農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)綜述

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1、農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)研究進(jìn)展鄧敏姬鄧敏航鄭琪黃卿儀易蜀婷摘要：主要綜述了農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)中目前廣泛應(yīng)用的酶抑制檢測法、酶聯(lián)免疫檢測法、活體生物測定法、生物傳感器法和儀器分析法等快速測定方法的原理、優(yōu)缺點(diǎn)及其進(jìn)展，指出了農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)中存在的問題和發(fā)展方向。關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留；酶抑制；酶聯(lián)免疫；活體生物測定；生物傳感器；速測Abstract：Summaryofthepesticideresiduesinthemaindetectiontechniqueiscurrentlywidelyusedintheenzymeinhibitionassay,enzyme-lin

2、kedimmunosorbentassay,invivobioassay,biologicalsensorsandanalysisequipment,suchastherapiddeterminationoftheprinciples,strengthsandweaknessesandprogress.Pointedoutthetechnologyforrapiddetectionofpesticideresidueproblemsanddevelopmentdirection.Keywords:pesticideresidues;enzymeinhibitor;en

3、zyme-linkedimmunosorbentassay;vivobioassay;biologicalsensors;speedtest正文：長期以來，由于人們在防治農(nóng)作物病蟲害過程中不合理和超劑量使用化學(xué)農(nóng)藥，導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留量越來越高，影響了農(nóng)產(chǎn)品的出口和人民的健康，也破壞了農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境。當(dāng)前世界各國政府正在不斷加強(qiáng)農(nóng)藥殘留的監(jiān)測工作，對農(nóng)藥殘留檢測靈敏度和效率的要求逐步提高，對快速檢測分析新技術(shù)的開發(fā)也日益重視。常規(guī)的農(nóng)藥殘留分析方法如液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、質(zhì)譜(MS)法等，均存在著樣品前處理復(fù)雜、儀器設(shè)備昂貴、分析費(fèi)時長、要求熟

4、練的技術(shù)人員才能完成等問題。由于這些方法不能滿足樣品現(xiàn)場快速檢測的要求，迫使人們運(yùn)用新的原理和方法去開發(fā)特異性強(qiáng)、靈敏度高、方便快捷、準(zhǔn)確安全的快速檢測新技術(shù)。本文主要綜述了目前廣泛應(yīng)用的酶抑制法、酶聯(lián)免疫分析方法、活體生物測定方法和生物傳感器法等快速測定方法的研究進(jìn)展。1．酶抑制法1.1酶抑制法是一種簡便、靈敏、經(jīng)濟(jì)的快速檢測方法，是相對成熟的一種對部分農(nóng)藥進(jìn)行殘留速測技術(shù)。它基于有機(jī)磷農(nóng)藥對酶活性的抑制作用，適用于有機(jī)磷和氨基甲酸酪類農(nóng)藥。[1,2]在目前條件下，酶抑制法是凈化蔬菜市場的一種有效可行的方法，其優(yōu)點(diǎn)是能對抑制膽堿酯酶的農(nóng)藥品種進(jìn)行快速靈敏的檢測、樣品

5、前處理簡單、檢測時間短、所需儀器設(shè)備簡單、適用于現(xiàn)場測定。缺點(diǎn)是使用的酶基質(zhì)和顯色劑有一定的特異性，需控制的條件比較多。[3]1.2影響因素[1]：1)溫度和PH對酶促反應(yīng)的影響:酶的活性都隨著溫度的升高先升高后降低;2)時間對酶促反應(yīng)的影響；3）溫度和農(nóng)藥品種對農(nóng)藥抑制作用的影響:在一定的溫度范圍內(nèi)(25-45℃)植物酯酶和乙酰膽堿酯酶受到農(nóng)藥的抑制作用都是隨著溫度的升高而增強(qiáng)；4）時間對農(nóng)藥抑制作用的影響:抑制時間越長，農(nóng)藥的抑制作用越強(qiáng)。1.3酶抑制法根據(jù)所使用的酶的種類不同可大致分為兩類:膽堿酯酶法和植物酯酶法。[1]1.3.1膽堿酯酶法原理：乙酰膽堿酯酶(A

6、ChE)抑制法的檢測原理以乙酰膽堿為底物，在AChE的作用下，乙酰膽堿水解成膽堿和乙酸，膽堿和二硫?qū)ο趸郊姿?DTNB)產(chǎn)生顯色反應(yīng)，使反應(yīng)液呈黃色。[1]特點(diǎn)：操作簡單測定所需的時間短不需要貴重的儀器費(fèi)用較低適合于現(xiàn)場的快速檢測，AChE抑制法雖然在回收率和精密度上較經(jīng)典方法差一些，但可以滿足半定量的要求適合于我國的小規(guī)模分散式的農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)與經(jīng)銷體系。另外，各種農(nóng)藥因其化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理不同對AChE的抑制能力也不相同，氧化型有機(jī)磷的抑制能力較強(qiáng)，AChE抑制法對其的靈敏度較高最小檢出濃度較低；而硫代型有機(jī)磷的抑制能力較差，最小檢出濃度較高；但辛硫磷因為含有肟基選

7、擇毒力大大增強(qiáng)最小，檢出濃度較低；對氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢測靈敏度相對都比較高。1.3.1.1比色法[4]比色法是酶抑制法農(nóng)藥殘留快速檢測測定技術(shù)中最常采用的一種方法，也是最簡單的一種測定技術(shù)。原理：它通過酶水解底物碘化硫代乙酰膽堿，生成的碘化硫代膽堿，能與5，5’一二硫代一2，2’二硝基苯甲酸(DTNB)作用，生成5一琉基一2一硝基苯甲酸(黃色)。于特征波長(410.nom)下進(jìn)行比色，測定吸光值，根據(jù)吸光值的大小，計算乙酰膽堿酯酶被抑制的程度，并通過與農(nóng)藥濃度進(jìn)行回歸分析，建立回歸方程，從而通過測定未知樣品對酶活性的抑制率求出樣品中殘留農(nóng)藥的量的一