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1、GB/T16285-1996前言食品中葡萄糖的測定方法，一般采用《國際食搪分析方法統(tǒng)一委員會》規(guī)定的“蘭一埃農(nóng)法”(LaneandEynon'smethod)和“姆松一華爾格法”(MunsonandWalker'smethod)，即菲林氏溶液氧化還原滴定法。此法雖沿用已久，但測定結(jié)果只是近似值。因使用菲林氏溶液滴定葡萄糖(還原搪)時，其他具有還原能力的單搪會干擾測定結(jié)果。本標(biāo)準(zhǔn)采用的酶一比色法和酶一電極法是在檢索了近20年107篇國外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)、驗(yàn)證而制定的。酶一比色法和酶一電極法使用的葡萄糖氧化酶(GOD)具有專一性，只能催化葡萄糖水溶液中的(3
2、-D-葡萄糖起反應(yīng)(被氧化)，因此測定結(jié)果是真實(shí)值。本標(biāo)準(zhǔn)的酶一比色法為仲裁法;酶一電極法為快速法。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A,附錄B都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國農(nóng)墾北方食品監(jiān)測中心(酶一比色法);山東省科學(xué)院生物研究所(酶一電極法)。本標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)全[A食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會秘書處審核。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:張宗城、劉寧、馮德榮、孫士青、宋家華、郝煌。中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食品中葡萄糖的測定方法GB/T16285-1996酶一比色法和酶一電極法Methodfordeterminationof口ucose加food-Enzyme
3、-colorimetr阮.dh目andenzyme-electrodemethod，范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用酶一比色法和酶一電極法測定食品中葡萄搪的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中葡萄糖的測定;亦適用于食品中其他組分轉(zhuǎn)化為葡萄糖的測定。本標(biāo)準(zhǔn)酶一比色法的最低檢出限量為。.01pg(葡萄糖/mL(試液);酶一電極法的最低檢出限量為1.0mg/100mL,2酶一比色法2.1原理葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧條件下，催化卜D-葡萄糖(葡萄搪水溶液狀態(tài))氧化，生成D-葡萄糖酸-a一內(nèi)醋和過氧化氫。受過氧化物酶(POD)催化，過氧化氫與4-氨基安替比林和苯酚生成紅色醒亞胺。在波長505
4、nm處測定釀亞胺的吸光度，計(jì)算食品中葡萄糖的含量cC。HI,:,0O。,+0:2-i塑C,H,,O.+HZO2H:,0O:z+cC，6H。,陽OH+cCl=，Hl=:N3,oOnPODc6H,NO+HY02.2試劑2.2.1組合試劑盒1號瓶:內(nèi)含。.2mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH=7.0)100mL，其中4-氨基安替比林為0.00154mol/L;2號瓶:內(nèi)含。.022mol/L苯酚溶液100mL,3號瓶:內(nèi)含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)400U活力單位)、過氧化物酶(辣根，peroxidase)1000U活力單位)。1,2,3號瓶須在4℃左右保
5、存。2.2.2酶試劑溶液:將1號瓶和2號瓶的物質(zhì)充分混合均勻，再將3號瓶的物質(zhì)溶解其中，輕輕搖動(勿劇烈搖動)，使菊萄糖氧化酶和過氧化物酶完全溶解。此溶液須在4℃左右保存，有效期1個月。2.2.30.085mol/L亞鐵氰化鉀溶液:稱取3.7g亞鐵氰化鉀〔K4Fe(CN),·3H,O,GB1273，分析純]，溶于100mL重蒸餾水中，搖勻。2.2.40.25mol/L硫酸鋅溶液:稱取7.7g硫酸鋅(ZnSO,·7H,O,GB666，分析純)，溶于100mL重蒸餾水中，搖勻。2.2.50.1mol/L氫氧化鈉溶液:稱取4g氫氧化鈉(GB629，分析純)，溶于1000
6、mL重蒸餾水中，搖勻。2.2.6葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取經(jīng)10。士20C烘烤2h的葡萄糖(HG3-1094，分析純)1.0000g,溶于重一~~~~~，....~~--~--州.~~~-國家技術(shù)監(jiān)督局1996一04一10批準(zhǔn)1996一12一01實(shí)施GB/T16285-1996蒸餾水中，定容至100ml，搖勻?qū)⒋巳芤河弥卣麴s水稀釋叭。。一叭。。，即為200pg/mL葡萄搪標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.3儀器和設(shè)備實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器及下列各項(xiàng):2.3.1研缽或粉碎機(jī)。2.3.2分析篩。2.13組織搗碎機(jī)。2.3.4恒溫水浴鍋。2.3.5可見光分光光度計(jì)。2.3.6微量移液管:1.00mL，精
7、度。.01mLe2.4試樣的制備2.4.1固體樣品粉末狀樣品:取有代表性的樣品至少2009，充分混勻，置于密閉的玻璃容器內(nèi)。顆粒狀樣品:取有代表性的樣品至少200g，用粉碎機(jī)粉碎，或用研缽研細(xì)，通過100目分析篩，置于密閉的玻璃容器內(nèi)。新鮮水果、蔬菜等固體樣品:取有代表性的可食部分至少2009，用組織搗碎機(jī)搗碎，置于密閉的玻璃容器內(nèi)。2.4.2糊狀樣品取有代表性的樣品至少2009，充分混勻，置于密閉的玻璃容器內(nèi)。2.4.3固液體樣品取有代表性的樣品至少2009，用組織搗碎機(jī)搗碎，置于密閉的玻璃容器內(nèi)。2.4.4液體樣品取有代表性的樣品至少200mL，充分混勻，置于
8、密閉的玻璃
