微生物論文---自來水中細(xì)菌總數(shù)的測定

《微生物論文---自來水中細(xì)菌總數(shù)的測定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、自來水中細(xì)菌總數(shù)的測定姓名：吳燕卓指導(dǎo)老師：陳燕飛（太原師范學(xué)院生物系091班學(xué)號：2009131124）摘要水是微生物廣泛分布的天然環(huán)境。水中微生物的主要來源是：水中的水生性微生物（如光合藻類）、來自土壤徑流、降雨的外來菌群和來自下水道的污染物和人畜的排泄物等［1］。水中的病原菌主要來自于人和動物的傳染性排泄物。我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB5749-85）規(guī)定每毫升水樣細(xì)菌總數(shù)37℃培養(yǎng)24h不得超過100個(gè)。所謂細(xì)菌總數(shù)，指1mL水樣中所含的細(xì)菌菌落的總數(shù)。目前一般采用普通牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基在保證無菌的環(huán)境下，采取自來水的樣品，利用培養(yǎng)基制作平板［2］。按菌落計(jì)數(shù)方法進(jìn)行計(jì)數(shù)

2、，通過實(shí)驗(yàn)測得的菌數(shù)對照國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)來判斷水質(zhì)［3］。對自來水用平板菌落技術(shù)測定細(xì)菌總數(shù)，通過觀測得到如下結(jié)果：在顯微鏡下可觀察到眾多的菌落且種類繁多，取其平均值得到，自來水中細(xì)菌總數(shù)為13/mL。自來水的微生物學(xué)檢驗(yàn)，在保證飲水安全和控制傳染病上有著重要意義，同時(shí)也是評價(jià)水質(zhì)狀況的重要指標(biāo)。關(guān)鍵字自來水平板菌落計(jì)數(shù)技術(shù)牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基乳白色菌細(xì)菌總數(shù)前言平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。細(xì)菌總數(shù)是指水樣在一定

3、條件下培養(yǎng)后（培養(yǎng)基成分，培養(yǎng)溫度和時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等）所得1mL水樣所含菌落的總數(shù)。本實(shí)驗(yàn)只包括一群能在營養(yǎng)瓊脂上發(fā)育的嗜中溫的需氧的細(xì)菌菌落總數(shù)［4］。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。除采用平板計(jì)數(shù)技術(shù)測定水中細(xì)菌總數(shù)外，現(xiàn)在已有許多種快速、簡便的微生物檢測儀或試劑紙等也用來測定水中細(xì)菌總數(shù)［5］。水是生命之源，人的生存離不開水環(huán)境，水質(zhì)的好壞對人們生活起著至關(guān)重要的作用，而判斷水質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)，微生物在水中的數(shù)量、種類是必不可少的。自來水的微生物學(xué)檢驗(yàn)，在保證飲水安全和控制傳染病上有著重要意義，同時(shí)也是評價(jià)水質(zhì)狀況的重要指標(biāo)［6］。61材料與方法1.1材料、試劑與儀

4、器1.1.1實(shí)驗(yàn)的時(shí)間與地點(diǎn)：2010年11月1日———太原師范學(xué)院（南區(qū)）微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室1.1.2材料：自來水1.1.3試劑：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、1moL/LNaOH、1moL/LHCL、滅菌水1.1.4儀器：高壓蒸氣滅菌鍋、培養(yǎng)皿、三角燒瓶、天平、牛角匙、pH試紙（pH5.5-9.0）、麻繩、牛皮紙、量筒、玻璃棒、電熱爐、稱量杯1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1滅菌［7］1.2.1.1滅菌物品的放入：首先將高壓蒸氣滅菌鍋的內(nèi)鍋層取出,再向外鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。放回內(nèi)鍋層,并加入用報(bào)紙包好的培養(yǎng)皿、三角燒瓶、吸管。加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的排氣槽內(nèi)

5、。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋緊相對的兩個(gè)螺旋，使螺旋松緊一致，勿使漏氣。1.2.1.2高壓蒸氣滅菌鍋的調(diào)節(jié)：打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸氣壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力上升到所需壓力時(shí)，通過高壓蒸汽滅菌鍋上的按鈕調(diào)節(jié)壓力、溫度和時(shí)間，維持壓力至所需時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)用0.1MPa,121℃,20min滅菌。滅菌時(shí)間到后，切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至“0”時(shí)打開排氣閥，旋松螺旋，打開蓋子，取出滅菌物品。1.2.2水樣的采取先放開水龍頭使水流5min后，用滅菌后的三角燒瓶接取水樣，迅速地進(jìn)行分析。1.2.3制備

6、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基［6］1.2.3.1稱量用天平稱量33g牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基粉末置于燒杯中。1.2.3.2溶化在上述燒杯中加入1000mL蒸餾水，然后，在石棉網(wǎng)上加熱，并用玻璃棒攪拌直至沸騰2分鐘。61.2.3.3調(diào)pH在未調(diào)pH前，先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH。如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1mol/LNaOH，邊加邊攪拌，并隨時(shí)用pH試紙測其pH，直至pH達(dá)7.6。反之，用1mol/LHCl調(diào)節(jié)。1.2.4細(xì)菌總數(shù)測定1.2.4.1加水：滅菌吸管吸取1mL水樣，注入其中一套滅菌的培養(yǎng)皿中。共做2個(gè)培養(yǎng)皿。1.2.4.2加培養(yǎng)基：分別傾注約15mL已溶化并冷卻到45

7、℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，并立即在桌上作平面搖動，使自來水水樣與培養(yǎng)基充分混勻。1.2.4.3空白對照：另取一空的滅菌培養(yǎng)皿，不加水樣，直接傾注牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基15mL，作空白對照。1.2.4.4培養(yǎng)計(jì)數(shù)：待培養(yǎng)基凝固后，倒置，放于37℃恒溫箱中，培養(yǎng)24小時(shí)，然后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)即為1mL自來水的細(xì)菌總數(shù)。2結(jié)果2.1菌落照片2.2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表自來水中菌落數(shù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)平板序號12對照組平均值菌落數(shù)目（個(gè)）678315606根據(jù)國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)可飲用水中的細(xì)