海藻糖 透性 靜息細(xì)胞 酶學(xué)特性 工藝 海藻糖合酶

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1、海藻糖論文:制備透性靜息細(xì)胞生產(chǎn)海藻糖技術(shù)研究【中文摘要】海藻糖是一種安全的非還原性二糖,具有保濕性,抗凍抗干燥性,熱酸穩(wěn)定性等特性,對(duì)生物大分子有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖在醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、化妝品行業(yè)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景,但是其高成本,制取上的困難限制了它的廣泛應(yīng)用。本論文立足于惡臭假單胞菌透性靜息細(xì)胞技術(shù)生產(chǎn)海藻糖,把海藻糖合酶固定在細(xì)胞內(nèi),而新合成的海藻糖又可以自由的排到細(xì)胞外,為海藻糖的生產(chǎn)提供了一條新途徑。論文內(nèi)容包括透性靜息細(xì)胞的制備,優(yōu)化透性靜息細(xì)胞的產(chǎn)酶條件,滲透壓對(duì)靜息細(xì)胞透性和

2、酶活的影響,透性化海藻糖合酶反應(yīng)工藝及其特性的研究。海藻糖合酶是胞內(nèi)酶,通過細(xì)胞破碎制取純酶較為困難,酶活損失大,所以可采用2%甲苯滲透處理靜息細(xì)胞2h,制得透性靜息細(xì)胞,將透性靜息細(xì)胞代替純酶進(jìn)行酶促反應(yīng)。通過實(shí)驗(yàn)對(duì)比甲苯處理與超聲破碎處理的效果,發(fā)現(xiàn)處理后酶活力基本一致,說(shuō)明甲苯可以完全滲透細(xì)胞。本論文對(duì)產(chǎn)酶培養(yǎng)基的成分進(jìn)行優(yōu)化,討論了不同培養(yǎng)基成分對(duì)酶活和菌體量的影響,得到最佳產(chǎn)酶培養(yǎng)基:葡萄糖2%,牛肉膏1%,K2HP040.1%,NaH2PO40.1%,MgSO4.7H2O0.05%(w/v)。應(yīng)用

3、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法,得到最佳發(fā)酵工藝...【英文摘要】Tehaloseisasecurenon-reducingsaccharide,moisturizing,resistanttofrostanddryingconditions,stabilizedtoheatandacid,andprovidesnonspecificprotectionforbiologicmolecule.Ithasabroadprospectofapplicationforpharmaceuticals,agriculture,cosm

4、eticsandfoodindustry,etc,buthasn’tbeenwidelyusedduetohighcostandprepapationdifficulty.ThisthesismainlystudiedtrehaloseproductionthroughpermeablerestingcellsfromPseudomonasputida.Inthisstudy,trehalosesynthaseis...【關(guān)鍵詞】海藻糖透性靜息細(xì)胞酶學(xué)特性工藝海藻糖合酶【英文關(guān)鍵詞】trehaloseperm

5、eabilityrestingcellsenzymaticpropertiesprocesstrehalosesynthase【索購(gòu)全文】聯(lián)系Q1:138113721Q2:139938848【目錄】制備透性靜息細(xì)胞生產(chǎn)海藻糖技術(shù)研究摘要9-10ABSTRACT10-11第1章緒論12-281.1引言12-131.2研究背景131.3海藻糖的生物學(xué)功能和特性13-161.4海藻糖保護(hù)機(jī)制的四種假說(shuō)16-171.4.1“穩(wěn)定態(tài)”161.4.2“優(yōu)先結(jié)合”161.4.3“玻璃態(tài)”161.4.4“水替代”16-171

6、.5海藻糖的檢測(cè)17-191.5.1薄層層析(TLC)171.5.2紙層析(PC)17-181.5.3高效液相色譜(HPLC)181.5.4蒽酮比色法181.5.5氣相色譜(GC)18-191.5.6酶法191.6海藻糖的生產(chǎn)方法及研究進(jìn)展19-251.6.1微生物抽提法19-201.6.2重組植物生產(chǎn)法201.6.3微生物發(fā)酵法20-211.6.4酶法合成海藻糖21-241.6.5制備透性靜息細(xì)胞生產(chǎn)海藻糖研究進(jìn)展24-251.7論文選題的背景、意義及思路25-281.7.1透性化靜息細(xì)胞制備海藻糖的意義2

7、5-261.7.2論文的主要研究?jī)?nèi)容和任務(wù)26-28第2章惡臭假單胞菌透性靜息細(xì)胞的制備28-382.1引言28-292.2實(shí)驗(yàn)材料29-312.2.1菌種292.2.2主要儀器292.2.3主要試劑29-302.2.4培養(yǎng)基30-312.3實(shí)驗(yàn)方法31-342.3.1菌種培養(yǎng)方法312.3.2靜息細(xì)胞的制備312.3.3透性化細(xì)胞海藻糖合酶(粗酶液)的制備31-322.3.4酶活的測(cè)定322.3.5超聲破碎細(xì)胞322.3.6菌體量的測(cè)定322.3.7海藻糖的檢測(cè)方法32-342.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論34-372

8、.4.1最佳滲透劑的選擇34-352.4.2最佳滲透劑濃度和滲透時(shí)間的選擇352.4.3最佳滲透溫度的選擇35-362.4.4細(xì)胞滲透效果的驗(yàn)證36-372.5本章小結(jié)37-38第3章透性靜息細(xì)胞產(chǎn)酶條件和發(fā)酵工藝的優(yōu)化38-543.1引言383.2實(shí)驗(yàn)材料38-393.2.1菌種383,2,2主要儀器383.2.3主要試劑383.2.4培養(yǎng)基38-393.3實(shí)驗(yàn)方法39-413.3.1菌種培養(yǎng)方法

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