牦牛肝臟蛋白對人肝癌HepG2細胞增殖及凋亡的影響.pdf

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1、中國生物制品學(xué)雜志2013年12月第26卷第12期ChinJBiologicalsDecember2013.Vo1.26N0.12·l789·治療性:制齊IJ牦牛肝臟蛋白對人肝癌HepG2細胞增殖及凋亡的影響郭潔,柳青海,李天才-1.中國科學(xué)院西北高原生物研究所,青海西寧810008;2.中國科學(xué)院大學(xué),北京100049摘要:目的檢測牦牛肝蛋白BGP對人肝癌HepG2細胞增殖及凋亡的影響,并探討其體外抗癌活性。方法用不同濃度的BGP分別作用于人肝癌HepG2細胞,作為實驗組,同時設(shè)未處理細胞對照組和空白對照組,采用MTr法檢測BGP(25、50和100mg/L)作用HepG2

2、細胞12、24、36和48h對細胞增殖活性的影響,并于倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化;采用流式細胞儀檢測BGP(25、50、75、100mg/L)作用HepG2細胞24h,對細胞周期及凋亡的影響。結(jié)果不同濃度的BGP均可抑制HepG2細胞增殖,與未處理細胞對照組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中100mg/LBGP作用48h,對HepG2細胞抑制率最高(94.99%)。各濃度BGP實驗組HepG2細胞形態(tài)發(fā)生明顯改變,細胞間隙加大,細胞間連接不牢固,胞內(nèi)顆粒增多,呈現(xiàn)生長受阻狀態(tài),甚至有細胞脫落,細胞數(shù)目減少,其中100mg/LBGP作用48h,凋亡細胞明顯增多。不

3、同濃度BGP作用HepG2細胞24h后,均可不同程度抑制HepG2細胞生長并誘導(dǎo)細胞凋亡;與未處理細胞對照組相比,s期細胞比例明顯升高(除25mg/LBGP實驗組),GO/G1期和G2/M期細胞比例明顯下降,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05o結(jié)論牦牛肝蛋白BGP可抑制HepG2細胞增殖,并促進凋亡,具有明顯的體外抗肝癌活性。關(guān)鍵詞:牦牛;肝臟蛋白;HepG2細胞;細胞增殖;細胞凋亡中圖分類號:R735.7R730.54文獻標(biāo)識碼:A文章編號:1004.5503(2013)12—1789—05Eflfect0fyakliverproteinonproliferationanda

4、poptosisofhumanhepatocarcinomaHepG2cellsGUOJie,LIUQing—hai,LITian—caiNorthwestInstituteofPlateauBiology,ChineseAcademyofScience,Xining810008,QinghaiProvince,ChinaCorrespondingauthor:LITiau—cai,E-mail:tcli@nwipb.co$.caAbstract:ObjectiveToinvestigatetheinvitroantitumoractivityofyak(Bosgrunnis

5、ens)liverproteinBGPaswellasitseffectonproliferationandapoptosisofhumanhepatocarcinomaHepG2cells.MethodsHepG2cellsweretreatedwithBGPatvariousconcentrations,usingthoseuntreatedasnegativecontro1.Blankcontrolwassetup.TheproliferativeactivitiesofHepG2cells12,24,36and48haftertreatmentwith25,50and

6、100mg/LBGPweredeterminedbyM1Tassay,whilethemorphologieswereobservedunderinvertedmicroscope.ThecellcycleandapoptosisofHepG2cells24haftertreatmentwith25,50,75and100mg/LBGPweredeterminedbyflowcytometry.ResultsTheproliferationsofHepG2cellstreatedwithBGPatvariousconcentrationswereinhibitedsignif

7、icantlyascomparedwiththoseuntreated(P<0.05)。ofwhichtheinhibitionratereachedthemaximum(94.99%)48haftertreatmentwith100mg/LBGP.ThemOF-phologiesofHepG2cellsinvarioustestgroupschangedsignificantly,expressedasincreasedspaceandloosejunctionbe—tweencells,increa

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