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《血細(xì)胞儀白細(xì)胞五分類法原理和散點(diǎn)圖特征.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科張時(shí)民血細(xì)胞分析技術(shù)已經(jīng)進(jìn)入自動(dòng)化時(shí)代，而具有白細(xì)胞五分類或更多分析參數(shù)的儀器也普遍的應(yīng)用于國內(nèi)各級醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室中，為臨床診斷和治療服務(wù)。而具有18項(xiàng)參數(shù)帶有白細(xì)胞三分群功能的血細(xì)胞分析儀也已經(jīng)普及進(jìn)入到基層醫(yī)院和社區(qū)醫(yī)療中心，在許多大型醫(yī)院中已不占主流位置，因此可以說目前在較大醫(yī)院的檢驗(yàn)科，常規(guī)血細(xì)胞分析儀已經(jīng)進(jìn)入全自動(dòng)化和白細(xì)胞五分類的時(shí)代。本文主要介紹全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀在白細(xì)胞五分類上的原理和散點(diǎn)圖分布特點(diǎn)。此類儀器在紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板和計(jì)算參數(shù)上一般會(huì)采用類似的測定原理和計(jì)算方法
2、，此類儀器的進(jìn)展和其功能特點(diǎn)可參考作者撰寫的其它文章（見參考文獻(xiàn)）。具有白細(xì)胞五分類功能的血細(xì)胞分析儀器是指通過各種物理和化學(xué)技術(shù)對白細(xì)胞進(jìn)行分析，以獲得外周血液中白細(xì)胞的五種常見類型，嗜中性粒細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，嗜堿性粒細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的百分率和絕對值的測定結(jié)果，此外還應(yīng)該具有對出現(xiàn)異常白細(xì)胞的提示或初步分類功能。目前國內(nèi)外具有開發(fā)研制白細(xì)胞五分類法儀器的主要為歐美和日本生產(chǎn)廠商，比較著名的歐美廠家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysme
3、x和NihonKohdon。在國內(nèi)已經(jīng)有邁瑞（MINDRAY）公司生產(chǎn)幾個(gè)型號的五分類血細(xì)胞分析儀器投入醫(yī)療市場。一簡要發(fā)展史1974年，一種名為HEMALOGD的具有初步白細(xì)胞分類功能的白細(xì)胞分析儀問世。1982年，Technicon公司生產(chǎn)了H6000型血液細(xì)胞分析儀器，應(yīng)該是首款具有白細(xì)胞五分類能力的儀器。同時(shí)代日本日立公司推出圖像分析法的白細(xì)胞分析儀HITACHI8200型，僅僅是用于完成白細(xì)胞血片分類的儀器，沒有其他血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析能力。Technicon公司1985年開發(fā)了比較成熟的具有白細(xì)胞五分類
4、功能的TechniconH1型血液細(xì)胞分析儀，隨后升級為H2型和H3型。COULTER公司在1987年開發(fā)研制其經(jīng)典VCS技術(shù)，并推出持續(xù)具有多年影響力的、具有白細(xì)胞五分類功能的血液細(xì)胞分析儀MAXM型。1990年前后，歐洲和日本許多廠家都陸續(xù)推出了各種類型的具有白細(xì)胞五分類功能的血細(xì)胞分析儀器。各廠家設(shè)計(jì)生產(chǎn)的此類血細(xì)胞分析儀，其在白細(xì)胞分類技術(shù)上原理各不相同，分析測定項(xiàng)目略有不同，且形式多樣，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，試劑種類和成分也趨于復(fù)雜。不斷改進(jìn)和升級的新產(chǎn)品使得儀器在白細(xì)胞分類技術(shù)上更加成熟和可靠。而技術(shù)的提高也
5、帶來了儀器和消耗品（試劑）價(jià)格的增加。二儀器原理和散點(diǎn)圖特點(diǎn)1體積、電導(dǎo)和激光散射原理這是Beckman－Coulter公司生產(chǎn)的血細(xì)胞分析儀所采用的經(jīng)典分析方法，他集三種物理學(xué)檢測技術(shù)于一體，在細(xì)胞處于自然原始的狀態(tài)下對其進(jìn)行多參數(shù)分析。該方法也稱為體積、電導(dǎo)、激光散射血細(xì)胞分析法。此技術(shù)采用在標(biāo)本中首先加入紅細(xì)胞溶血?jiǎng)┤芙獾艏t細(xì)胞，然后加入穩(wěn)定劑來中和紅細(xì)胞溶解劑的作用，使白細(xì)胞表面、胞漿和細(xì)胞體積保持穩(wěn)定不變。然后應(yīng)用鞘流技術(shù)將細(xì)胞推進(jìn)到流動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)池（Flowcell）中，接受儀器VCS三種技術(shù)的檢測
6、。V代表體積（Volume）測量法，是采用經(jīng)典的庫爾特專利技術(shù)，用低頻電流準(zhǔn)確分析細(xì)胞體積。體積是區(qū)分白細(xì)胞亞群的一個(gè)重要的參數(shù)，它可有效區(qū)分體積大小差異顯著的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。C代表高頻電導(dǎo)性（Conductivity），采用高頻電磁探針原理測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)間的差異，也是該公司的專利技術(shù)。細(xì)胞膜對高頻電流具有傳導(dǎo)性，當(dāng)電流通過細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞核的化學(xué)組份可使電流的傳導(dǎo)性產(chǎn)生變化，其變化量可以反映出細(xì)胞內(nèi)含物的信息。該參數(shù)可用來區(qū)分體積相近而內(nèi)部性質(zhì)不同的細(xì)胞群體，如淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞，由于它們的細(xì)胞核特性
7、不同而在傳導(dǎo)性參數(shù)上有所區(qū)別。S代表激光散射（Scatter）測量技術(shù)，采用氦氖激光源發(fā)出的單色激光掃描每個(gè)細(xì)胞，收集細(xì)胞在10°～70°角度內(nèi)出現(xiàn)的散射光(MALS)信號。該激光束可穿透細(xì)胞，探測細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中的顆粒情況，提供有關(guān)細(xì)胞顆粒性的信息，可以區(qū)分出顆粒特性不同的細(xì)胞群體。例如細(xì)胞內(nèi)顆粒粗的要比顆粒細(xì)的散射光更強(qiáng)，因此可以用于區(qū)分粒細(xì)胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜堿性三種細(xì)胞。圖1VCS法的測定原理儀器將分析每個(gè)細(xì)胞在V、C、S三種檢測技術(shù)上的測量結(jié)果，因?yàn)椴煌悇e的細(xì)胞會(huì)在體積、表面特征、內(nèi)部
8、結(jié)構(gòu)等方面呈現(xiàn)明顯的不同。將這些特征性信息被定義到以VCS為三維坐標(biāo)(分辨率為256×256×256=16,777,216)所形成的立體散點(diǎn)圖中，這五類細(xì)胞可在三維空間中形成特定的細(xì)胞群。通過計(jì)算某群細(xì)胞數(shù)量占白細(xì)胞總數(shù)的百分比，即可得到五項(xiàng)白細(xì)胞分類結(jié)果。儀器不僅僅做出對正常白細(xì)胞的五項(xiàng)分類結(jié)果，給出典型的散點(diǎn)圖型，還可以提示許多異常細(xì)胞區(qū)域的報(bào)警。VCS技術(shù)可通過DF1、DF2、DF3三個(gè)散點(diǎn)圖
