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1、中醫(yī)雜志２０１１年１１月第５２卷第２２期ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１１，Ｖｏｌ．５２，Ｎｏ．２２·１９５１·菟絲子含藥血清對(duì)成骨細(xì)胞代謝調(diào)控的影響杜波１＊王婧２（１．白城醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，吉林省白城市棉紡路２７號(hào)，１３７０００；２．首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院）＊通訊作者：ｚｇｙｙｚｎｚｂ＠１６３．ｃｏｍ，１３５２２９４２１８４［摘要］目的探討菟絲子含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞代謝調(diào)控的影響。方法采用血清藥理學(xué)方法制備菟絲子含藥血清；采用改良的組織塊法體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞；分別用５％、１０％、１５％、２０％菟絲子含藥血清誘導(dǎo)培養(yǎng)成骨細(xì)胞
2、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后，ＭＴＴ法檢測(cè)大鼠成骨細(xì)胞的增殖情況；用對(duì)硝基苯二鈉基質(zhì)動(dòng)力學(xué)法（ＰＮＰＰ）測(cè)定細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性；培養(yǎng)４８ｈ后用ＲＴ－ＰＣＲ方法檢測(cè)Ⅰ型膠原（ＣＯＬ－Ⅰ）ｍＲＮＡ的表達(dá)。結(jié)果５％和１０％菟絲子含藥血清在４８ｈ和７２ｈ能顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖并提高ＡＬＰ活性；在４８ｈ時(shí)１０％菟絲子含藥血清可促進(jìn)ＣＯＬ－ⅠｍＲＮＡ的表達(dá)。結(jié)論１０％菟絲子含藥血清能夠明顯促進(jìn)大鼠成骨細(xì)胞的增殖與分化，表明其具有促進(jìn)成骨作用。［關(guān)鍵詞］菟絲子；含藥血清；成骨細(xì)胞；增殖；分化ＥｆｆｅｃｔｏｆＤｏｄｄｅｒ－ＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＳｅｒｕｍｏｎｔｈｅＭｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆＯｓ
3、ｔｅｏｂｌａｓｔｓＩｎＶｉｔｒｏ１，ＷＡＮＧＪｉｎｇ２ＤＵＢｏ（１．ＢａｉｃｈｅｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，ＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，１３７０００；２．ＢｅｉｊｉｎｇＦｕｘｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＤｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｏｎｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆｒａｔｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ（ＯＢ）ｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅＤｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｓｅ
4、ｒｏｌｏｇｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｄｔｉｓｓｕｅｂｌｏｃｋｃｕｌｔｕｒｅｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｃｕｌｔｕｒｅｔｈｅｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓｉｎｖｉｔｒｏｏｆｎｅｗｌｙｂｏｒｎＳＤｒａｔｓ．ＡｆｔｅｒｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＯＢ（ｎ＝８）ｆｏｒ２４，４８，ａｎｄ７２ｈｏｕｒｓｗｉｔｈ５％，１０％，１５％，ａｎｄ２０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅＭＴＴｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅＰＮＰＰｍａｔｒｉｃａｌｄｙｎａｍｉｃｍｅｔｈｏｄｗａ
5、ｓａｐｐｌｉｅｄｆｏｒｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＬＰ），ａｎｄａｆｔｅｒ４８ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅＲＴ－ＰＣＲｔｅｃｈｎｉｑｕｅｗａｓｅｍｐｌｏｙｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅＣＯＬ－ＩｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＲｅｓｕｌｔｓＡｆｔｅｒ４８ｈａｎｄ７２ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅ５％ａｎｄ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｆｕｎｃｔｉｏｎｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｉｍｐｒｏｖｉｎｇｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＯＢａｎｄｅｎｈａｎｃｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡＬＰ．
6、Ａｆｔｅｒ４８ｈｃｕｌｔｕｒｅ，ｔｈｅ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｆｕｎｃｔｉｏｎｅｄｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅＣＯＬ－ＩｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅ１０％Ｄｏｄｄｅｒ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｒｕｍｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ－ｔｉｏｎｏｆＯＢ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｉｔｂｅｎｅｆｉｔｓｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ．ＫｅｙＷｏｒｄｓＤｏｄｄｅｒｓｅｅｄ（ＳｅｍｅｎＣｕｓｃｕｔａｅ）；ｍｅｄｉｃｉｎｅ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ；ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ；ｐｒｏ
7、ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ菟絲子是旋花科植物菟絲子（Ｃｕｓｃｕｔａｃｈｉｎｅｎｉｓ－基（Ｇｉｂｃｏ，批號(hào)：２０１０１０１６）；堿性磷酸酶（ＡＬＰ）試劑Ｌａｍ）的干燥成熟種子，味辛甘，性平，歸肝、腎、脾盒（保定長(zhǎng)城試劑有限公司，批號(hào)：２０１１０１１５）；［１］經(jīng)，具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)肝明目、安胎的功效。其主Ｒｅｄｚｏｌ總ＲＮＡ提取試劑（北京賽百盛基因技術(shù)公要成分為黃酮類化合物、多糖類化合物、生物堿類化司，批號(hào)：０４２８１１）；Ｍ－ＭＬＶ
