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《hplc法測定扶?；ㄖ虚纹に氐暮空撐摹酚蓵T上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、HPLC法測定扶?；ㄖ虚纹に氐暮空撐摹菊磕康慕⒎錾；ㄖ虚纹に氐暮繙y定方法。方法采用HPLC法，色譜柱為DikmaplatisilODS柱(250mm×4.6mm,5μm)，流動相為甲醇0.5%磷酸水溶液(體積比30∶70)，流速1.0mL·min-1，柱溫30℃，檢測波長360nm。結(jié)果槲皮素進樣量在0.0416～0.416μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為98.95%，RSD為1.09%(n=6)。結(jié)論該方法操作簡便、快速、準(zhǔn)確.freelethodforthedeterminationofquer

2、cetininFlosHibisciRosaesinensis.MethodsHPLCedusingaDikmaplatisilODScolumn(250mm×4.6mm,5μm)ethanol0.5%phosphoricacidsolution(30∶70)asmobilephaseunderafloL·min-1.Thecolumntemperature.ResultsThecalibrationcurveofquerceinethodisconvenient,reproducibleandaccurate,andca

3、nbeusedinqualitycontrolofFlosH.Rosaesinensis.KeyaplatisilODS色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)，流動相為甲醇0.5%磷酸水溶液(體積比30∶70)，流速1.0mL·min-1，檢測波長360nm，柱溫30℃，進樣量20μL。理論板數(shù)按槲皮素計算大于5000，分離度大于1.5。色譜圖見圖1。2.2溶液的制備2.2.1對照品溶液的制備精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇制成104μg·mL-1的溶液，即得。2.2.2供試品溶液的制備將扶?；ㄋ幉年幐桑鬯?，過3號篩，

4、取粉末約1g，精密稱定，加甲醇50mL，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘渣加20%鹽酸15mL溶解，加熱回流1h，迅速冷卻，用石油醚萃取3次，每次15mL，合并水相，蒸干，殘渣加甲醇溶解并定容至25mL，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。圖1對照品(A)和供試品(B)的高效液相色譜圖Figure1HPLCchromatogramsofstandard(A)andsample(B)2.3線性關(guān)系考察分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

5、精密吸取20μL，按“2.1”項下條件進樣。以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，進樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=40969X-1090.3，r=0.9998。結(jié)果表明，槲皮素進樣量在0.0416～0.416μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。2.4精密度試驗精密吸取對照品溶液20μL，連續(xù)進樣5次，結(jié)果槲皮素峰面積的RSD為0.86%，表明儀器的精密度良好。2.5穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液20μL，分別于0、2、4、6、8、12h進樣分析。結(jié)果槲皮素峰面積的RSD為1.58%，表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好

6、。2.6重復(fù)性試驗精密稱取同一批樣品，按“2.2.2”項下方法平行制備供試品溶液5份，測定槲皮素含量，求得RSD為1.29%，重復(fù)性良好。2.7加樣回收率試驗取扶桑花粉末約0.25g，精密稱定，分別加入一定量的槲皮素對照品，按“2.2.2”項下方法處理并測定槲皮素含量，平均回收率為98.95%，RSD為1.09%，見表2。2.8樣品測定取不同批次的樣品，按“2.2.2”項下方法提取槲皮素，精密吸取供試品溶液20μL，注入高效液相色譜儀，記錄槲皮素的峰面積，采用外標(biāo)法計算含量。結(jié)果見表3。表2加樣回收率試驗結(jié)果表3扶?；ㄖ虚纹に?/p>

7、的含量測定(n=3)3討論3.1本實驗曾考察了不同質(zhì)量分數(shù)(10%、20%、30%)的鹽酸，在不同溫度(80、90、100℃)下，水解不同的時間(0.5、1、1.5h)的效果，結(jié)果表明用20%的鹽酸，于90℃水解1h，所得槲皮素提取率最高。3.2色譜條件考察了甲醇水、甲醇0.1%磷酸水溶液、甲醇0.5%磷酸水溶液等流動相的分離效果，發(fā)現(xiàn)流動相中加入磷酸可提高分離度，改善峰形、避免拖尾，以甲醇0.5%磷酸水溶液為流動相時分離效果最好。3.3本文建立的HPLC測定扶?；ㄩ纹に睾康姆椒ň哂泻啽恪⒏咝?、重復(fù)性高等特點，可用于

8、扶?；ㄋ幉牡馁|(zhì)量控制?！?/p>