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《中草藥對雙歧桿菌生長的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、中草藥對雙歧桿菌生長的影響提要本文選用15種傳統(tǒng)杭衰老中藥對雙吱桿菌進行了體外生長促進實驗。結果發(fā)現(xiàn)刺五加、五味子、寧夏構祀子及阿膠對嬰兒雙吱桿菌有明顯的促進作用。雙歧桿菌是一類多形態(tài)、無芽胞革蘭氏陽性桿菌。該菌營養(yǎng)要求高，需要外源性生長因子，即雙歧因子。該因子能刺激雙歧桿菌的生長?，F(xiàn)已證實雙歧桿菌因子有兩種，一種是含有N一乙酞葡萄糖胺的多聚物，另一種是寡聚糖〔‘’。本文旨在探討阿膠，五味子，構祀及刺五加對雙歧桿菌的生長的促進作用。100毫升，蒸溶，備用。1.4中藥紙片:用國產(chǎn)新華1號濾紙，打孔制成直徑6mm紙片。干燥滅菌(1200C)2小時。每100張紙片加lml中藥液，
2、使其浸勻，再分別置無菌平皿在37℃烘干〔，，。1材料與方法1.1主要儀器:721分光光度計(四川分析儀器廠)、超凈工作臺、厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)、Olympus雙目顯微鏡(日本)、麥氏比濁管。1.2菌株:實驗所用菌株為嬰兒雙歧桿菌Bif1104，由中國預防醫(yī)學中心流行病微生物研究所提供。實驗時，取該菌接種于BL肉湯和BL血平板，置厭氧罐，用抽氣換氣法進行厭氧培養(yǎng)。35℃經(jīng)48小時培養(yǎng)后，用無菌鹽水洗三次，每次2000Xg離心15分鐘，用麥氏比濁管調(diào)整菌液濃度為1.5億/ml備用。1.3中藥:本試驗采用的中藥為阿膠，五味子，刺五加，構祀等均購自重慶市中藥材公司。試驗時，取五味子、人參、
3、菌靈芝、熟地、黃精、黃蔑、獲等、天冬、營蒲、何首烏、杜仲、冤絲子、刺五加、構祀各50克，分別各加水200毫升，置300瓦電爐上加熱煮沸1小時，最后濃縮制成100毫升藥液。取30克阿膠，加水2實驗方法2.1紙片法:取上述制備好的菌液用一定大小的棉簽均勻涂布于BL血平板上。涂布的細菌量以不完全融合生長為宜，然后貼上上述中藥紙片，每個平皿貼4片，用1個平皿作對照(貼有不含中藥紙片)。厭氧培養(yǎng)350C48小時后，觀察細菌生長情況，涂片，革蘭氏染色，油鏡鏡檢。2.2試管法:用接種環(huán)取上述制備菌液2接種環(huán)至lOmIBL肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，然后分別加入中藥濃縮液。.1毫升，另取一支不加中藥作對
4、照.厭氧培養(yǎng)350C48小時后，觀察細菌生長情況，涂片，染色，鏡檢，證實為革蘭氏陽性桿菌，有分叉等后，再于721分光光度計比濁測定各管光密度(波長650mm，光徑lcm)。計算各管菌液濃度。3結果3.1紙片法結果經(jīng)厭氧培養(yǎng)350C48小時后，發(fā)現(xiàn)貼有阿膠，刺五加，五味子，構祀四味中藥中國徽生態(tài)學雜志1996年第a卷第2期的紙片周圍細菌生長極為茂盛，有酸臭味，呈菌苔生長，菌苔呈灰色，平板由紅色變?yōu)榍煽肆ι?涂片，革蘭氏染色發(fā)現(xiàn)上述四味中藥紙片周圍細菌染色典型，菌體粗大。3.2試管法結果表1各味中藥對雙吱桿菌生長作用的影響光密度(OD)細菌數(shù)(mg/ml)培養(yǎng)基對照五味子刺五加
5、人參菌靈芝熟地0.450.234.583.750.380.421.913.170.420.423.503.503.50門01了n，目1二心.幾月0UdO曰‘，..…︸.二︸.幾，目n乙七以0.14o.zo精蔑等冬黃黃獲夭以0.百瀚何首烏o.o.35ss杜仲冤絲子0.420.323.502.s7從以上實驗結果可以看出，阿膠，五味子，拘祀，刺五加這四味中藥能促進雙歧桿菌的生長，分別比對照組高出百分率為75.800,50%,40.5%和21.70o04討論雙歧桿菌營養(yǎng)要求高，因此，在體外培養(yǎng)中許多物質(zhì)對雙歧桿菌有影響.Poch}”的試驗表明，除青春雙歧桿菌和長雙歧桿菌能在人工培基
6、上生長外，所有其它的雙歧桿菌在體外培養(yǎng)中均需添加生長促進劑.雙歧桿菌在含有牛奶的人工培養(yǎng)基上生長良好〔‘，。但Balmer'S〕指出，盡管不少學者在使用牛奶代替人乳這方面作出了許多努力，但母乳喂養(yǎng)與人工喂養(yǎng)嬰兒腸道內(nèi)雙歧桿菌數(shù)量仍存在較大差別。他發(fā)現(xiàn)乳清有雙歧因子的作用，他對乳清、酪蛋白及人乳促進雙歧桿菌生長作用進行了實驗研究。結果發(fā)現(xiàn):大多數(shù)用乳清喂養(yǎng)嬰兒在第14天腸道內(nèi)開始有雙歧桿菌定植，而酪蛋白組腸道內(nèi)大多數(shù)是類桿菌和腸球菌定植。提示乳清中含有雙歧因子。Balmer`6，的進一步實驗發(fā)現(xiàn)，人乳含有的乳鐵蛋白較牛奶多。Petschow"，也用體外實驗研究了人乳、牛奶乳清
7、蛋白和酪蛋白水解物對雙歧桿菌的生長促進作用。發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌的生長促進作用直接與乳清中特異因子的濃度相關。Bezkorvainy`e，發(fā)現(xiàn)檸檬酸、血清轉鐵蛋白、蘋果酸、秋水仙堿、氟醋酸鹽、魚騰酮等對雙歧桿菌的生長沒有影響，而氰化物、疊氮化物、2}4一二硝基苯酚、血紅蛋白、血紅素等對雙歧桿菌生長有抑制作用。進一步研究發(fā)現(xiàn):鐵離子是雙歧桿菌生長所必需的營養(yǎng)成份，鐵葉琳系統(tǒng)在雙歧桿菌代謝過程中發(fā)揮著重要作用。雙歧桿菌生長還需要錳、鋅和銅離子，這些金屬離子對雙歧桿菌的生長起關鍵作用。牛酪蛋白消化液和酵母浸出液對所有雙歧桿菌的生
