝癌細(xì)胞的惡性程度呈正相關(guān)，肝癌組織中CXCR7表達(dá)水平較癌旁顯著升高。實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了9個(gè)慢病毒表達(dá)載體，其中CXCR7shRNA-566序列干擾效率最高。增殖實(shí)驗(yàn)顯示干擾表達(dá)組細(xì)胞生長(zhǎng)速度受到明顯抑制(P<0．05)；流式細(xì)胞儀
3、分析顯示干擾CXCR7表達(dá)可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。結(jié)論CXCR7表達(dá)水平與肝癌惡性程度呈正相關(guān)，靶向干擾CXCR7表達(dá)可抑制細(xì)胞的增殖能力，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡?！娟P(guān)鍵詞】肝細(xì)胞肝癌(HCC)；CXCR7基因；短發(fā)夾狀RNA(shRNA)；增殖能力；細(xì)胞凋亡【中圖分類(lèi)號(hào)】R735．7【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】Adoi：10．3969／j．issn．1672—8467．2014．02．004EffectsofinhibitingCXCR7geneexpressiononbiologicalcharacteristicsofhumanhepatocellularcarcin
4、oma(HCC)celllinesLINLing，HANMei～mei’，WANGFang，SHENHua—li，YUHong—xium△，YANGPeng—yuan，(InstitutesofBiomedicalSciences，F(xiàn)udanUniversity，Shanghai200032，China；DepartmentsofChemistry，SchoolofLifeSciences，F(xiàn)udanUniversity，Shanghai200433，China)[Abstract]ObjectiveToexploretheexpressionofch
5、emokinereceptorCXCR7onhumanhepatocellularcarcinoma(HCC)celIlinesandtumorsamples，andtheeffectsofCXC：R7oncellproliferationandapoptosisofHCCcelllines．MethodsWesternblotanalysiswasappliedtodetectCXCR7proteinexpressioninHCCcelllinesand10pairsofHCCspecimenswithadjacenttissues．RNAinter
6、ferencemethodofshorthairpinRNA(shRNA)wasusedtosilenceCXCR7expressioninHCCLM3andMHCC97Lcells．TheexpressionsofCXCR7mRNAandproteinweredeterminedbyqRT—PCRandWesternblot，respectively．TheeffectsofCXCR7down-regulationoncellproliferationandapoptosisweremeasuredbyCCK一8assayandAnnexinv_FI
7、TC／PIapoptosisdetection．ResultsTheCXCR7expressionwasgraduallyenhancedwithincreasingmetastaticpotentialofHCCcelllines，衛(wèi)生部“艾滋病和病毒性肝炎等重大傳染病防治”重大專項(xiàng)(2012ZX]0002012-006)；上海市衛(wèi)生局基金(2009002)△CorrespondingauthorE—mail：hongxiuyu@fudan．edu．cn162復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)2014年3月，41(2)andcomparedtoadjacenttis
8、suesofclinicalspecimens，CCR7expressionwashugely
