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《銀杏類黃酮3’+羥化酶基因的克隆與表達(dá)分析》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、園藝學(xué)報(bào)，2015，42(4)：643–654.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0822；http：//www.ahs.ac.cn643銀杏類黃酮3’羥化酶基因的克隆與表達(dá)分析1,3,*1,3,*1,31,2,**李琳玲，程華，陳小玲，程水源12（經(jīng)濟(jì)林木種質(zhì)改良與資源綜合利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北黃岡438000；武漢輕工大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院，3武漢430023；黃岡師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，湖北黃岡438000）摘要：利用簡(jiǎn)并PCR和RACE
2、技術(shù)從銀杏葉片中分離到黃酮3’羥化酶基因GbF3’H的cDNA全長(zhǎng)序列（GenBankNo.：KP056747）。其全長(zhǎng)為2144bp，含有一個(gè)1671bp的開放式閱讀框（ORF），編碼556個(gè)氨基酸序列，預(yù)測(cè)氨基酸大小為63.47kD，等電點(diǎn)為7.71。蛋白質(zhì)同源序列分析表明，GbF3’H與其他物種F3’H同源性較低，而與菊苣（Cichoriumintybus）同源性最高，為56.3%。同源建模分析顯示GbF3’H與P450家族蛋白的三維結(jié)構(gòu)及活性位點(diǎn)高度相似，最終定位于微粒體膜上。進(jìn)化樹分析結(jié)果顯示GbF3’H與其他植物分
3、化較早，序列差異較大。組織表達(dá)分析顯示，GbF3’H在銀杏不同組織中都有表達(dá)，其中雄蕊表達(dá)水平最高，其次為成熟葉。誘導(dǎo)表達(dá)分析顯示，GbF3’H轉(zhuǎn)錄水平受UV-B、6-BA、SA、ABA和IAA影響誘導(dǎo)上調(diào)，而傷害處理對(duì)其表達(dá)量無(wú)明顯影響。GbF3’H誘導(dǎo)表達(dá)模式與調(diào)控銀杏黃酮含量變化呈正相關(guān)，其上游調(diào)控序列存在與黃酮調(diào)控相關(guān)的順式元件，意味著GbF3’H可能參與了銀杏黃酮類物質(zhì)的合成代謝，并與黃酮類物質(zhì)向花青素合成分流有關(guān)。關(guān)鍵詞：銀杏；類黃酮3’羥化酶；黃酮；表達(dá)調(diào)控中圖分類號(hào)：S664.3文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：0513
4、-353X（2015）04-0643-12MolecularCloning，CharacterizationandExpressionofFlavonoid3’Hydroxylase-likeProteinGenefromGinkgobiloba1,3,*1,3,*1,31,2,**LILin-ling，CHENGHua，CHENXiao-ling，andCHENGShui-yuan1（EconomicForestGermplasmImprovementandComprehensiveUtilizationofResource
5、sofHubeiKeyLaboratories2Huanggang，Hubei438000，China；WuhanPolytechnicUniversity，SchoolofBiologyandPharmaceuticalEngineering，3Wuhan430023，China；CollegeofLifeScience，HuanggangNormalUniversity，Huanggang，Hubei438000，China）Abstract：Thefull-lengthcDNAsequencesofF3’Hgene（de
6、signatedasGbF3’H）wereisolatedfromGinkgobilobaforthefirsttime，GenBankNo.KP056747.Thefull-lengthcDNAofGbF3’His2144bplongandcontainsa1671bpopenreadingframe（ORF）encodinga556aminoacidprotein，withapredictedmolecularweightofabout63.47kDandanisoelectricpointof7.71.Phylogene
7、tictreeanalysisrevealedthatGbF3’HsharedthesameancestorwithotherF3’H，butthedivergencetimeisearly.BioinformaticsanalysisshowthatGbF3’HhaveasignalrecognitionpeptideandbelongtoamicrosomalcytochromeP450-dependentmonooxygenasesmultigenefamilies.TheexpressionanalysisbyRT-P
8、CRshowedthatGbF3’HhadtissuespecificmannerinG.biloba，andthehighestexpressioninstamens，the收稿日期：2014–11–02；修回日期：2015–04–07基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（314
