芪芩ⅰ號對小鼠柯薩奇b3病毒性心肌炎的防治作用

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1、芪芩Ⅰ號對小鼠柯薩奇B3病毒性心肌炎的防治作用【關(guān)鍵詞】病毒性心肌炎  【Abstract】AIM:ToexploretheinhibitiveeffectofQiqinⅠonCoxsackievirusB3(CVB3),anditspreventiveandtherapeuticeffectonCVB3viralmyocarditis(VMC)inmice.METHODS:①ThemicrodosecytopathogeniceffectinhibitionassayicelydividedintocontrolgroupandQiqinⅠgroup.Themic

2、eyocardialpathologicalscoresated.RESULTS:①TheeffectiveandnontoxicconcentrationofQiqinⅠviralinfection.③paredyocardialpathologicalscoresinQiqinⅠgroupsignificantlydecreased(P<0.01).CONCLUSION:InadditiontoinhibitingCVB3invitro,QiqinⅠalsohasobvioustherapeuticeffectonCVB3viralmyocarditisi

3、nvivoinmice.  【Keyyocarditis;QiqinⅠ  【摘要】目的:探討復(fù)方制劑芪芩Ⅰ號(QiqinⅠ)水煎劑對柯薩奇病毒B3(CVB3)的抑制作用和對小鼠CVB3病毒性心肌炎的防治作用.方法:①在Hep2細(xì)胞上采用微量細(xì)胞病變抑制法,從直接滅活病毒、抑制細(xì)胞內(nèi)病毒復(fù)制、阻斷病毒吸附三方面研究芪芩Ⅰ號對CVB3的抑制作用.②采用BALB/c鼠建立CVB3病毒性心肌炎的動(dòng)物模型,建立病毒對照組和芪芩Ⅰ號組,然后在不同時(shí)間點(diǎn)處死小鼠,記錄其心肌組織病變積分.結(jié)果:①芪芩Ⅰ號水煎劑對細(xì)胞無毒且效應(yīng)明顯的原生藥濃度是2.88g/L和1.44g/L.②芪芩

4、Ⅰ號可能具有直接滅活CVB3、抑制細(xì)胞內(nèi)CVB3復(fù)制、阻斷CVB3吸附細(xì)胞的作用.③芪芩Ⅰ號組小鼠的心肌病變積分明顯低于病毒對照組,二者比較有顯著差異(P<0.01).結(jié)論:體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)芪芩Ⅰ號可能對CVB3有抑制作用,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明芪芩Ⅰ號在體內(nèi)對小鼠CVB3病毒性心肌炎有良好的防治作用.  【關(guān)鍵詞】柯薩奇病毒B3;病毒性心肌炎;芪芩Ⅰ號  0引言  病毒性心肌炎(viralmyocarditis,VMC)是小兒常見的臨床疾病,其治療一直是臨床工非常關(guān)注的問題[1,2].VMC的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,目前多認(rèn)為早期主要是病毒直接侵犯心肌,后期則以病毒持

5、續(xù)感染和免疫損害為主.在VMC的發(fā)生發(fā)展中病毒感染是一個(gè)重要的環(huán)節(jié),柯薩奇B3病毒(CoxsakievirusB3,CVB3)是主要病原體之一,目前尚缺乏針對CVB3有效的抗病毒藥物.近年來,大量研究證實(shí),中藥在抗CVB3上具有一定的優(yōu)勢.芪芩Ⅰ號(QiqinⅠ)是我們經(jīng)過反復(fù)研究篩選出的一個(gè)組方,由黃芪、黃芩等幾味中藥組成,具有清熱解毒、益氣養(yǎng)陰、活血化瘀的功效.我們旨在研究芪芩Ⅰ號對小鼠CVB3VMC的防治作用及其抗CVB3的作用.  1材料和方法  1.1材料  柯薩奇病毒B3Nancy株(本實(shí)驗(yàn)中心提供).采用ReedMuench微量法滴定病毒效價(jià)為104T

6、CID50.-30℃保存待用.Hep2細(xì)胞(本實(shí)驗(yàn)中心提供)在24孔培養(yǎng)板上于37℃,50mL/LCO2條件下(以下培養(yǎng)條件同此)用含20g/L小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基傳代培養(yǎng),生長良好形成單層后用于實(shí)驗(yàn).清潔級近交系BALB/c雄性小鼠,70只,6~8L,每個(gè)稀釋度設(shè)4孔,并設(shè)正常細(xì)胞對照,培養(yǎng)3d,每日觀察細(xì)胞病變情況.測最大無毒稀釋液濃度后,以此濃度為起始之后的4個(gè)稀釋度用于下一步實(shí)驗(yàn).  1.2.1.2芪芩Ⅰ號直接滅活CVB3的作用將上述4個(gè)稀釋濃度的藥液分別與等體積的100TCID50的CVB3病毒液混合,37℃作用3h后,接種于24孔培養(yǎng)板的單層

7、Hep2細(xì)胞上,置37℃培養(yǎng)箱1h后換為RPMI1640維持液,繼續(xù)培養(yǎng).每一個(gè)濃度設(shè)4孔.同時(shí)設(shè)立正常細(xì)胞、37℃存放3h的病毒對照各4孔.定時(shí)觀察細(xì)胞病變(CPE),待正常細(xì)胞生長正常,病毒對照CPE達(dá)~時(shí)判定結(jié)果.  1.2.1.3芪芩Ⅰ號抑制細(xì)胞內(nèi)CVB3復(fù)制的作用去掉細(xì)胞孔中的生長液,將等量的100TCID50的CVB3病毒液接種于單層Hep2細(xì)胞上,吸附1h后換成等量的不同濃度藥液,繼續(xù)培養(yǎng).每一個(gè)濃度設(shè)4孔.同時(shí)設(shè)立正常細(xì)胞、病毒對照孔各4孔.觀察同上.  1.2.1.4芪芩Ⅰ號阻斷CVB3吸附細(xì)胞的作用去掉細(xì)胞孔中的生長液,將等量的不同濃度的藥液

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