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乳酸菌水解結(jié)合膽鹽能力及降膽固醇能力研究張旻
1研究背景實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果討論結(jié)論
2研究背景目前關(guān)于BSH酶的研究概況關(guān)于乳酸菌降膽固醇能力及其機(jī)理的研究研究目的
3BSH酶的作用位點(diǎn)BSH酶甘氨膽酸鈉去結(jié)合膽酸膽固醇Na
4BSH酶的作用與乳酸菌的耐膽鹽能力有關(guān)改善細(xì)胞膜的特性，使膽固醇結(jié)合入細(xì)胞膜改變了宿主體內(nèi)膽固醇代謝途徑降低宿主對(duì)脂肪的消化能力其它作用：胃腸道定植、營(yíng)養(yǎng)作用、增強(qiáng)免疫力等也有一些關(guān)于其存在副作用的研究
5降膽固醇優(yōu)良菌株耐膽鹽、耐低pH、耐滲透壓在宿主體內(nèi)降膽固醇效果好很多研究結(jié)果顯示，BSH酶可作為篩選高性能菌株的一個(gè)指標(biāo)
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8研究目的通過(guò)測(cè)定去結(jié)合膽鹽能力與體外降膽固醇能力評(píng)價(jià)并篩選現(xiàn)有菌株探索乳酸菌降膽固醇的機(jī)理，分析共沉淀作用在菌株膽固醇去除總量中所占比例，并初步探討膽汁鹽在其中發(fā)揮的作用
9實(shí)驗(yàn)用菌株共6個(gè)種，14株所用結(jié)合型膽汁鹽：?；悄懰徕c（SIGMA）
10第一部分：菌株篩選14株乳桿菌水解結(jié)合膽鹽產(chǎn)膽酸的能力，用于評(píng)價(jià)其生長(zhǎng)過(guò)程中BSH酶活性14株乳桿菌降膽固醇能力測(cè)定結(jié)果
11菌株去結(jié)合膽鹽及體外降膽固醇能力結(jié)論1：菌株Lf1、LS31、S1b、Bm29、La3的綜合性能較好
12第二部分:機(jī)理探討共沉淀作用在體內(nèi)并不存在，因此有必要首先將共沉淀作用與其它作用進(jìn)行分別討論本實(shí)驗(yàn)首先作出不同濃度梯度膽酸－膽固醇的共沉淀曲線(xiàn)
13不同濃度梯度膽酸－膽固醇共沉淀標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)pH＝3.5pH＝4.0
14膽酸濃度mM僅化學(xué)作用存在的情況下膽酸－膽固醇共沉淀曲線(xiàn)膽固醇去除量(ug/ml)－pH3.5－pH4.0
15曲線(xiàn)擬合后得到關(guān)系式：Y=0.28385-0.31715X+0.68178X2Y-沉淀的膽固醇量（ug/ml）X-膽酸濃度（mM）R=0.97
16根據(jù)關(guān)系式計(jì)算各株菌產(chǎn)膽酸濃度所對(duì)應(yīng)的膽固醇共沉淀量結(jié)論2：乳酸菌在體外實(shí)驗(yàn)中降膽固醇并不是單純的共沉淀作用引起的
17因?yàn)楣渤恋碜饔帽仨氃谟心懼}存在的情況下才能發(fā)生，所以設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)：添加0.3％膽汁鹽與未添加膽汁鹽的培養(yǎng)基中乳酸菌的降膽固醇能力測(cè)定關(guān)于膽汁鹽作用的探討
18實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在未添加膽汁鹽的培養(yǎng)基中所有實(shí)驗(yàn)菌株完全沒(méi)有降膽固醇能力（數(shù)據(jù)未列出）添加有膽汁鹽的培養(yǎng)基降膽固醇能力見(jiàn)前面表格結(jié)論：膽固醇摻入細(xì)胞膜或進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部必須在膽汁鹽存在的情況下才能發(fā)生
19結(jié)論1.篩選得到綜合性能較好的菌株Lf1、LS31、S1b、Bm29、La32.乳酸菌在體外實(shí)驗(yàn)中降膽固醇并不是單純的共沉淀作用引起的3.膽固醇摻入細(xì)胞膜或進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部必須在膽汁鹽存在的情況下才能發(fā)生
20Thankyou！
21膽固醇初級(jí)膽酸次級(jí)膽酸膽固醇代謝過(guò)程膽汁鹽是膽固醇代謝的終產(chǎn)物在腸道內(nèi)6.0~6.5的pH值條件下以膽汁鹽的形式存在結(jié)合型膽酸
