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《原發(fā)性肝癌組織中肝素酶表達與肝癌侵襲 轉移關系的研究 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、原發(fā)性肝癌組織中肝素酶表達與肝癌侵襲轉移關系的研究羅志強劉鋒邵江華鄔林泉【摘要】目的探討乙酰肝素酶(HeparanaseHpa)在肝癌中的表達及其與肝癌臨床病理特征的關系。方法分別采用RT-PCR和免疫組織化學法檢測HpamRNA及Hpa蛋白在肝細胞肝癌、癌旁肝組織及肝癌細胞株中的表達。結果肝癌HpamRNA和蛋白的表達顯著高于癌旁及正常肝組織(P0.05),肝癌組織中HpamRNA的表達與TNM分期、Edmondson分級和復發(fā)有關(P0.05)。結論HpamRNA及蛋白在肝癌中高表達,并與肝癌的侵襲轉移、復發(fā)、預后有關?！娟P鍵詞】肝細胞肝癌乙酰肝素酶侵襲轉移復發(fā)【Abstract】O
2、bjectiveThemainaimofthisinvestigationistoexploretheexpressionofheparanasemRNAandproteininhepatocellularcarcinoma(HCC)anditsrelationshiperasechainreaction(RT-PCR)andimmunohistochemicalstainingRNAandproteininnormalhepatictissues,tumortissuesandadjacenttissuesofhepatocellularcarcinoma.ResultsTheexpr
3、essionofHpamRNAandproteininHCCtissuesalhepatictissues(P0.05).Itondson-Steiner’sclassification(P0.05).ConclusionOverexpressionoftheheparanasemRNAandproteinrelatestotheinvasion,metastasis,recurrenceandprognosisofhepatocellularcarcinoma.【KeyaHeparanaseInvasionMetastasisRecurrence乙酰肝素酶(heparanase,HPA
4、)是1999年克隆分離出的一種葡糖苷酸內切酶。它可降解硫酸乙酰肝素(hearansulfate,HS),破壞細胞外基質和血管基底膜,并促進腫瘤新生血管生成,使腫瘤細胞實現(xiàn)侵襲轉移。作者運用RT-PCR和免疫組織化學法對HpamRNA及Hpa蛋白在肝細胞肝癌、癌旁肝組織及肝癌細胞株中的表達進行檢測,檢測33例原發(fā)性肝細胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)標本中HPA的基因表達,并結合病人的臨床病理學和隨訪資料,以探討HPA可否作為HCC轉移潛能的可靠標志。1臨床資料1.1一般資料新鮮冷凍的標本取自2005年8月至2006年4月南昌大學第二附屬醫(yī)院普外科手術切除并
5、經(jīng)病理學檢查證實的33例HCC(包括癌和癌旁肝組織)和9例肝臟良性腫瘤(取瘤旁肝組織作正常對照)。收集病人臨床病理學檢查資料,HCC組中男28例,女5例;年齡29～73歲,平均49歲。28例術后6～16個月內獲得隨訪,占85%(28/33)。根據(jù)手術記錄、術后病理學檢查報告等,將有癌栓、肝內播散即衛(wèi)星癌灶和(或)淋巴結轉移的14例HCC病人定為高轉移復發(fā)傾向組。反之,無癌栓、肝內衛(wèi)星癌灶和(或)淋巴結轉移的19例HCC病人為低轉移復發(fā)傾向組。其中癌灶長徑≤5cm8例,＞5cm25例;癌灶包膜完整14例、不完整19例;甲胎蛋白(AFP)陽性26例、陰性7例;HBsAg陽性27例、陰性6例;
6、合并明顯肝硬化18例、無明顯肝硬化15例;腫瘤EdmondsonⅠ、Ⅱ級13例、Ⅲ、Ⅳ級20例;TNMⅠ、Ⅱ期18例、Ⅲ、Ⅳ期15例。隨訪有和無轉移復發(fā)各14例。肝臟良性腫瘤9例中男4例,女5例;年齡32～65歲,平均41歲;其中肝海綿狀血管瘤8例、肝局灶性結節(jié)性增生1例。1.2總RNA提取和半定量RT-PCR檢測Trizol總RNA分離試劑盒(Gibco)Trizol一步法提取組織總RNA,甲醛變性膠電泳鑒定及紫外分光光度儀測定OD值后,逆轉錄合成cDNA。AMV為TaKaRa公司產(chǎn)品,dNTP購自上海生物工程公司。HPA引物參照文獻〔１〕設計,由上海生物工程公司合成,上游為5’-2T
7、TCGATCC2CAAGAAGGAATCAAC23’,下游為5-2GATTCAGTTA2CATGGCATCACTAC-3’,其擴增片段長度為585bp。采用β2actin作為內參照,其引物由上海博亞生物公司合成,上游序列為5’2TTCCAGCCTTCCTTCCTGG23’,下游為5’2ATTGCTCCTCCTGAGCGCAA23’,擴增片段長度為224bp。按50μl反應體系行PCR擴增。TagTMDNA聚合酶為TaKaRa產(chǎn)品。H
