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《慢性復(fù)合應(yīng)激致老年小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷及機(jī)制研究.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·1466’安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2013Dec；48(12)◇預(yù)防醫(yī)學(xué)研究◇慢性復(fù)合應(yīng)激致老年小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷及機(jī)制研究程娟，王濤濤，唐偉，姚余有摘要目的探討慢性復(fù)合應(yīng)激對老年小鼠學(xué)習(xí)記憶能力1材料與方法的影響及可能機(jī)制。方法以老年小鼠為研究對象，實(shí)驗(yàn)分成應(yīng)激組和對照組。采用Morris水迷宮試驗(yàn)觀察慢性應(yīng)激1．1材料對老年小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響；通過HE染色觀察海馬CA3區(qū)1．1．1實(shí)驗(yàn)動物清潔級，健康昆明種小鼠，雄性，神經(jīng)元病理組織形態(tài)；采用We
2、sternblot法檢測小鼠海馬1310月齡，60只，體質(zhì)量35～40g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)位淀粉樣前體蛋白裂解酶l(BACEI)和13淀粉樣蛋白1_42驗(yàn)動物中心提供。飼養(yǎng)至18月齡。飼養(yǎng)條件：小鼠(A13．)的表達(dá)量；運(yùn)用EL1SA法檢測血清皮質(zhì)酮(CORT)飼養(yǎng)遵循安徽醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)倫理委員會的要含量。結(jié)果與塒照組相比，實(shí)驗(yàn)組老年小鼠逃避潛伏期和求，室溫(22-4-1)oC，相對濕度50％，自由攝食飲水，游泳距離延長(P<0．01)；CA3區(qū)海馬神經(jīng)元數(shù)目明顯減少將老年小鼠隨機(jī)均分為應(yīng)激組和對照組。(
3、P<0．01)，排列疏松紊亂，脫失現(xiàn)象明顯，核固縮，濃染；海1．1．2主要試劑與儀器p—actin單克隆抗體、p位馬A13。和BACEI蛋白的表達(dá)量升高(P<0．01)；血清淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)單克隆抗體(美CORT濃度升高(P<0．01)。結(jié)論慢性應(yīng)激可導(dǎo)致老年小國，SantaCruz公司)；a[3。(北京博奧森公司)；鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降和海馬組織損傷，其機(jī)制可能與慢性應(yīng)Westernblot法化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(美國，Pierce激引起老年小鼠BACE1升高，促進(jìn)A13生成有關(guān)。關(guān)鍵詞慢
4、性應(yīng)激；海馬；B淀粉樣蛋白；皮質(zhì)酮；學(xué)習(xí)記憶公司)；電泳儀(北京六一儀器廠)；Morris水迷宮圖中圖分類號R338．64像采集及分析系統(tǒng)(北京醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)；文獻(xiàn)標(biāo)志碼A文章編號1000—1492(2013)12—1466—04凝膠成像分析系統(tǒng)(深圳HEMA公司)。1．2方法應(yīng)激對大腦功能的影響是神經(jīng)科學(xué)研究的熱點(diǎn)1．2．1應(yīng)激方法慢性復(fù)合應(yīng)激方法：待小鼠生長問題，有研究¨證實(shí)，當(dāng)人或動物處于強(qiáng)烈的急性至l8月齡時，分別采用低溫暴露(4eC，10min／d)、應(yīng)激或長期慢性應(yīng)激的狀態(tài)時，其大腦功能
5、(如學(xué)束縛(3h／d)、40qC環(huán)境(10min／d)、振蕩[水平振習(xí)記憶等)可受到明顯損害。但有關(guān)慢性應(yīng)激影響蕩頻率(2Hz，10min／d)]、夾尾(5min／d)、冰水游大腦學(xué)習(xí)記憶功能的分子機(jī)制研究目前較少。以往泳(5rain／d)、45。傾斜籠子(12h／d)、浸泡籠子(12h／d)、社會接觸(由獨(dú)籠改為5～6只小鼠合籠)(24研究顯示，慢性應(yīng)激可明顯引起機(jī)體的糖皮質(zhì)激素(glucocorticoids，GCs)水平升高，且高濃度GCsh／d)、空籠(12h／d)、夜相給亮(12h／d)、禁食水(
6、24h／d)等12種方式。每天隨機(jī)采用1種方法對可增加體外培養(yǎng)的N2a成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞的B淀小鼠進(jìn)行應(yīng)激刺激，上述刺激持續(xù)8周。粉樣蛋白(amyloidbeta—protein，AB)水平?，F(xiàn)已1．2．2學(xué)習(xí)記憶能力測試Morris水迷宮直徑120公認(rèn)A[3能引起海馬神經(jīng)元損傷，慢性應(yīng)激對小鼠Cln，高30em，圓形水池，內(nèi)壁被漆成黑色，水深2O學(xué)習(xí)記憶功能的影響是否與慢性應(yīng)激促進(jìn)海馬組織elTI，水溫(25±1)oC，分為4個象限，在Ⅳ象限正中113生成有關(guān)，尚不清楚。因此，該研究擬用老年小距離池壁30e
7、m處放一直徑8em的黑色平臺，平臺鼠，探討慢性應(yīng)激對老年小鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響及低于水面1cm。大鼠運(yùn)動軌跡由迷宮上方連接于可能機(jī)制。顯示系統(tǒng)的攝像機(jī)采集。實(shí)驗(yàn)時，水溫保持在20～2013—06—20接收22℃。定位航行實(shí)驗(yàn)動物接受7d訓(xùn)練前，已經(jīng)適基金項(xiàng)目：安徽省自然科學(xué)基金(編號：1208085MH145)；安徽高校應(yīng)記錄環(huán)境。每組隨機(jī)選l0只小鼠做此實(shí)驗(yàn)歷時省級自然科學(xué)研究項(xiàng)目(編號：KJ2011z161)7d，每天隨機(jī)選擇1個象限，大鼠面向池壁放入水作者單位：安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，合肥230032
8、中，觀察大鼠登上平臺所需時間(逃避潛伏期)，60S作者簡介：程娟，女，碩士研究生；姚余有，男，副教授，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E—mail：yaoan-內(nèi)找到平臺允許其在平臺上休息1Os，如果60S未qi7l@yahoo．C01~1．cn找到平臺，緩慢引導(dǎo)至平臺并允許其在臺上休息10·1468·安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2013Dec；48(12)2．3慢性復(fù)
