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1、HPLC法測定鹿蹄草中槲皮素的含量作者：張文,黎鈺鈴,封麗彬,范衛(wèi)鋒【摘要】目的建立HPLC法測定鹿蹄草中槲皮素含量的方法。方法采用HPLC法,色譜柱：AgilentEclipseXDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm)；流動相：甲醇-0.1%磷酸(50∶50)；檢測波長：370nm。結果槲皮素在0.092～0.46μg范圍內(nèi)線性關系良好,平均回收率為99.24%,RSD＝0.70%。結論方法簡便、準確、靈敏度高、重復性好,能有效測定鹿蹄草藥材中槲皮素含量?！娟P鍵詞】鹿蹄草；槲皮素；高效液相色譜法；含量測定Abstract：ObjectiveTosetupame
2、thodfordeterminingthequercetininPyrolacalliathaH.Andres.MethodHPLCmethodwascarriedonAgilentEclipseXDB-C18column(4.6mm×150mm,5μm)withmobilephaseofmethanol-0.1%phosphoricacid(50∶50),andthedetectingwavelengthwasat370nm.ResultThestandardcurvewaslinearwithintherangeof0.092～0.46μg.Theaveragerec
3、overyratewas99.24%andRSDwas0.70%.ConclusionThemethodissimple,accurate,highlysensitiveandreproducible.ItcanbeusedforthequalitydeterminationofquercetininPyrolacalliathaH.Andres.Keywords：PyrolacalliathaH.Andres；quercetin；HPLC；contentdetermination鹿蹄草為鹿蹄草科植物鹿蹄草PyrolacalliathaH.Andres的干燥全草,習稱鹿銜
4、草,收載于2005年版《中華人民共和國藥典》(一部)。其性溫、味甘苦,具有祛風濕、強筋骨、止血之功效,用于風濕痹痛、腰膝無力、月經(jīng)過多、久咳勞嗽[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明,該藥具有明顯的抗菌、抗炎、促進免疫、改善冠心病癥狀等作用[2]。其主要含有鹿蹄草素、槲皮素等成分。本試驗采用HPLC法測定鹿蹄草中槲皮素的含量?！ ?儀器與試藥Agilent1200系列高效液相色譜儀(包括四元泵,自動進樣器,脫氣機,紫外可見檢測器,柱溫箱)。鹿蹄草(廣西玉林制藥有限責任公司提供,由廣西玉林制藥有限責任公司蒙毅高級工程師鑒定)；槲皮素對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號100081-2
5、00406,含量測定用,純度在98%以上)。水為重蒸餾水,甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純?！ ?方法與結果3 2.1色譜條件色譜柱為AgilentEclipseXDB-C18(4.6mm×150mm,5μm)；流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液(50∶50)；流速：1.0mL/min；檢測波長：370nm；柱溫：30℃；進樣量：10μL。色譜圖見圖1。 2.2對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品適量,加甲醇制成每1mL含槲皮素46μg的溶液,作為對照品溶液?！ ?.3供試品溶液的制備取鹿蹄草粉末適量,取0.5g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇-10%鹽酸(3∶1
6、)的混合溶液50mL,稱定重量,回流1h,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,濾液用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液?！ ?.4線性關系考察分別精密吸取槲皮素對照品溶液(46μg/mL)2、4、6、8、10mL,置于10mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,各進樣10μL,連續(xù)進樣2次,測定峰面積。以對照品進樣量(μg)為橫坐標,峰面積為縱坐標,繪制標準曲線,得回歸方程：Y＝5.3287×102X－0.2009,r＝0.9999,在0.092～0.46μg范圍內(nèi)呈良好的線性關系?！ ?.5精密度試驗取槲皮素對照品溶液,各重復進樣6次,測定
7、峰面積,結果槲皮素峰面積RSD＝0.58%?！ ?.6重復性試驗取同一批的樣品6份,按“2.3”項下方法制備供試品溶液,測定鹿蹄草中槲皮素含量,結果RSD＝0.82%?！ ?.7穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液,分別于配制后0、4、8、12h依法測定峰面積,結果RSD＝0.56%,表明樣品溶液在12h內(nèi)基本穩(wěn)定?！ ?.8加樣回收率試驗 取已知槲皮素含量的鹿蹄草粉末,取約0.53g,分別精密稱定,平行稱取6份,各加入一定量的槲皮素對照品,制備成供試品溶液,在所確定的色譜條件下進行測定。結果槲皮素平均加樣回收率為99.24%,RSD
