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1、福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)29(6)：546～549，2014FujianJournalofAgriculturalSciences文章編號(hào)：1008—0384(2014)06—546—04林江波，王偉英，鄒暉，等．中國(guó)水仙葉綠體ATP合成酶基因NtATPF的克隆與序列分析EJ]．福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，29(6)：546—549．LINJ-B，WANGW—Y，ZOUH，eta1．CloningandSequenceAnalysisofChloroplastATPSynthaseGeneNtATPFfromNarcissustazettavar．Chinensis[J]．FujianJourn
2、alofAgriculturalSciences，2014，29(6)：546—549．中國(guó)水仙葉綠體ATP合成酶基因NTPF的克隆與序列分析林江波，王偉英，鄒暉，李海明，吳水金，戴藝民(福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所，福建漳州363005)摘要：以多效唑誘導(dǎo)中國(guó)水仙的抑制差減雜交文庫(kù)(SSH)獲得的cDNA片段為基礎(chǔ)，采用RACE及RT-PCR技術(shù)，分離克隆到1個(gè)ATP合成酶CB亞基基因NtATPF。此基因包含有1個(gè)555bp完整閱讀框架(ORF)，編碼184個(gè)氨基酸，具有1個(gè)跨膜區(qū)域(27~49)，分子量為20．8095kD，理論等電點(diǎn)為5．69。聚類分析表明：其氨基酸序列與蔥的
3、葉綠體ATP合成酶CF。B亞基蛋白氨基酸序列親緣關(guān)系最近。關(guān)鍵詞：中國(guó)水仙；ATP合成酶；基因克隆中圖分類號(hào)：S682文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ACloningandSequenceAnalysisofChloroplastATPSynthaseGeneNtATPFfromNarcissustazettavar．ChinensisLINJiang—bo，WANGWei—ying，Z0UHui，LIHal—ming，WUShui—jin，DAIYi-min(SugarcaneResearchInstitute，F(xiàn)ujJanAcademyofAgriculturalSciences，Zhangzh
4、ou，F(xiàn)ujian363005，China)Abstract：BasedonafragmenteDNAfromsuppressionsubtractivehybridization(SSH)ofNarcissustazettavar．chinensisinducedbypaclobutrazol，anATPSynthaseCF0subunitgeneNATPFwasseparatedandclonedbyRACEandRT—PCR．ThefulllengthofNtATPFcDNAwas905bpwitha555bpORF，whichencodedaproteinof184ami
5、noacidsandhadatransmembrancedomain(27—49)withapredictedmolecularmassof20．8095kDandtheoreticalisoelectricpointof5．69．PhylogeneticanalysisshowedthatNtATPFhadcloserelationshiptoATPSynthaseCFosubunitinAlliumfistulosum(AEX93661．1)．Keywords：Narcissustazettavar．Chinensis；ATPsynthase；genecloningATP是細(xì)
6、胞進(jìn)行各種生命活動(dòng)的直接能源，生葉綠素a／b結(jié)合蛋白基因Ntcabl在抽葶期和始花物體需要不斷得到能量來(lái)維持其一系列的代謝活期的表達(dá)量提高]、葉綠體結(jié)構(gòu)更為完整清晰，光合動(dòng)。FF。一型ATP合成酶是能量轉(zhuǎn)變過(guò)程中一個(gè)關(guān)速率、光合／呼吸比率提高]。本課題組從多效唑鍵酶，由嵌合于類囊體膜內(nèi)的F。和突出于膜表面的誘導(dǎo)中國(guó)水仙的抑制消減文庫(kù)(SSH)獲得了1個(gè)較親水的F兩部分組成。F部分是由a。、G。、了、8和ATP合成酶F。B亞基的cDNA片段，本研究根據(jù)e亞基組成，F(xiàn)。部分是由a、b和C亞基組成_1]。F已獲得的cDNA片段克隆該基因全長(zhǎng)eDNA，并對(duì)F。一型ATP合成酶存在于真、細(xì)
7、菌細(xì)胞膜、線粒體該基因進(jìn)行了生物信息學(xué)分析，為進(jìn)一步研究該基膜和葉綠體類囊體膜上，利用跨膜的質(zhì)子梯度使因功能及分析多效唑矮化中國(guó)水仙的分子機(jī)理奠定ADP和無(wú)機(jī)磷建立共價(jià)鍵而形成ATP【2]。有關(guān)中基礎(chǔ)。國(guó)水仙ATP合成酶基因還未見有相關(guān)報(bào)道。1材料與方法多效唑能使中國(guó)水仙植株矮化，株形緊湊，解決室內(nèi)水養(yǎng)時(shí)由于光線弱而引起葉片徒長(zhǎng)的問(wèn)題，提1．1材料高觀賞價(jià)值_3]。適宜濃度的多效唑可使中國(guó)水仙中國(guó)水仙“金盞銀臺(tái)”商品球購(gòu)自福建省龍海市收稿日期：2014—01—12初稿；2014—
