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《人葉酸受體自身抗體IgG酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法的建立及評價.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、北京大學學報(醫(yī)學版)JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)Vo1．46No．3Jun．2014·483··技術方法·人葉酸受體自身抗體IgG酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法的建立及評價王琳琳，楊娜，袁悅，任愛國(北京大學公共衛(wèi)生學院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學系，北京100191；北京大學生育健康研究所，衛(wèi)生部生育健康重點實驗室，北京100191)[摘要]目的：建立血漿葉酸受體自身抗體免疫球蛋白G(immunoglobulinG，IgG)的酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme．1inkedim
2、munosorbentassay，ELISA)檢測方法，并對其進行評價。方法：從正常人的胎盤樣品中提取葉酸受體蛋白并將其純化，以純化的人源葉酸受體蛋白為包被蛋白，以單克隆抗體為檢測二抗，建立血漿葉酸受體自身抗體IgG的間接ELISA檢測方法，評價其靈敏度、精密度及穩(wěn)定性。隨機選取24例血漿標本，同時以商品化的牛源葉酸結合蛋白與本方法中提取的人源葉酸受體蛋白作為包被蛋白，采用ELISA方法分別檢測血漿中葉酸受體抗體IgG的水平，比較兩種方法的檢測結果。結果：標準曲線可檢測的IgG濃度范圍為6．25×10一～8．00×
3、10I2(標準品采用健康人混合血漿，IgG濃度定為1)，最低檢測限為3．13×10～，批內(nèi)差異為2．74％一8．07％，批間差異為4．16％一8．23％。同一樣本不同稀釋倍數(shù)下IgG的檢測結果均在可接受范圍內(nèi)，結果較穩(wěn)定。血漿標本的牛源包被蛋白與人源包被蛋白檢測方法對比結果顯示兩種方法高度相關，相關系數(shù)為0．954(P<0．001)；人源包被蛋白檢測結果比牛源包被蛋白高14％。結論：成功建立以人源葉酸受體蛋白作為包被蛋白、針對血漿葉酸受體自身抗體IgG水平的ELISA檢測方法，該方法檢測靈敏，重復性好，可用于大樣本
4、量的人群檢測。[關鍵詞]葉酸受體；自身抗體；酶聯(lián)免疫吸附試驗；免疫球蛋白G[中圖分類號]R169．1[文獻標志碼]A[文章編號]1671—167X(2014)03-0483-05doi：10．3969／j．issn．1671—167X．2014．03．028Establishmentandevaluationofenzyme．1inkedimmunosorbentassayformeasuringhumanautoantibodyIgGtofolatereceptorWANGLin．1in，YANGNa，YUANY
5、ue，RENAi．guo(DepartmentofEpidemiologyandHealthStatistics，PekingUniversitySchoolofPublicHealth，Beijing100191，China；InstituteofReproductiveandChildHealth，PekingUniversity；MinistryofHealthKeyLaboratoryofReproductiveHealth，Beijing100191，China)ABSTRACTObjective：Toe
6、stablishandevaluateanewlyestablishedmethodofenzyme—linkedimmu．nosorbentassay(ELISA)formeasuringhumanautoantibodytofolatereceptor(FR)．Methods：Folatereceptorwasextractedandpurifiedfromheahhywomanplacentatissues．Theproteinwascoatedon96．wellplates．Goatmonoclonalan
7、tibodywasusedasdetectingantibodytosetuptheindirectELISAprocedure．Thesensitivity，precisionandlinearityofthemethodwereevaluated．Further，themethodwascomparedwiththeELISAmethodwithcommercializedbovinefolatebindingprotein(FBP)bydetermi—ningautoantibodylevelsin24ind
8、ividuals．Results：Themeasuringrangeofthestandardcurvewasfrom6．25×10to8×10(theIgGconcentrationofpooledplasmafromhealthydonorswasdefinedas1)．Thelowestdetectablelevelwas3．13×10一．Theint
