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1、HPLC法測定獨子藤中雷公藤紅素的含量作者:劉慧瓊,李國成,盧綺雯,王定勇【】目的建立高效液相色譜法測定獨子藤中雷公藤紅素的含量,為雷公藤紅素的藥用植物資源開發(fā)提供依據(jù)。方法采用SupelcoDiscoveryC18柱(25cmXmm,5um)流動相為甲醇-5%(體積分數(shù))H3P04水溶液(體積比80:20)流速為mL?min-1,檢測波長為426nm。結(jié)果雷公藤紅素在40200ug?mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=l)。獨子藤中雷公藤紅素的平均質(zhì)量分數(shù)為5%,雷公藤紅素的平均回收率為%,RSD=%(n=6)。結(jié)論該方法簡便
2、、準確、靈敏度高、重現(xiàn)性好,可用于獨子藤中雷公藤紅素的含量測定;獨子藤中雷公藤紅素含量較高,可作為雷公藤紅素的資源植物加以開發(fā)利用。【關(guān)鍵詞】獨子藤;雷公藤紅素;高效液相色譜法;成分分析Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbbyHPLCfordevelopingthemedicinalresourcesofAnexternalstandardmethodbyHPLCwithDiscoveryC18column(25cmX
3、mm,5Pm)wasmobilephasewasconsistedofmethanol-5%()phosphoricacidsolution(80:20)()attheflowrateofmL?detectionwavelengthwas426Itshowedgoodlinearityintherangeof40~200ug?mL-l(r=l).ThecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbwas5%,andtheaveragerecoveryrateofcelastrolwas%(R
4、SD=%,n=6).ConclusionThemethodissimpleandaccurate,sensitiveandreproducibleandcanbeusedinthequalitycontrolofCelastrusmonospermuscontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbwashigh,whichcanbeexploidedastheherbalresource.Keywords:CelastrusmonospermusRoxb:tripterine;HPLC;as
5、say獨子藤(CelastrusmonospermusRoxb.)為衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物,分布于我國福建、廣東、云南、貴州、廣西等省區(qū)及越南和印度等地,主要生長于海拔10⑻m以上的林帶中[1]。研宄表明獨子藤的化學(xué)成分主要為生物堿和木栓烷型三萜類化合物,其中木栓烷型三萜類化學(xué)成分對風(fēng)濕病、白血病和皮膚病均有較好療效[2]。雷公藤紅素為木栓烷型三萜類化合物,是雷公藤片、雷公藤多苷片等治療類風(fēng)濕病制劑的有效成分之一,主要來源于中藥雷公藤的根皮,具有抗炎、免疫抑制及抗腫瘤等多種藥理活性[3]。中美科學(xué)家于XX年聯(lián)合發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素的抗癌新機制[
6、4],引發(fā)了雷公藤紅素抗癌活性研究的熱潮。我們在獨子藤的化學(xué)成分研究中發(fā)現(xiàn)該植物根中富含雷公藤紅素,是一種潛在的雷公藤紅素植物資源,具有重要開發(fā)價值。但至今尚未見有關(guān)獨子藤中雷公藤紅素含量測定的文獻報道。本文建立了獨子藤中雷公藤紅素的含量測定方法,對合理開發(fā)獨子藤植物資源、促進雷公藤紅素的深入研究,均具有重要意義。1儀器與試藥儀器ShimadzuLC-10AT型高效液相色譜儀(日本島津公司),SPD-10AT型紫外-可見檢測器(日本島津公司),HW-2000色譜工作站;Millipore溶液過濾器;Milliporeum濾膜;AY12
7、0電子分析天平(Shimadzu公司);RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)。試藥雷公藤紅素對照品(自制,經(jīng)HPLC法測定純度彡98%);獨子藤于XX年10月采自廣東省陽春市,由廣東藥學(xué)院李書淵教授鑒定為獨子藤CelastrusmonospermusRoxb.:硅膠(柱層析硅膠,青島海洋化工有限公司);甲醇為色譜純;水為超純水;其余試劑均為分析純。2方法與結(jié)果色譜條件色譜柱:SupelcoDiscoveryC18柱(25cmXmm,5ym);流動相:甲醇-體積分數(shù)5%H3P04水溶液(體積比80:20);流速:mL?min-1
8、;檢測波長:426nm;柱溫:25°C;進樣量:20uLo色譜圖見圖1。對照品貯備液的制備精密稱取雷公藤紅素對照品mg,置25mL容量瓶中,加適量甲醇溶解并定容,搖勻,得到質(zhì)量濃度為mg?mL-l的雷公藤紅素對照品貯備液