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1、宮頸癌患者外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞亞群檢測及臨床意義摘要目的：檢測宮頸癌患者外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的數(shù)量以及血清中IL-10及TGF-B的表達(dá)水平，探討阮1在宮頸癌臨床監(jiān)測中的意義。方法：收集50例宮頸癌患者外周血標(biāo)本，用間接免疫熒光法檢測Brl細(xì)胞亞群的分布，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測血清中IL-10及TGF-B的表達(dá)情況。結(jié)果：宮頸癌患者外周血Brl的數(shù)量明顯髙于正常對照組，IL-10的含量均明顯高于正常對照組(P<0.05),宮頸癌浸潤組與正常對照組相比，Brl的數(shù)量及IL-10明顯升高(P<0.05)。結(jié)論：宮頸癌患者中Brl的數(shù)量及血漿IL-10明顯升高，提示Br
2、l細(xì)胞與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展可能存在著一定的關(guān)系。關(guān)鍵詞宮頸癌調(diào)節(jié)B細(xì)胞Abstractobjective：TodetectthelevelsofBreginPBMCandIL-10andTGF-Bexpressioninseriaincervicalcarcinomapatients,forevaluatingthesignificanceofBregcellsincervicalclinicalmonitoring.Methods：Brlsubsetsinperipheralbloodweredetectedbyindirectimmunofluorescentstaini
3、ngandtheexpressionlevelofIL~10andTGF—BweredetectedbyELISAin50caseswithcervicalcarcinoma.ResuIts：TheproporticrnofBrlincreasedincomparisonwithnormalcontrol(P<0.05).TheexpressionlevelsofIL-10expressioninpatients，seriawerehigherthanthoseofcontrolgroups(P<0.05)；thelevelsofplasmaIL-10weresignifi
4、cantlyhigherinpatientswithinfiltrationascomparedwithpatientswithcontrolgroups(P<0.05).Conclusion：PredominantexpressionofIL-10incervicalcancerpatientssuggeststhatBrlcellsmayinvolveinthedevelopmentofcervicalcancer?KeyWordscervicalcarcinoma；development；Rreg宮頸癌是最常見的婦科腫瘤之一，其確切的病因仍未明確。普遍認(rèn)為，高危性人乳
5、頭瘤病毒(highriskhumanpap訂lomavirus,hrHPV)的感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因之一［1］。還有研究表明，宮頸癌的發(fā)生同時受其他因素影響,如患者細(xì)胞免疫功能低下［2］。新近研究提示，除分泌抗體的致病性B細(xì)胞外，還存在分泌IL-10或TGF-B等細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatoryBcells,Bregs),分別稱為產(chǎn)生IL-10的Brl細(xì)胞或TGF-B1的Br3細(xì)胞［3,4］。Bregs通過產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子或分泌抑制性抗體影響其他免疫細(xì)胞的功能，減緩炎癥癥狀。而慢性炎癥又是腫瘤的主要誘發(fā)因素[5],Brl細(xì)胞及其分泌的IL-10可存在于多種
6、慢性炎癥疾病，表明Brl細(xì)胞參與慢性炎癥的病理機(jī)制。為了深入探討B(tài)reg細(xì)胞亞型與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系，本文針對不同病程的宮頸癌患者外周血Brl細(xì)胞亞群及血清中IL-10及TGF-B水平進(jìn)行檢測，以期找到Breg細(xì)胞亞型在宮頸癌診斷、治療及預(yù)后中的作用。資料與方法主要試劑：兔抗人CD5抗體(FITC)和CD19抗體(PE)為Santa公司產(chǎn)品,IL-10及TGF-B的ELISA檢測試劑盒為北京達(dá)科為生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。淋巴細(xì)胞分層液為sigma產(chǎn)品。臨床資料及標(biāo)本：2007年12月?2010年12月宮頸癌患者外周血。所有患者術(shù)前均未做過放化療，患者年齡25?70歲
7、，平均47歲。根據(jù)1995年FIGO修訂的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)50例標(biāo)本中l(wèi)a期5例，lb期8例，IIa期13例，lib期20例，III期4例。組織分化程度：高分化7例，中分化20例，低分化23例。取同期子宮肌瘤切除的正常宮頸25例作為正常對照。實(shí)驗(yàn)方法：間接免疫熒光法：外周血lml,肝素抗凝。用淋巴細(xì)胞分層液分離單個核細(xì)胞，PBS洗2次，計數(shù)。取106個單個核細(xì)胞，分別加入抗CD5抗體和抗CD19抗體20111,將標(biāo)本與抗體充分混勻后，30溫育1小時。取出后用2ml紅細(xì)胞裂解液裂解10分鐘，離心后棄上清，用PBS洗2遍，
