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1、生防木霉拮抗黃瓜枯萎病菌的初步研究摘要木霉是一種重要的生防菌，對黃瓜枯萎病菌有很強(qiáng)的拮抗作用，主要作用方式有:競爭、重寄生、抗生、溶菌作用。溫室盆栽試驗(yàn)顯示，木霉可顯著防治黃瓜枯萎病菌。關(guān)鍵詞木霉;黃瓜枯萎病菌;生防木霉(Trichodermaspp.)屬真菌界、雙核菌門、半知菌亞門、絲孑何綱、叢梗抱目、叢梗抱科、真菌屬，是迄今為止研究和應(yīng)用最多的一類生防菌［1］。木霉的生防機(jī)制復(fù)雜，主要包括競爭、重寄生、抗生、溶菌等。研究木霉對病原菌的作用機(jī)制及防治效果，可以優(yōu)選木霉菌株,從而提高生防效率。1材料與方法1.1試驗(yàn)材料以病株上分離的黃瓜枯
2、萎病菌(Fusariumoxysporamf.sp.cucumerinum)為拮抗對象,土壤中分離的木霉菌株為拮抗菌。1.2試驗(yàn)方法1.2.1競爭作用。采用對峙培養(yǎng)法，在直徑為9cm的PDA平板一側(cè)接種直徑為5mm的病原真菌菌絲塊，在平板另…側(cè)接種拮抗菌,28°C共培養(yǎng)，觀察兩菌的生長情況。1.2.2重寄生作用。在PDA培養(yǎng)基中央放置1塊20mmx20mm無菌蓋玻片，在左側(cè)距蓋玻片40mm處接種木霉,右側(cè)距蓋玻片20mm處接種黃瓜枯萎病菌,28°C恒溫培養(yǎng)。取下蓋玻片,于顯微鏡下觀察菌絲體的作用方式。1.2.3抗生作用。在裝有l(wèi)OOmLP
3、DB的三角瓶中接入直徑5mm的木霉菌塊,28°C、15Orpm培養(yǎng)6d,取濾液離心后過0.22pm細(xì)菌濾器。在90mL、45°C的PDA中加入10mL上述濾液，搖勻倒成平板,接種直徑為5mm的黃瓜枯萎病菌菌塊。28°C恒溫培養(yǎng)，觀察生長情況。1.2.4溶菌作用。將培養(yǎng)4d的木霉發(fā)酵液8000卬m離心1Omin□取15mL上清液倒入培養(yǎng)1111屮，接入黃瓜枯萎病菌菌塊。淺層培養(yǎng)5d后觀察生長情況。以高溫滅菌的木霉上清液中培養(yǎng)的病菌菌塊為對照。1.2.5盆栽試驗(yàn)。將黃瓜種子經(jīng)70%乙醇消毒lmin,2%NaClO消毒5min,55°C溫水浸1
4、5?20min,25°C浸泡2?3h,無菌水沖洗3次,25?3()°C下催芽1?2d。將黃瓜枯萎病菌接種到鉄皮：玉米粉為3:1的培養(yǎng)基中,28°C恒溫箱中培養(yǎng)至長滿整個三角瓶。將催芽基本…致的黃瓜苗在木霉菌懸液(約lxlO8cfu/mL)屮浸lh,取出于滅菌濾紙片上干燥lh后,播種于拌有黃瓜枯萎病菌制劑的土壤中。以無菌水浸種處理為對照。2結(jié)果與分析1競爭作用平皿對峙試驗(yàn)顯示,木霉生長迅速，可快速占據(jù)空間，有很強(qiáng)的生長競爭優(yōu)勢，能有效抑制黃瓜枯萎病菌的生長。2重寄生作用顯微鏡下觀察到木霉菌絲體纏繞著黃瓜枯萎菌絲生長，并在病菌菌絲上產(chǎn)綸大量分
5、枝，產(chǎn)綸寄生作用O3抗生作用在PDA培養(yǎng)基中加入10%的木霉發(fā)酵液后,黃瓜枯萎病菌菌絲生長不旺盛，與對照有顯著的差異。4溶菌作用在未滅菌的木霉上清液中培養(yǎng)的黃瓜枯萎菌塊，僅有細(xì)小菌絲的生長，數(shù)量較少;而在滅菌后的上清液屮，黃瓜枯萎菌生長旺盛,形成大塊菌絲團(tuán)。5盆栽防效試驗(yàn)盆栽試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照相比，木霉浸種處理的黃瓜幼苗死亡率為25.0%,顯著低于對照的66.7%o3結(jié)論與討論作為安全而環(huán)境友好的生防因子，木霉在山間的施用可有效地防治作物病害，從而避免大量使用農(nóng)藥導(dǎo)致病原菌抗藥性的產(chǎn)生、作物農(nóng)藥含量超標(biāo)及環(huán)境污染等問題L4-6Jo因此，
6、對木霉牛:防機(jī)制深入而全面的研究，將對綠色農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展產(chǎn)牛:重要的推動作用。4參考文獻(xiàn)[1]辛雅芬，商金杰,高克詳?拮抗木霉菌的生防機(jī)制研究進(jìn)展[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2005,33(4):88-91.HARMANQHOWELLCR,VITERBOA,etal.Trichodermaspecies-opportunistic,avirulentplantsymbionts[J
7、.Nature,2004(2):43-56.蒲金基，曾會才?綠色木霉LTR12-1對黃瓜枯萎病菌防治作用機(jī)制的初步研究[J]?熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,22(4
8、):22-25.呂天曉，徐鳳花,李世貴，等?生防木霉菌原生質(zhì)體的制備及再生研究［J］住物技術(shù)通報,2009(4):130-134.莊敬華，陳捷，楊長成，等.生防木霉菌生物安全性評價山?中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,39(4):715-720.王勇，王萬立,劉春艷，等?生防木霉菌T19701的鑒定及其生物學(xué)特性［J］?華北農(nóng)學(xué)報,2006,21(1):100-104.
