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1、植物生化制藥第五章核酸類藥物【PPT】98%分布于細(xì)胞核，其余分布于核外如線粒體，葉綠體。主要分布于細(xì)胞質(zhì)（90%），剩余10%位于細(xì)胞核。(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脫氧核糖核酸核糖核酸攜帶遺傳信息，決定細(xì)胞和個(gè)體的基因型(genotype)。參與細(xì)胞內(nèi)DNA遺傳信息的表達(dá)。某些病毒RNA也可作為遺傳信息的載體。核酸堿基戊糖核苷磷酸核苷酸核酸類藥物是具有藥用價(jià)值的核酸、核苷酸、核苷以及堿基的統(tǒng)稱。除了天然存在的堿基、核苷、核苷酸外，它們的類似物、衍生物或這些類似物、衍生物的聚合物也屬于核酸藥物。2.純化（1）密度梯度離
2、心法（2）柱色譜法（3）凝膠電泳法（三）含量測定定磷法（1）核酸樣品用硫酸消化，將有機(jī)磷轉(zhuǎn)化成無機(jī)磷；（2）制定定磷標(biāo)準(zhǔn)曲線；（3）測定回收率和樣品總磷量。(NH4)MoO4+H2SO4H2MoO4+(NH4)2SO4H3PO4+12H2MoO4H3P(Mo3O10)4+12H2OH3P(Mo3O10)4Mo2O3?MoO3（鉬藍(lán)）定糖法Vit?CRNA中的戊核糖可在鹽酸的水解作用下游離出來，進(jìn)一步形成糠醛，然后與地衣酚反應(yīng)，反應(yīng)物程鮮綠色，在670nm有最大吸收峰。二、DNA的制備材料的選擇與處理2.提取與純化3.含量測定（1）定磷法同RNA（2）定糖法又稱二苯胺法，在酸性溶液中，將
3、DNA與二苯胺共熱，形成藍(lán)色化合物，該化合物在595nm有最大吸收。當(dāng)DNA濃度在20-200ug/mL時(shí)，光吸收度與DNA濃度呈正比。三、核苷酸、核苷及堿基的制備（一）制備方法1.直接提取法2.水解法（1）酶水解法（2）堿水解法（3）酸水解法3.化學(xué)合成法4.酶合成法5.微生物發(fā)酵法光合磷酸化法制備ATP的工藝流程5′-AMP[溶解，混合]Na2HPO4，Tris，PMS肌激酶，ATP（引子）混合液反應(yīng)液ATP粗制品上清液濾液ATP成品ATP沉淀洗脫液（含ATP）吸附物流出液[光合]葉綠體pH3,1-1.5h[沉淀]三氯乙酸10℃以下[提取]乙醇10℃4-5h[干燥]乙醇，乙醚減壓[
4、去陽離子]732樹脂pH6→1→2[除熱源、沉淀]硅藻土、乙醇[去雜質(zhì)]蒸餾水、硅藻土[洗脫]NaCl溶液pH3.8[吸附]NaOH，717樹脂pH6.5-7ATP的藥理作用與臨床應(yīng)用在生物體內(nèi)，ATP廣泛參與各種生化過程，除參與核酸形成外，主要起著供應(yīng)能量和磷酸基團(tuán)的作用。ATP除了作為危重病人搶救的輔助藥物外，還可對慢性肝炎、肝硬化、腎炎、心肌炎、冠狀動(dòng)脈硬化、進(jìn)行性肌肉萎縮、再生障礙性貧血、腦血管意外后遺癥、中心性血管痙攣性視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、耳聾、耳鳴等有一定療效。第五章酶類藥物第一節(jié)概述一、酶類藥物發(fā)展簡史酶類藥物是直接用各種劑型的酶以改變體內(nèi)酶活力，或改變體內(nèi)某性
5、質(zhì)生物活性物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的數(shù)量等，從而達(dá)到治療某些疾病的目的。1926年，Sumner將尿素酶結(jié)晶是藥用酶工業(yè)化的起點(diǎn)。1952年，Innerfield首次將結(jié)晶的胰蛋白酶用于治療血栓性靜脈炎，真正揭開了酶在醫(yī)療應(yīng)用的序幕。20世紀(jì)60年代后期，逐漸發(fā)展到從微生物發(fā)酵液中獲得大量的酶。70年代后，開始利用人的某些組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和基因工程手段來獲取有關(guān)的酶，使酶類藥物的應(yīng)用得到了迅速發(fā)展。對酶類藥物的要求1.藥用酶應(yīng)在生理環(huán)境（pH中性）下具有最高活力和穩(wěn)定性。2.對其作用的底物具有較高的親和力。3.在血清中半衰期較長。4.要求純度高，特別是對注射用的酶類藥物純度要求更高。5.酶應(yīng)免疫
6、源性較低或無免疫源性。二、酶的分子組成及分類1.酶分子的組成①單體酶②寡聚酶③多酶復(fù)合體酶有機(jī)物分子金屬有機(jī)物金屬輔酶或輔基（非蛋白部分）酶蛋白復(fù)合蛋白質(zhì)單純蛋白質(zhì)（單體酶）2.酶的分類分類名稱催化反應(yīng)的類型實(shí)例1氧化還原酶電子轉(zhuǎn)移醇脫氫酶2轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移功能基團(tuán)己糖激酶3水解酶水解反應(yīng)胰蛋白酶4裂合酶鍵的斷裂丙酮脫羧酶5異構(gòu)酶分子內(nèi)基團(tuán)的轉(zhuǎn)移順丁烯二酸異構(gòu)酶6連接酶或合成酶鍵形成與水解偶聯(lián)丙酮羧化酶表6-1酶的國際分類三、酶類藥物的臨床應(yīng)用1.消化酶類2.抗炎、黏痰溶解酶3.與纖維蛋白溶解作用有關(guān)的酶類4.抗腫瘤的酶類5.其它生理活性酶6.復(fù)合酶表6-2酶類藥物一覽表第二節(jié)酶類藥物的一般
7、制備方法酶制備過程的特點(diǎn)：一是某種酶在生物體內(nèi)含量甚少，且有分布部位特異性。二是酶可以通過測定其活力加以跟蹤。酶制備一般包括四個(gè)步驟：酶的原材料的選擇與處理；酶的提?。幻傅募兓?；酶活力的測定和純度檢測。一、酶的原材料選擇與預(yù)處理（一）原材料的選擇（1）了解目的酶在生物材料中的分布特點(diǎn)，選擇適宜的生物材料。（2）考慮生物在不同發(fā)育階段及營養(yǎng)狀況時(shí)，酶含量的差別及雜質(zhì)干擾的情況。（3）原料來源是否豐富，原料易得，原料產(chǎn)地較近。（4）提取步驟是否簡便
